用于递送编码VEGF-A多肽的经修饰的RNA的脂质纳米颗粒制造技术

本披露涉及包含脂质组分和编码VEGF‑A多肽的经修饰的RNA的纳米颗粒。本披露的方面进一步涉及包含脂质组分和编码VEGF‑A多肽的经修饰的RNA的纳米颗粒用于改善受试者的伤口愈合的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于递送编码VEGF-A多肽的经修饰的RNA的脂质纳米颗粒1.相关申请的交叉引用本申请要求2017年10月31日提交的美国临时专利申请号62/579,671的优先权，将其通过引用以其整体并入本文。2.序列表本申请含有已以ASCII格式以电子方式提交且特此以引用的方式整体并入的序列表。所述ASCII副本创建于2018年10月31日，名称为09963_0092-00304_SL.txt并且大小为11，396字节。3.
本披露涉及包含脂质组分和编码VEGF-A多肽的经修饰的RNA的纳米颗粒。本披露的方面进一步涉及包含脂质组分和编码VEGF-A多肽的经修饰的RNA的纳米颗粒用于改善受试者的伤口愈合的用途。4.
技术介绍
血管内皮生长因子A(VEGF-A)途径在伤口愈合过程(包括受损组织的血运重建、改善血管通透性和新血管的形成(血管生成))中起关键作用。递送药剂以增加VEGF-A途径用于潜在的治疗效果(例如改善受试者的伤口愈合)仍然具有挑战性。已经尝试了多种方法以允许临床上易处理的方法来增加靶组织中的VEGF-A蛋白。但是，每种方法都有明显的缺点。例如，全身VEGF-A蛋白递送可导致明显的低血压，并且VEGF-A迅速降解。病毒性包封的和裸的VEGF-ADNA质粒对蛋白质表达的时间控制有限，并且体内表达的效率可以是高度可变的和非剂量依赖性的。结果是这些限制约束了增加VEGF-A水平作为治疗剂的适用性。另一个最新发展是递送编码VEGF-A蛋白的治疗性RNA。然而，由于此类RNA分子的相对不稳定性和低细胞渗透性，将天然RNA递送至细胞可能具有挑战性。同样，天然RNA可以触发免疫激活(参见例如Kaczmarek等人，“AdvancesinthedeliveryofRNAtherapeutics：fromconcepttoclinicalreality[RNA疗法的递送进展：从概念到临床现实]，”GenomeMed.[基因组医学]，2017，9：60)，这限制了它们将VEGF-A蛋白递送至靶组织的用途。因此，仍然需要允许有效和安全地递送编码VEGF-A蛋白的RNA的组合物。另外，仍然需要替代方法来增加VEGF-A途径用于潜在的治疗效果，例如改善受试者的伤口愈合。5.
技术实现思路
本披露涉及包含脂质组分和编码VEGF-A多肽的经修饰的RNA的纳米颗粒。本披露的方面进一步涉及包含脂质组分和编码VEGF-A多肽的经修饰的RNA的纳米颗粒用于改善受试者的伤口愈合的用途。在以下段落中概述了本披露的某些实施例。此列表仅是示例性的，并且不是本披露提供的所有实施例的详尽列举。实施例1.一种纳米颗粒，所述纳米颗粒包含：(i)脂质组分，所述脂质组分包含具有结构的化合物(化合物A)，和(ii)经修饰的RNA，所述经修饰的RNA包含编码SEQIDNO：2的VEGF-A多肽的SEQIDNO：1和3-5中的任一个。实施例2.如实施例1所述的纳米颗粒，其中所述脂质组分进一步包含磷脂、结构脂质和/或PEG脂质。实施例3.如实施例2所述的纳米颗粒，其中所述磷脂选自由以下组成的组：1，2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、1，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)、1，2-二亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DLPC)、1，2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-磷酸胆碱(DMPC)、1，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)、1，2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)、1，2-双十一碳酰基-sn-甘油-磷酸胆碱(DUPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(POPC)、1，2-二-O-十八碳烯基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(18：0二醚PC)、1-油酰基-2-胆甾醇基半琥珀酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(OChemsPC)、1-十六烷基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(C16LysoPC)、1，2-二亚油烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1，2-二花生四烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1，2-双二十二碳六烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1，2-二植烷酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(ME16.0PE)、1，2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二亚油烯酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二花生四烯酸-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-双二十二碳六烯酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸-外消旋-(1-甘油)钠盐(DOPG)、鞘磷脂及其混合物；所述结构脂质选自下组，该组由以下组成：胆固醇、粪甾醇(fecosterol)、谷甾醇、麦角甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、菜籽甾醇、番茄碱、熊果酸、α-生育酚、及其混合物；和/或所述PEG脂质选自由以下组成的组：PEG修饰的磷脂酰乙醇胺、PEG修饰的磷脂酸、PEG修饰的神经酰胺、PEG修饰的二烷基胺、PEG修饰的二酰基甘油、PEG修饰的二烷基甘油、及其混合物。实施例4.如实施例1所述的纳米颗粒，其中所述脂质组分进一步包含为DSPC的磷脂、为胆固醇的结构脂质和/或为PEG-DMG的PEG脂质。实施例5.如实施例1-4中任一项所述的纳米颗粒，其中N∶P比率为约2∶1至30∶1。实施例6.如实施例5所述的纳米颗粒，其中N∶P比率为约5.67∶1。实施例7.如实施例5所述的纳米颗粒，其中N∶P比率为约3∶1。实施例8.如实施例1-4中任一项所述的纳米颗粒，其中所述脂质组分与所述经修饰的RNA的wt/wt比率为约10∶1至约100∶1。实施例9.如实施例8所述的纳米颗粒，其中所述脂质组分与所述经修饰的RNA的wt/wt比率为约20∶1。实施例10.如实施例8所述的纳米颗粒，其中所述脂质组分与所述经修饰的RNA的wt/wt比率为约10∶1。实施例11.如实施例1-4中任一项所述的纳米颗粒，其中所述纳米颗粒的平均直径为约50nm至100nm。实施例12.一种药物组合物，所述药物组合物包含(a)至少一种纳米颗粒，所述纳米颗粒包含(i)脂质组分，所述脂质组分包含具有结构的化合物(化合物A)，和(ii)经修饰的RNA，所述经修饰的RNA包含编码SEQIDNO：2的VEGF-A多肽的SEQIDNO：1和3-5中的任一个；和(b)药学上可接受的赋形剂。实施例13.如实施例12所述的药物组合物，其中所述脂质组分进一步包含磷脂、结构脂质和/或PEG脂质。实施例14.如实施例13所述的药物组合物，其中所述磷脂选自由以下组成的组：1，2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、1，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)、1，2-二亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(D本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种纳米颗粒，所述纳米颗粒包含：/n(i)脂质组分，所述脂质组分包含具有结构

