预测癌症患者预后的标志物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了预测癌症患者预后的标志物及其应用，所述癌症包括子宫内膜癌、肺腺癌。所述标志物是FAM65B。本发明专利技术还公开了预测癌症患者预后的产品，该产品可以通过检测FAM65B表达量来实现预测癌症患者预后的目的。

Prognostic markers of cancer patients and their application

【技术实现步骤摘要】
预测癌症患者预后的标志物及其应用
本专利技术属于生物医学领域，涉及预测癌症患者预后的标志物及其应用。
技术介绍
子宫内膜癌是女性生殖系统常见的三大恶性肿瘤之一，约占女性癌症的7％，占女性生殖系统恶性肿瘤的20-30％。近年来，在世界范围内，子宫内膜癌的发病有上升趋势，并呈年轻化(ParkinDM，BrayF，FerlayJ，etal.Globalcancerstatistics,2002[J].CACancerJClin，2005，55(2):74-108)。随着传统标记物研究的深入及新标记物的不断发现，免疫组化在子宫内膜癌的病理诊断与鉴别诊断中扮演越来越重要的角色(吴焕文，梁智勇，张卉，刘彤华.子宫内膜癌免疫组化标记物的研究进展.诊断病理学，2013，Vol.20，No.3180-183)。子宫内膜癌诊断目前常用的免疫组化标记物包括激素受体ER，PR，CEA，P53，P16，PTEN等。目前这些肿瘤标记物在诊断方面存在灵敏性、广谱性及特异性方面的不足。如P53主要应用于II型子宫内膜癌的诊断或鉴别诊断，在I型中低分化内膜癌也存在部分高表达现象，部分病例呈完全阴性表达；P16主要用于宫颈癌的诊断，在子宫内膜癌中表达相对较低，主要用于子宫内膜癌与宫颈癌的鉴别诊断。PTEN缺失表达是I型子宫内膜癌发生的早期事件，此外，由于是缺失表达，实际应用中PTEN染色结果的有效判读限制了它的普及应用。CEA在宫颈癌中高表达，主要是用于子宫内膜癌的鉴别诊断。ER，PR的表达更多用于子宫内膜癌的激素治疗评估。迄今，尚未发现特异高效的分子标记物用于子宫内膜癌诊断。目前的分子标记物用于临床预后预测上，有研究认为：除PR外，ER，PTEN，P53及Ki-67的表达情况对患者临床预后的预测意义较小。亟待开发新的标记物以用于诊断子宫内膜癌和预测子宫内膜癌预后。肺癌是全球发病率及死亡率最高的恶性肿瘤。由于对烟草控制、环境保护的重视及早期筛查的大力推广，美国等西方国家肺癌的死亡率已有所下降。然而作为烟草生产和销售大国的中国，肺癌的发生率和死亡率均呈持续上升趋势，且女性发病率上升更快。临床研究表明，肺癌原位癌治愈率接近100％，II期肺癌患者的5年生存率达60％-90％，而IIIb期和IV期患者的5年生存率仅5％-20％。表明早期诊断能为肺癌患者带来极大的获益。尽管在过去几十年中，人们开展了许多大规模的临床试验用以验证肺癌筛查手段，包括胸部X线检查，痰细胞学检查，胸部CT，但没有一项手段能显著的降低总死亡率。另外，目前临床上常用的肿瘤标志物如CEA,NSE,Cyfra2l-1等在早期诊断和提示预后方面的准确率也较低。因此，寻找一种方便、安全、有效的肺癌早期检测及预后预测手段已成为人们面临的一项严肃而紧迫的难题。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术现状提供一种与预测包括子宫内膜癌在内的癌症患者预后相关的基因标志物。本专利技术所要解决的又一个技术问题是提供一种上述基因标志物在制备预测癌症患者预后相关产品中的应用。本专利技术为解决上述技术问题，采用了如下技术方案：本专利技术一方面，提供了一种预测癌症患者预后相关的标志物，所述标志物是FAM65B基因。在一优选例中，所述FAM65B基因分离自人或非人哺乳动物的血液和/或组织。在另一优选例中，所述的非人哺乳动物为小鼠、大鼠、兔、猪、牛、羊等。本专利技术第二方面，提供了一种试剂，所述试剂是能够检测本专利技术第一方面的标志物表达量的试剂。进一步，所述试剂包括利用SYBRGreen、TaqMan探针、分子信标、双杂交探针、或复合探针检测所述标志物表达量时使用的引物或探针。本专利技术第三方面，提供了一种预测癌症患者预后的芯片，所述芯片包括固相载体以及有序固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针特异性地对应于本专利技术第一方面的标志物。本专利技术第四方面，提供了本专利技术第三方面的芯片的用途，用于制备预测癌症患者预后的试剂盒。