一种抗人白血病抑制因子单克隆抗体的制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及一种抗人白血病抑制因子单克隆抗体的制备方法及其应用。本发明专利技术提供了一种保藏号为CGMCC No.19161的小鼠杂交瘤细胞，并提供了一种由所述保藏号为CGMCC No.19161的小鼠杂交瘤细胞产生的单克隆抗体，所述抗人白血病抑制因子单克隆抗体具有良好的生物学活性，可有效的结合人白血病抑制因子，封闭人白血病抑制因子与其受体的结合，对动物体内移植的肿瘤细胞生长具有明显的抑制作用，可单独或与其他抗肿瘤药物联合应用于肿瘤的治疗中，具有制备多种肿瘤药物的应用前景。同时，所述制备方法可大幅提高获取具有高治疗价值抗体的筛选效率。

【技术实现步骤摘要】
一种抗人白血病抑制因子单克隆抗体的制备方法及其应用
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种抗人白血病抑制因子单克隆抗体的制备方法及其应用。
技术介绍
人白血病抑制因子(LeukemiaInhibitoryFactor，LIF)是机体分泌的一种生物活性广泛的多功能细胞炎症因子，可由多种组织产生。LIF由180个氨基酸构成，属IL-6细胞因子家族。因为最初发现LIF可作为小鼠髓系白血病细胞系M1巨噬细胞的分化诱导剂和增殖抑制因子，因此被命名为白血病抑制因子。近年研究发现LIF表达水平的升高与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关，LIF可促进肿瘤细胞增殖、上皮细胞间充质转化以及肿瘤细胞转移。目前LIF的表达水平升高已在胆管癌、结直肠癌、胃癌、鼻咽癌、乳腺癌、胰腺癌和膀胱癌等肿瘤组织中被证实(YueX.etal.CancerCell&Microenvironment.2015,2:e877；NicolaNA.etal.CytokineGrowthFactorRev.2015,26:533-544；XuG.etal.JournalofCel本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗人白血病抑制因子单克隆抗体，由保藏编号为CGMCC No.19161的杂交瘤细胞株分泌产生。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗人白血病抑制因子单克隆抗体，由保藏编号为CGMCCNo.19161的杂交瘤细胞株分泌产生。


2.一种杂交瘤细胞株，其特征在于：所述杂交瘤细胞株的保藏编号为CGMCCNo.19161。


3.如权利要求1所述的一种抗人白血病抑制因子单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)采用人白血病抑制因子作为抗原免疫小鼠；
(2)分离免疫小鼠的脾脏细胞并将其与骨髓瘤细胞进行融合；
(3)从融合后的细胞中初步筛选出阳性杂交瘤细胞；
(4)采用细胞活性阻断分析方法从上述阳性杂交瘤细胞中进一步筛选能产生强阻断活性抗体的细胞株；
(5)使用上述细胞株大量制备单克隆抗体。


4.如权利要求3所述的一种抗人白血病抑制因子单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中的筛选方法包括：
S1：首先采用有限稀释法获得融合成功的单克隆细胞；
S2：采用ELISA方法从上述单克隆细胞中筛选出能分泌特异性抗体的阳性杂交瘤细胞株。


5.如权利要求3所述的一种抗人白血病抑制因子单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的筛选步骤包括：
A)将M1细胞与人白血病抑制因子共同孵育作为对照组，检测人白血病抑制因子对于M1细胞活力的影响；
B)对步骤(3)筛选得到的阳性杂交瘤细胞株培养基中的抗人白血病抑制...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜伯雨，宋伟，赵宏，吴帆，樊旭，王艳红，郗雪艳，
申请(专利权)人：湖北医药学院，
类型：发明
国别省市：湖北;42