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171031 US 62/5796711.一种纳米颗粒，所述纳米颗粒包含：
(i)脂质组分，所述脂质组分包含具有结构的化合物(化合物A)，和
(ii)经修饰的RNA，所述经修饰的RNA包含编码SEQIDNO：2的VEGF-A多肽的SEQIDNO：1和3-5中的任一个。


2.如权利要求1所述的纳米颗粒，其中所述脂质组分进一步包含磷脂、结构脂质和/或PEG脂质。


3.如权利要求2所述的纳米颗粒，其中所述磷脂选自由以下组成的组：1，2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、1，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)、1，2-二亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DLPC)、1，2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-磷酸胆碱(DMPC)、1，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)、1，2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)、1，2-双十一碳酰基-sn-甘油-磷酸胆碱(DUPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(POPC)、1，2-二-O-十八碳烯基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(18：0二醚PC)、1-油酰基-2-胆甾醇基半琥珀酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(OChemsPC)、1-十六烷基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(C16LysoPC)、1，2-二亚油烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1，2-二花生四烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1，2-双二十二碳六烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1，2-二植烷酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(ME16.0PE)、1，2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二亚油烯酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二花生四烯酸-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-双二十二碳六烯酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸-外消旋-(1-甘油)钠盐(DOPG)、鞘磷脂及其混合物；
所述结构脂质选自下组，该组由以下组成：胆固醇、粪甾醇、谷甾醇、麦角甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、菜籽甾醇、番茄碱、熊果酸、α-生育酚、及其混合物；和/或
所述PEG脂质选自由以下组成的组：PEG修饰的磷脂酰乙醇胺、PEG修饰的磷脂酸、PEG修饰的神经酰胺、PEG修饰的二烷基胺、PEG修饰的二酰基甘油、PEG修饰的二烷基甘油、及其混合物。


