FFA4配体的无标记筛选模型制造技术

本发明专利技术涉及无标记G蛋白偶联受体(GPCR)配体筛选模型的构建及其应用，具体地说是涉及一种无标记脂肪酸受体4(FFA4)配体筛选模型。本发明专利技术利用HT29细胞内源性表达FFA4的特点，利用无标记细胞整合药理学技术，建立了筛选FFA4的激动剂、拮抗剂的方法。该方法还可以用于研究FFA4配体的药理学性质。本发明专利技术所建立的无标记FFA4药物筛选模型具有灵敏度高、可靠、操作简单、实验周期短、对细胞无伤害、多靶点研究及能高通量筛选等特点，对于寻找基于FFA4的配体和与其密切相关的疾病的药物具有重大意义。

Unlabeled screening model of ffa4 ligands

【技术实现步骤摘要】
FFA4配体的无标记筛选模型
本专利技术涉及无标记GPCR配体筛选模型的建立，具体地说是一种无标记游离脂肪酸受体FFA4配体筛选模型。所述GPCR为FFA4；所述方法为无标记细胞整合药理学技术；所述应用为FFA4配体的筛选。技术背景游离脂肪酸受体4(FFA4)，也叫做G蛋白偶联受体GPR120，属于蛋白偶联受体(Gprotein-coupledreceptors,GPCRs)家族成员，其内源性配体为中长链自由脂肪酸，如α亚麻酸(ALA)。这些脂肪酸在在各种生理过程中起着重要作用，尤其与代谢紊乱相关疾病(如糖尿病)相关。FFA4受体除了与糖尿病相关外，还与肥胖、炎症和非酒精性脂肪肝等疾病相关。因此寻找发现针对FFA4的高活性特异性激动剂和拮抗剂是非常必要的(G.Milligan,B.ShimpukadE,T.Ulven,B.D.Hudson,ComplexPharmacologyofFreeFattyAcidReceptors,ChemicalReviews117(2017)67-110.A.Hirasawa,K.Tsumaya,T.Awaj本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种无标记FFA4配体筛选模型，其特征在于：在接种了HT29细胞的细胞培养板中陆续加入待测样品和FFA4已知激动剂，若在HT29细胞上FFA4已知激动剂产生的DMR谱的强度随待测样品浓度的增加而减少，则表明样品可使FFA4已知激动剂脱敏，可判断样品具有FFA4的激动或者拮抗活性。/n

【技术特征摘要】
1.一种无标记FFA4配体筛选模型，其特征在于：在接种了HT29细胞的细胞培养板中陆续加入待测样品和FFA4已知激动剂，若在HT29细胞上FFA4已知激动剂产生的DMR谱的强度随待测样品浓度的增加而减少，则表明样品可使FFA4已知激动剂脱敏，可判断样品具有FFA4的激动或者拮抗活性。


2.根据权利要求1所述的模型，其特征在于：所述细胞培养板为Epic光学生物传感器微孔板。


3.根据权利要求1所述模型，其特征在于：所述细胞培养板中HT29细胞的接种密度为1.5～4.0×104个/孔，细胞培养液体积为10～60μL/孔。


4.根据权利要求1所述的模型，其特征在于：所述FFA4已知激动剂为α-亚麻酸(ALA)或TUG891。


5.根据权利要求1所述的模型，其特征在于：具体步骤为：
a)将待测样品加入到接种了HT29细胞的细胞培养板，待测样品终浓度为0.1nM～100μM，立即测其DMR谱，若其产生DMR信号，检测时间范围10～60min,则表明样品在HT29能引起细胞质量动态变化，则进行b步骤；
b)在步骤a)中加有...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁鑫淼，徐芳芳，张秀莉，王纪霞，曲腊腊，张鹏宇，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁;21