一种基于低场核磁共振成像的铜绿假单胞菌检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于低场核磁共振成像的铜绿假单胞菌检测方法，所述方法引入了两种不同粒径的磁性纳米珠，与目标菌结合后形成“三明治”夹心结构并被磁分离器分离沉淀，而留下的小粒径磁珠溶液则能在低场核磁共振仪器中被检测出来，并且其成像图像信号强度随浓度变化而变化。本发明专利技术所用的低场核磁共振成像方法，利用了磁分离技术的高效性和磁信号放大系统，能够大大提高检测的灵敏度。同时检测结果能以图像形式显示出来，更加直观方便。相比与传统的低场核磁共振检测方法，磁珠会出现不在靶标表现聚集的现象，本方法消除了这种现象带来的假阴性，提高了方法的可靠性。

【技术实现步骤摘要】
一种基于低场核磁共振成像的铜绿假单胞菌检测方法
本专利技术属于细菌检测
，具体涉及一种基于低场核磁共振成像的铜绿假单胞菌检测方法。
技术介绍
低场核磁共振成像是指磁场强度在0.5T以下的核磁共振，氢质子在LF-MRI技术中运用最为广泛，主要是因为其在自然界中丰度极高，能够产生很强的核磁共振信号，且具有易于检测，便于观察，稳定存在的特点。低场核磁共振成像的主要测定指标是弛豫时间。LF-MRI主要通过对纵向弛豫时间T1(自旋—晶格)，横向弛豫时间T2(自旋—自旋)和自扩散系数的测量，反应出氢质子的运动性质。T1和T2分别测量的是自旋和环境及自旋之间的相互作用。随着低场核磁共振技术与纳米技术的发展，生物功能化超顺磁性纳米颗粒(连接有不同生物分子，如核酸、小分子、多肽、抗体)，在生物富集、识别等方面得到广泛的发展。生物功能化磁珠富集在生物大分子上，引起体系中横向弛豫时间(T2)的变化。采用低场核磁共振(LF-NMR)法可敏感地检测到这一变化。将两者结合可以构建一种新型的，具有极低检测限、特异性强、快速等特点的生物分子识别方法。磁性纳米粒子本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于低场核磁共振成像的铜绿假单胞菌检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)制备弛豫时间与铜绿假单胞菌浓度相关性的标准曲线：/n分别将大小两种粒径的磁珠分散于溶液中；将铜绿假单胞菌捕获适配体与大小磁珠分别结合，制成含有大小磁珠的适配体磁珠传感器，然后将上述两种配体磁珠传感器与分别含有不同浓度的铜绿假单胞菌溶液混合、孵育，得到大小磁珠和铜绿假单胞菌的混合溶液，然后进行低场核磁共振成像检测，建立弛豫时间与铜绿假单胞菌浓度相关性的标准曲线；/n(2)对含有铜绿假单胞菌样品的按上述方法制备大小磁珠和铜绿假单胞菌样品的混合溶液，进行低场核磁共振成像检测，根据标准曲线来计算铜绿假单胞菌的浓度。...

【技术特征摘要】
1.一种基于低场核磁共振成像的铜绿假单胞菌检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)制备弛豫时间与铜绿假单胞菌浓度相关性的标准曲线：
分别将大小两种粒径的磁珠分散于溶液中；将铜绿假单胞菌捕获适配体与大小磁珠分别结合，制成含有大小磁珠的适配体磁珠传感器，然后将上述两种配体磁珠传感器与分别含有不同浓度的铜绿假单胞菌溶液混合、孵育，得到大小磁珠和铜绿假单胞菌的混合溶液，然后进行低场核磁共振成像检测，建立弛豫时间与铜绿假单胞菌浓度相关性的标准曲线；
(2)对含有铜绿假单胞菌样品的按上述方法制备大小磁珠和铜绿假单胞菌样品的混合溶液，进行低场核磁共振成像检测，根据标准曲线来计算铜绿假单胞菌的浓度。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大小两种粒径的磁珠为纳米磁珠，大粒径的磁珠的直径为400-500nm，小粒径的磁珠的直径为7-10nm。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述磁珠表面修饰羧基基团。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述适配体磁珠传感器的制备方法，包括以下步骤：
(1)将两种磁珠分别在溶液中分散后，加入MES缓冲液，然后进行羧基活化，得到两种磁珠溶液；
(2)将上述两种磁珠溶液中分别加入铜绿假单胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：李兴民，贾飞，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京;11