幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶及其制备方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，特别涉及一种幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶及其制备方法，本发明专利技术筛选出一种天然的幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶蛋白序列，并分别在其蛋白序列N端添加易于透膜的聚阳离子9肽和疏水小太肽，改造后的幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶基因通过大肠杆菌表达体系进行发酵诱导表达，表达量高；进一步提供了无需经过变形和复性的可溶性表达方法，并且纯化步骤简单方便；通过体外实验发现对改造的幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶幽门螺旋杆菌标准菌株ATCC700392具有很强的裂解能力，为治疗幽门螺旋杆菌感染的研究提供物质和理论基础。

【技术实现步骤摘要】
幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶及其制备方法
本专利技术属于生物
，特别涉及一种幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶及其制备方法。
技术介绍
幽门螺杆菌(helicobacterpylori,HP)感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。目前治疗幽门螺杆菌感染以下方案：1)两联疗法：祕制剂与抗生素联用。2)三联或四联疗法：祕剂+甲硝唑+四环素+奥美拉唑；奥美拉唑+阿莫西林+克拉霉素；祕剂+替硝唑+克拉霉素。这些治疗顺应性非常差，且多株HP出现了耐药性，甚至出现了多重耐药菌和超级细菌。因此，当务之急是寻找一种新型抗菌制剂来应对耐药菌的威胁因而，迫切需要新型药物来替代传统疗法，以达到根治幽门螺杆菌的目的。噬菌体(bacteriophage)作为一种细菌病毒，具有特异性高、对人体无副作用等优点被科学家所重视，但是噬菌体作为一个独立的生命体在用作抗菌制剂时会产生抗噬菌体菌株，且生物安全性一直受到质疑。噬菌体裂解酶(bacteriophageendolysins)是dsDNA噬菌体在感染细菌后期表达的一种水解本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含聚阳离子九肽的幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶的蛋白序列，其特征在于，核苷酸序列为Seq ID No.1，氨基酸序列为Seq ID No.2。/n

【技术特征摘要】
1.一种包含聚阳离子九肽的幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶的蛋白序列，其特征在于，核苷酸序列为SeqIDNo.1，氨基酸序列为SeqIDNo.2。


2.一种包含疏水小肽的幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶的蛋白序列，其特征在于，核苷酸序列为SeqIDNo.3，氨基酸序列为SeqIDNo.4。


3.一种可溶型表达载体pSUMO，其特征在于，包含权利要求1所述的核苷酸序列。


4.如权利要求3所述的表达载体，其特征在于，包含聚阳离子九肽的幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶的基因序列SeqIDNo.1插入质粒pSUMO的SacI/XhoI酶切位。


5.一种可溶型表达载体pSUMO，其特征在于，包含权利要求2所述的核苷酸序列。


6.如权利要求5所述的表达载体，其特征在于，包含疏水小肽的幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶的基因序列SeqIDNo.2插入质粒pSUMO的SacI/XhoI酶切位。


7.一种包含聚阳离子九肽的幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶的工程菌，其特征在于，由将权利要求4所述的表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)而获得。


8.一种包含疏水小肽的幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶的工程菌，其特征在于，由将权利要求6所述的表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)而获得。


9.一种幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)培养权利要求7或8任一所述的幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶工程菌并诱导幽门螺旋杆菌噬菌体裂解酶基因的表达；
(...

【专利技术属性】
技术研发人员：梅丽，赵珊珊，文可馨，苗森，赵梅，
申请(专利权)人：江苏万邦医药科技有限公司，江苏万邦生化医药集团有限责任公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32