一种检测血液中卡那霉素含量的在线固相萃取液相色谱法制造技术

本发明专利技术属于医学检验领域，涉及体内抗菌药物含量测定方法，具体涉及一种检测血液中卡那霉素含量的在线固相萃取液相色谱法。种检测血液中卡那霉素含量的在线固相萃取液相色谱法，对待测血样进行预处理后，通过高效液相色谱仪采用标准曲线法测定卡那霉素含量本发明专利技术所述的检测血液中卡那霉素药物浓度的在线固相萃取液相分析方法，血浆经过蛋白沉淀后直接进样，减少了人员操作，提高了定量结果的准确性。

On line solid phase extraction liquid chromatography for the determination of kanamycin in blood

【技术实现步骤摘要】
一种检测血液中卡那霉素含量的在线固相萃取液相色谱法
本专利技术属于医学检验领域，涉及体内抗菌药物含量测定方法，具体涉及一种检测血液中卡那霉素含量的在线固相萃取液相色谱法。
技术介绍
卡那霉素是一种蛋白质生物合成抑制剂，通过与30S核糖体结合从而致使mRNA密码误读。若细菌中产生一种破坏卡那霉素的酶，则可变为抗性株。卡那霉素抗性的质粒经常被作为选择基因或标记基因用于分子克隆中。卡那霉素的当血药浓度＞10mg/L时，毒副作用增强。引起暂时性第9对脑神经功能损害(表现为后1/3味觉丧失)、口周及其他部位的感觉异常、头痛、不安、心动过速、急性脑综合征伴癔病和视觉异常等。由于VCMC治疗窗较窄，体内代谢过程存在较大的个体差异，所以对其血药浓度的监测是调整剂量，减少不良反应的重要参考，在临床用药中具有重大意义。目前常用的卡那霉素血药浓度的测定方法众多，但目前仍存在前处理复杂、成本高，或对实验人员和环境要求高，分析时间较长等问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术的现状，提供一种检测血液中卡那霉素含量的在线固相萃取液相本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测血液中卡那霉素含量的在线固相萃取液相色谱法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)血浆样品的预处理：取待测样品，加入蛋白沉淀剂进行沉淀；/n(2)标准曲线的绘制:取20uL标准工作液，加入空白血浆至1ml，混匀至成6个浓度的标准溶液，将获得的标准溶液分别加入蛋白沉淀剂进行沉淀，9000-15000rpm下离心10-15min，分别取上清液用高效液相色谱仪和DAD检测器对上述上清液进行检测，得出上述标准溶液中的卡那霉素谱图，以卡那霉素的峰面积作为标准曲线图的纵坐标y，以上述标准工作液中含有卡那霉素的浓度作为标准曲线图的横坐标x，将数据进行线性回归，拟合得到标准曲线方程为y＝a*x+b，...

【技术特征摘要】
1.一种检测血液中卡那霉素含量的在线固相萃取液相色谱法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)血浆样品的预处理：取待测样品，加入蛋白沉淀剂进行沉淀；
(2)标准曲线的绘制:取20uL标准工作液，加入空白血浆至1ml，混匀至成6个浓度的标准溶液，将获得的标准溶液分别加入蛋白沉淀剂进行沉淀，9000-15000rpm下离心10-15min，分别取上清液用高效液相色谱仪和DAD检测器对上述上清液进行检测，得出上述标准溶液中的卡那霉素谱图，以卡那霉素的峰面积作为标准曲线图的纵坐标y，以上述标准工作液中含有卡那霉素的浓度作为标准曲线图的横坐标x，将数据进行线性回归，拟合得到标准曲线方程为y＝a*x+b，并且得出权重系数a、b及相关系数R2；该标准曲线至少用三份不同批次的标准工作液绘制三次；标准工作液是含有卡那霉素的溶液；
(3)检测血液的离心:取待检测血液至少2ml，在离心速度为3500-4500rpm下离心10-15min，得到上清液，将上述上清液置于-20℃冷冻下保存备用；
(4)待测样品的检测：
S1:用水浴加热(37℃)，将步骤(3)中的上清液复融；
S2:用移液枪移取步骤S1中复融后的上清液800-1000uL按步骤(1)进行预处理后，离心得上清液即为待测样品；
S3:移取步骤(c)待测样品600-800uL，使用高效液相色谱仪和DAD检测器对上述待测样品进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：管燕，贺耘，
申请(专利权)人：嘉圣生物医药嘉兴有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33