一种快速单反应管提取长片段基因组DNA的方法和试剂盒技术

本发明专利技术涉及一种快速单反应管提取长片段基因组DNA的方法，包括以下步骤：a)向样品中加入裂解液和蛋白酶K，使细胞裂解并释放基因组DNA；b)向步骤a)的反应体系中加入沉淀剂，获得基因组DNA的沉淀；c)用清洗液洗涤所得的基因组DNA的沉淀；d)用溶解液溶解基因组DNA。本发明专利技术还涉及适用于上述方法的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
一种快速单反应管提取长片段基因组DNA的方法和试剂盒
本专利技术涉及提取基因组DNA的领域。具体地，本专利技术涉及一种快速单反应管提取长片段基因组DNA的方法，以及适用于此方法的试剂盒。
技术介绍
长片段基因组DNA分子的制备在生物学领域，特别是DNA测序和基因组组装中有着广泛的需求。PacificBiosicences的SMRT长读长测序技术对于单分子测序长度可达60-100Kb1，而OxfordNanoporeTechnology的纳米孔测序技术则可检测长达Mb级别的单分子DNA片段2。用于单体型拼接和基因组组装的10xGenomics3和CPT-seq4等linked-reads技术则需要制备长度为几十到几百Kb的基因组分子片段。BioNanoGenomics公司的基于Saphyr平台的单分子光学图谱技术可以辅助基因组组装、检测染色体结构变异和基因遗传病的检测，用于其标记的分子长度N50(≥150Kb)约为300Kb，最长单分子可达Mb级别5。测序技术和光学图谱等技术的发展，对简单快速地提取长片段基因组DNA分子有了更高的需求。目本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提取长片段基因组DNA的方法，包括以下步骤：/na)向样品中加入裂解液和蛋白酶K，使细胞裂解并释放基因组DNA；/nb)向步骤a)的反应体系中加入沉淀剂，获得基因组DNA的沉淀；/nc)用清洗液洗涤所得的基因组DNA的沉淀；/nd)用溶解液溶解基因组DNA。/n

【技术特征摘要】
1.一种提取长片段基因组DNA的方法，包括以下步骤：
a)向样品中加入裂解液和蛋白酶K，使细胞裂解并释放基因组DNA；
b)向步骤a)的反应体系中加入沉淀剂，获得基因组DNA的沉淀；
c)用清洗液洗涤所得的基因组DNA的沉淀；
d)用溶解液溶解基因组DNA。


2.权利要求1所述的方法，其中所述样品是动物来源的组织或细胞。


3.权利要求1所述的方法，其中所述样品是来自胚胎组织、肝脏组织、胸腺组织、脾脏组织或体液的细胞，或体外培养的细胞系。


4.权利要求3所述的方法，其中所述体液选自血液、血清、血浆、关节液、精液、尿液、汗液、唾液、粪便、脑脊液、腹水、胸水、胆汁和胰腺液。


5.权利要求1所述的方法，其中所述裂解液包含NaCl、Tris-HCl、EDTA和SDS。


6.权利要求5所述的方法，其中所述SDS的浓度为0.1％-8％。


7.权利要求5所述的方法，其中所述裂解液包含RNAseA。


8.权利要求1所述的方法，其中所述蛋白酶K的浓度为0.005-4mg/ml。


9.权利要求1所述的方法，其中所述蛋白酶K和裂解液依次加入或同时加入。


10.权利要求1所述的方法，其中所述沉淀剂包含至少一种无机盐和至少一种醇类。


11.权利要求10所述的方法，其中所述无机盐选自醋酸铵、醋酸钠和氯化钠。


12.权利要求10所述的方法，其中所述醇类选自无水乙醇...

【专利技术属性】
技术研发人员：毛爱平，张海满，张建光，
申请(专利权)人：北京贝瑞和康生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11