一种巴弗洛霉素高产工程菌及其构建和应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术和基因工程领域，具体的讲，是一种巴弗洛霉素高产工程菌及其构建和应用。在Streptomyces lohii野生株或突变株中过表达调控基因、其同源基因或与其功能等同体，所述调控基因为bafG和/或orf1；其中，调控基因BafG和Orf1的序列，分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2。本发明专利技术构建的工程菌能够稳定生产巴弗洛霉素，发酵原料成本低廉，构建步骤简单，可为巴弗洛霉素的药理学研究提供充足的原料来源，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种巴弗洛霉素高产工程菌及其构建和应用
本专利技术属于生物技术和基因工程领域，具体的讲，是一种巴弗洛霉素高产工程菌及其构建和应用。
技术介绍
巴弗洛霉素(bafilomycins)属于十六元大环内酯类抗生素，具有广泛的生物活性，如抗细菌[1]，抗真菌[2]，抗寄生虫[3]，抗骨质疏松[4]，抗肿瘤[5]，免疫抑制[3]等。其中最具代表性的化合物当属巴弗洛霉素A1，对酵母菌等真菌具有显著抑制活性[1]。巴弗洛霉素A1是第一个被鉴定的强力且专一的钾离子载体功能的大环内酯抗生素，其可促进线粒体对钾离子的吸收，并在纳摩尔水平发挥作用，引起线粒体膜电势的消失，氧化磷酸化解耦联以及呼吸作用抑制从而造成线粒体的功能损伤[6]。并且，巴弗洛霉素A1是强力的囊泡型质子泵(V-ATPase)抑制剂，对来自大肠杆菌的K+依赖型质子泵，牛脑的钠钾质子泵和肌浆网钙泵(sarco/endoplasmicreticulumCa2+-ATPase,SERCA)等P型质子泵具有中等强度的抑制活性，对F型质子泵(F-ATPase)无抑制活性[4]。因此，巴弗洛霉素A1在细胞生物学本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种巴弗洛霉素高产工程菌，其特征在于：在Streptomyces lohii野生株或突变株中过表达调控基因、其同源基因或与其功能等同体，所述调控基因为bafG和/或orf1；其中，调控基因BafG和Orf1的序列，分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2。/n

【技术特征摘要】
1.一种巴弗洛霉素高产工程菌，其特征在于：在Streptomyceslohii野生株或突变株中过表达调控基因、其同源基因或与其功能等同体，所述调控基因为bafG和/或orf1；其中，调控基因BafG和Orf1的序列，分别为SEQIDNO.1和SEQIDNO.2。


2.按权利要求1所述巴弗洛霉素高产工程菌，其特征在于：所述突变株为S.lohiiΔorf2&orf3。


3.按权利要求1-2任意一项所述巴弗洛霉素高产工程菌，其特征在于：所述过表达调控基因、其同源基因或与其功能等同体的启动子来源于红霉素抗性基因启动子ermE*或其功能等同体。


4.按权利要求1-2任意一项所述巴弗洛霉素高产工程菌，其特征在于：所述过表达调控基因、其同源基因或与其功能等同体的载体为链霉菌整合型载体pSET152或其功能等同体。


5.一种权利要求1-2任意一项所述巴弗洛霉素高产工程菌的构建方法，其特征在于：
将调控基因为bafG和/或orf1基因与载体连接，分别克隆得到含有目的基因的表达载体，再分别将该表达载体转化进...

【专利技术属性】
技术研发人员：李盛英，李众，张伟，杜磊，张兴旺，
申请(专利权)人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所，
类型：发明
国别省市：山东;37