【技术实现步骤摘要】
一种用于检测生物细胞粘度的近红外荧光分子探针及其制备方法和应用
本专利技术涉及荧光探针检测
，特别涉及一种用于检测生物细胞粘度的近红外荧光分子探针及其制备方法和应用。
技术介绍
细胞内液体的稳定性是活细胞正常活动的基础，其异常变化与许多细胞技能失常有关，细胞内液体粘度特别是在调控扩散介导的细胞过程中起着至关重要的过程，包括信号和运输。然而传统的粘度计虽然适用于宏观液体介质，但不能用于检测活细胞的粘度。小分子荧光探针以其高灵敏度，实时检测，快速无损分析等优点，在荧光成像领域得到了广泛的应用，因此小分子荧光探针可以非常理想的可视化和监测活细胞内的粘度的动态变化。
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本专利技术所要解决的技术问题是，提供一种用于检测生物细胞粘度的近红外荧光分子探针及其制备方法和应用，制备得到的分子探针可应用于生物细胞样本检测，通过扭转分子内电荷转移机制，分子探针在生物样本成像中背景荧光小，发射波长长，近红外发光，感光度极好，由于背景荧光的减少和对生物样品的光损伤小以及穿透深度的增...
【技术保护点】
1.一种用于检测生物细胞粘度的近红外荧光分子探针，其特征在于：以9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-4(4-甲硫基苯亚甲基)-1,2,3,4-四氢蒽为荧光基团，以活化的双键为反应活性基团，该分子探针优选为9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-4-[4-(甲基哌嗪)-1苯亚甲基]-1,2,3,4-四氢蒽，其化学结构式是：/n
【技术特征摘要】
1.一种用于检测生物细胞粘度的近红外荧光分子探针，其特征在于：以9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-4(4-甲硫基苯亚甲基)-1,2,3,4-四氢蒽为荧光基团，以活化的双键为反应活性基团，该分子探针优选为9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-4-[4-(甲基哌嗪)-1苯亚甲基]-1,2,3,4-四氢蒽，其化学结构式是：
2.一种用于检测生物细胞粘度的近红外荧光分子探针的制备方法，荧光分子探针具有如权利要求1所述的结构，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将浓硫酸加入到烧瓶中，再加入环己酮和2-[(4-二乙胺基)-2羟基苯甲酰]苯甲酸，70-90℃进行反应，反应结束，待溶液冷却到室温，放入冰水浴中，搅拌均匀，然后向混合液体中滴加高氯酸，析出固体，得到中间产物9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-1,2,3,4-四氢蒽，命名为F376；
(2)将步骤(1)得到的中间产物F376，用无水乙醇溶解，加入4-(4-甲基哌嗪基)苯甲醛，于70-90℃下搅拌回流后，冷却至室温后，将滤液旋干，通过层析柱方法得到目标产物9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-4-[4-(甲基哌嗪)-1苯亚甲基]-1,2,3,4-四氢蒽，命名为F562。
3.根据权利要求2所述的用于检测生物细胞粘度的近红外荧光分子探针的制备方法，其特征是：
所述步骤(1)中，
2-[(4-二乙胺基)-2羟基苯甲酰]苯甲酸与环己酮的摩尔比优选为1:2，
反应时间优选为2h，
加样顺序优选为，先加浓硫酸，冰水浴中搅拌5分钟，然后加入环己酮，0℃搅拌5分钟，最后加环己酮和2-[(4-二乙胺基)-2羟基苯甲酰)]苯甲酸。
4.根据权利要求2所述的用于检测生物细胞粘度的近红外荧光分子探针的制备方法，其特征是：
所述步骤(2)中，
中间产物F376与4-(4-甲基哌嗪基)苯甲醛的摩尔比优选为1:2，
回流反应时间优选为30min。
5.一种用于检测生物细胞粘度的近红外荧光分子探针的应用，其特征在于：荧光分子探针具有如权利要求1所述的结构，或通过权利要求2-4任一项所述的制备方法制备，应用于检测生物细胞内粘度以及应用于检测活细胞粘度变化及荧光成像。
6.根据权利要求5所述的用于检测生物细胞粘度的近红外荧光分子探针的应用，其特征是：建立分子探针F562对粘度的滴定线性曲线步骤包括，
(1)配制pH＝7.40，浓度为20mM的PBS缓冲盐溶液...
【专利技术属性】
技术研发人员：李赞，陆姣，尤进茂，孙志伟，谭江坤，
申请(专利权)人：曲阜师范大学，
类型：发明
国别省市：山东;37
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