本专利技术第五方面，提供了一种试剂盒，所述试剂盒含有本专利技术第一方面的标志物或本专利技术第二方面的试剂，或本专利技术第三方面的芯片。进一步，本专利技术的试剂盒还可以包含RT-PCR反应所需的下列成分：PCRbuffer、10mMdNTPs、HotstartTaq酶、ddH2O。进一步，本专利技术的试剂盒还可以包含FAM65B基因mRNA反转录得到的cDNA，作为检测上述引物可行性的阳性模板。本专利技术第六方面，提供了本专利技术第一方面的标志物、或本专利技术第二方面的试剂的用途，用于制备预测癌症患者预后的芯片或试剂盒。本专利技术的试剂盒的使用方法具有以下记载：(1)从待检测的癌症患者的样本中提取FAM65B基因mRNA；(2)对mRNA含量进行检测，并将结果与参比值进行比较，若样本中的FAM65B基因mRNA含量E1显著高于参比值E0，则说明该癌症患者预后良好。在另一优选例中，所述显著高于是指E1/E0≥1.5，优选地，≥2.0，更优选地，≥5。本专利技术第七方面，提供了一种预测癌症患者预后的方法，所述方法包括：检测待检测的癌症患者的样本中FAM65B基因表达量。若样本中的FAM65B基因mRNA含量E1显著高于参比值E0，则说明该癌症患者预后良好。所述显著高于是指E1/E0≥1.5，优选地，≥2.0，更优选地，≥5。本专利技术第八方面，提供了一种改善癌症患者预后的方法，所述方法包括诱导或提高癌症患者FAM65B基因表达。本专利技术第九方面，提供了一种改善癌症患者预后的药物组合物，所述药物组合物包括促进FAM65B基因表达的试剂。本专利技术第十方面，提供了FAM65B基因在制备改善癌症患者预后的药物中的应用。芯片基因表达谱芯片通常含有多达几百个探针，涵盖多种RNA，利用DNA双链同源互补的原理在全基因组水平上检测样本中所含各种RNA的含量。因此，可在同一时间对待测样本中全基因组范围内的RNA的转录水平进行检测。利用本专利技术所述的基因序列，还可以制备相应的基因检测芯片，进而研究其表达谱以及基因的调节方式。具体地，可根据本专利技术所述的基因，设计出适合的探针，固定在固相载体上，形成“寡核苷酸阵列”。所述的“寡核苷酸阵列”是指具有可寻址位置(即以区别性的，可访问的地址为特征的位置)的阵列，每个可寻址位置均含有一个与其相连的特征性寡核苷酸。根据需要，可将寡核苷酸阵列分成多个亚阵。所述固相载体可采用基因芯片领域的各种常用材料，例如但不限于尼龙膜，经活性基团(如醛基、氨基等)修饰的玻片或硅片、未修饰的玻片、塑料片等。所述的基因芯片的制备可采用本领域已知的生物芯片的常规制造方法。例如，如果固相载体采用的是修饰玻片或硅片，探针的5’端含有氨基修饰的聚dT串，可将寡核苷酸探针配制成溶液，然后采用点样仪将其点在修饰玻片或硅片上，排列成预定的序列或阵列，然后通过放置过夜来固定，就可得到本专利技术的基因芯片。如果核酸不含氨基修饰，则其制备方法也可参照：王申五主编的《基因诊断技术-非放本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种预测癌症患者预后的标志物，其特征在于，所述标志物是FAM65B基因；优选地，所述癌症包括子宫内膜癌、肺癌；更优选地，所述肺癌是肺腺癌。/n

【技术特征摘要】
1.一种预测癌症患者预后的标志物，其特征在于，所述标志物是FAM65B基因；优选地，所述癌症包括子宫内膜癌、肺癌；更优选地，所述肺癌是肺腺癌。


2.一种试剂，其特征在于，所述试剂是能够检测权利要求1所述的标志物表达量的试剂。


3.权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述试剂包括利用SYBRGreen、TaqMan探针、分子信标、双杂交探针、或复合探针检测所述标志物表达量时使用的引物或探针。


4.一种预测癌症患者预后的芯片，其特征在于，所述芯片包括固相载体以及有序固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针特异性地对应于权利要求1所述的标志物；优选地，所述癌症包括子宫内膜癌、肺癌；更优选地，所述肺癌是肺腺癌。


5.权利要求4所述的芯片的用途，其特征在于，所述芯片用于制备预测癌症患者预后的试剂盒；优选地，所述癌症包括子宫内膜癌、肺癌；更更优选地，所述肺癌是肺腺癌。

【专利技术属性】
技术研发人员：钱海利，张颖，王婷，马飞，林晨，李春晓，赵振国，郭建宾，
申请(专利权)人：中国医学科学院肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：北京;11