【技术实现步骤摘要】
口服余甘子鞣质部位后尿液中指标成分含量测定及20种代谢产物分离鉴定方法
本专利技术涉及一种口服余甘子鞣质部位后化学物质检测方法，特别涉及口服余甘子鞣质部位后尿液中指标成分含量测定及13种原型物质和20种代谢产物分离鉴定方法。
技术介绍
药物在体内一般经过吸收、分布、代谢与排泄等一系列过程，药效、药效维持时间和毒副作用等与药物体内代谢与排泄过程紧密相关。研究药物的代谢与排泄规律，对于设计合理给药途径、给药剂量和指导临床应用有重要意义，也可以为其药效物质基础研究提供理论基础。尿液是药物排泄的主要途径之一，一般大部分代谢产物通过肾经尿液排出体外。目前，国内外对余甘子鞣质部位、没食子酸（gaiilcacid，GA）、鞣花酸（ellagicacid，EA）、柯里拉京（corilagin）的生物活性已有众多报道，但对于它们在实验动物或人体的代谢和排泄研究相对较少，尚未发现有余甘子鞣质部位在尿液中代谢的相关研究。此外，由于代谢产物的量很少，分离鉴定代谢产物是具有挑战的工作。丁雯等人研究当归赤芍药对在大鼠尿液中代谢产物，检测...
【技术保护点】
1.一种口服余甘子鞣质部位后尿液中化学成分的检测方法，包括：/n（1）尿液样品的处理，包括：/n精密量取尿液样品，稀释，精密量取稀释后尿液，加入内标物质溶液混合，加入一定量有机溶剂沉淀去除尿液中蛋白及杂质，萃取，分离取有机相，进样前，微孔滤膜过滤；/n空白尿液按同样方法处理；/n（2）指标性成分没食子酸（GA）、柯里拉京（corilagin）、鞣花酸（EA）在尿液中的含量检测，包括：/n对照品溶液的配制：精密称取 GA 、corilagin、EA、内标物质，使用有机溶剂溶解定容配制一定浓度的GA、corilagin、EA、内标物质对照品溶液，储存，备用；/n绘制标准曲线：精...
【技术特征摘要】
1.一种口服余甘子鞣质部位后尿液中化学成分的检测方法，包括：
（1）尿液样品的处理，包括：
精密量取尿液样品，稀释，精密量取稀释后尿液，加入内标物质溶液混合，加入一定量有机溶剂沉淀去除尿液中蛋白及杂质，萃取，分离取有机相，进样前，微孔滤膜过滤；
空白尿液按同样方法处理；
（2）指标性成分没食子酸（GA）、柯里拉京（corilagin）、鞣花酸（EA）在尿液中的含量检测，包括：
对照品溶液的配制：精密称取GA、corilagin、EA、内标物质，使用有机溶剂溶解定容配制一定浓度的GA、corilagin、EA、内标物质对照品溶液，储存，备用；
绘制标准曲线：精密吸取空白尿液样品，加入适量的GA、corilagin和EA系列浓度对照品溶液配制系列尿液样品，按照步骤（1）中尿液样品的处理方法处理后进HPLC色谱仪；各成分与内标的峰面积比值为纵坐标（Y），目标成分浓度为横坐标（X），用加权最小二乘法计算回归方程及相关系数（r）；
尿液样品测定：经步骤（1）处理方法处理后的尿液样品进HPLC色谱仪；根据标准曲线，计算大鼠尿液样品中GA、corilagin、EA的浓度，浓度乘以尿液体积计算得不同时间段尿液中GA、corilagin、EA的排泄量；
色谱条件：色谱柱为C18色谱柱；和/或柱温28-32℃；和/或流速：0.8-1.2ml·min-1；和/或检测波长：268-272nm；和/或流动相：甲醇-0.2%冰醋酸/水梯度洗脱：0-15min5-17%甲醇，15-22min17-17%甲醇，22-35min17-30%甲醇，35-55min30-60%甲醇，55-65min60-90%甲醇，65-70min90-5%甲醇；
（3）HPLC-MS同时分离鉴定尿液中原型成分和代谢产物的方法：
尿液样品预处理：按步骤（1）的方法进行；
色谱条件：同步骤（2）中色谱条件；
质谱条件：ESI：负离子模式；雾化气流：1.20-1.80L·min-1；离子源温度：280-320℃；干燥气压力：80-120kPa；质量扫描范围：m/z1...
【专利技术属性】
技术研发人员：张兰珍，吴玲芳，梁文仪，常子豪，张秋楠，
申请(专利权)人：北京中医药大学，
类型：发明
国别省市：北京;11
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