4.如权利要求1所述的纳米颗粒，其中所述脂质组分进一步包含为DSPC的磷脂、为胆固醇的结构脂质和/或为PEG-DMG的PEG脂质。


5.如权利要求1-4中任一项所述的纳米颗粒，其中N∶P比率为约2∶1至约30∶1。


6.如权利要求5所述的纳米颗粒，其中N∶P比率为约5.67∶1。


7.如权利要求5所述的纳米颗粒，其中N∶P比率为约3∶1。


8.如权利要求1-4中任一项所述的纳米颗粒，其中所述脂质组分与所述经修饰的RNA的wt/wt比率为约10∶1至约100∶1。


9.如权利要求8所述的纳米颗粒，其中所述脂质组分与所述经修饰的RNA的wt/wt比率为约20∶1。


10.如权利要求8所述的纳米颗粒，其中所述脂质组分与所述经修饰的RNA的wt/wt比率为约10∶1。


11.如权利要求1-4中任一项所述的纳米颗粒，其中所述纳米颗粒的平均直径为约50nm至约100nm。


12.一种药物组合物，所述药物组合物包含
(a)至少一种纳米颗粒，所述纳米颗粒包含(i)脂质组分，所述脂质组分包含具有结构的化合物(化合物A)，和(ii)经修饰的RNA，所述经修饰的RNA包含编码SEQIDNO：2的VEGF-A多肽的SEQIDNO：1和3-5中的任一个；和
(b)药学上可接受的赋形剂。


13.如权利要求12所述的药物组合物，其中所述脂质组分进一步包含磷脂、结构脂质和/或PEG脂质。


14.如权利要求13所述的药物组合物，其中所述磷脂选自由以下组成的组：1，2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、1，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)、1，2-二亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DLPC)、1，2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-磷酸胆碱(DMPC)、1，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)、1，2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)、1，2-双十一碳酰基-sn-甘油-磷酸胆碱(DUPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(POPC)、1，2-二-O-十八碳烯基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(18：0二醚PC)、1-油酰基-2-胆甾醇基半琥珀酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(OChemsPC)、1-十六烷基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(C16LysoPC)、1，2-二亚油烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1，2-二花生四烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1，2-双二十二碳六烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1，2-二植烷酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(ME16.0PE)、1，2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二亚油烯酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二花生四烯酸-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-双二十二碳六烯酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸-外消旋-(1-甘油)钠盐(DOPG)、鞘磷脂及其混合物；
所述结构脂质选自下组，该组由以下组成：胆固醇、粪甾醇、谷甾醇、麦角甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、菜籽甾醇、番茄碱、熊果酸、α-生育酚、及其混合物；和/或
所述PEG脂质选自由以下组成的组：PEG修饰的磷脂酰乙醇胺、PEG修饰的磷脂酸、PEG修饰的神经酰胺、PEG修饰的二烷基胺、PEG修饰的二酰基甘油、PEG修饰的二烷基甘油、及其混合物。


15.如权利要求12所述的药物组合物，其中所述脂质组分进一步包含为DSPC的磷脂、为胆固醇的结构脂质和/或为PEG-DMG的PEG脂质。


16.如权利要求12-15中任一项所述的药物组合物，其中N∶P比率为约2∶1至约30∶1。


17.如权利要求16所述的药物组合物，其中N∶P比率为约5.67∶1。


18.如权利要求16所述的药物组合物，其中N∶P比率为约3∶1。


19.如权利要求12-18中任一项所述的药物组合物，其中所述脂质组分与所述经修饰的RNA的wt/wt比率为约10∶1至约100∶1。


20.如权利要求19所述的药物组合物，其中所述脂质组分与所述经修饰的RNA的wt/wt比率为约20∶1。


21.如权利要求19所述的药物组合物，其中所述脂质组分与所述经修饰的RNA的wt/wt比率为约10∶1。


22.如权利要求12-21中任一项所述的药物组合物，其中所述纳米颗粒的平均直径为约50nm至约100nm。


23.如权利要求12-22中任一项所述的药物组合物，其中当向哺乳动物组织或受试者施用时，所述药物组合物导致SEQIDNO：2的VEGF-A多肽的最大观察到的血浆和/或组织浓度C最大达到约450pg/ml血浆或pg/mg...

【专利技术属性】
技术研发人员：KM汉松，K贝内纳托，M瓦格贝里，A帕尔松，R弗里特谢丹尼尔松，
申请(专利权)人：摩登纳特斯有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US