【技术实现步骤摘要】
一种EMS诱导软枣猕猴桃种胚下胚轴突变的新品种培育方法
本专利技术属于植物新品种
，具体涉及一种EMS诱导软枣猕猴桃种胚下胚轴突变的新品种培育方法。
技术介绍
软枣猕猴桃(Actinidiaarguta(Sieb.etZucc.)Planch.exMiq.)，别名中华软枣猕猴桃、软枣子、藤瓜、狗枣子、金果木、猕猴梨、猕猴桃、软枣、深山木天蓼、藤梨、小洋桃等，是猕猴桃科猕猴桃属藤本落叶植物。果实可食用，营养价值很高，含大量维生素C、淀粉，果胶质等，可加工成果酱、果汁、果脯、罐头、酿酒或用于制作糕点、糖果等多种食品。亦可药用，有强壮、解热、健胃、止血等功能；根及根皮对消化道癌有一定治疗和抑制作用；种子含油量35.62％，是一种较好干性油，具有极高的经济和药用等价值；还是良好的蜜源和观赏植物，目前，软枣猕猴桃还是以野生为主，人工栽培(品种)为辅。在现有技术中，软枣猕猴桃多采用杂交方式进行育种，杂交后种子繁殖后代性状产生分离，再在种子苗中选育优良性状植株进行栽培。通过观察种子苗遗传稳定性，发现软枣猕猴桃不仅存在遗传多样...
【技术保护点】
1.一种EMS诱导软枣猕猴桃种胚下胚轴突变的新品种培育方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)材料选择与预处理：取9月下旬野生软枣猕猴桃成熟果实，以清水将果实中的种子洗净，并获取留水底的成熟种子；再将成熟种子与河沙1:3拌匀，种子和河沙混合物保持相对湿度为75％，并置于温度为18-20℃、相对湿度为78％的人工气候箱内黑暗处理30天；/n种胚进一步发育成熟后将种子从河沙中分离洗净，在无菌超净工作台内，将种子用75％乙醇涮洗30s后移至2-5％次氯酸钠溶液浸泡10min，无菌水冲洗10次，并用无菌滤纸吸干表面水分；接着用无菌手术刀和镊子剥去种皮，掰开两子叶取出种胚，再分离出...
【技术特征摘要】
1.一种EMS诱导软枣猕猴桃种胚下胚轴突变的新品种培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)材料选择与预处理：取9月下旬野生软枣猕猴桃成熟果实，以清水将果实中的种子洗净，并获取留水底的成熟种子；再将成熟种子与河沙1:3拌匀，种子和河沙混合物保持相对湿度为75％，并置于温度为18-20℃、相对湿度为78％的人工气候箱内黑暗处理30天；
种胚进一步发育成熟后将种子从河沙中分离洗净，在无菌超净工作台内，将种子用75％乙醇涮洗30s后移至2-5％次氯酸钠溶液浸泡10min，无菌水冲洗10次，并用无菌滤纸吸干表面水分；接着用无菌手术刀和镊子剥去种皮，掰开两子叶取出种胚，再分离出下胚轴，将下胚轴分批放入不同浓度的EMS溶液中，浸泡2-6h；最后用无菌水冲下胚轴10次以备接种；
(2)下胚轴胚性愈伤组织的诱导培养：将步骤(1)中经过EMS浸泡后的下胚轴转接到胚性愈伤组织诱导培养基中，并置于光照周期7h·d-1、光照强度800lx和温度26±2℃条件下培养55天，下胚轴完全脱分化转变成黄绿色的胚性愈伤组织，并进行胚性愈伤组织继代增殖培养；
(3)下胚轴胚性愈伤组织再分化培养：将步骤(2)中胚性愈伤组织切割成小块，并转接到胚性愈伤组织再分化培养基中，并置于光照周期12h·d-1、光照强度1200lx和温度26±2℃条件下继续培养45天，胚性愈伤组织分化出具有独立性、两极性、可分离的胚状体；
(4)胚状体复壮生长培养：将步骤(3)中胚状体剥离后转接到胚状体复壮成长培养基中，并置于光照周期10h·d-1、光照强度1000lx和温度26±2℃条件下进行复壮成长培养，胚状体呈两极化生长，培养至30天胚状体完全发育生长为含有根和茎叶的小植株；
(5)移栽和定植及品系确定：将步骤(4)中小植株驯化炼苗后植于营养钵中，待长至15-20cm时，定植栽培到种质园圃内，观察其生长情况，并进行分类及注标签；接着将不同突变体通过嫁接方法繁育大苗，并进行不同区域栽培；最后进行筛选确定遗传稳定的优良性状突变体作为品系，并进行编号。
2.根据权利要求1所述的EMS诱导软枣猕猴桃种胚下胚轴突变的新品种培育方法，其特征在于：所述步骤(1)中EMS以浓度为0.1mol·L-1、pH＝7的磷酸盐缓冲液作为溶剂配制成体积百分比浓度为0.1-1.5％的EMS溶液。
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【专利技术属性】
技术研发人员：顾地周，刘宇苹，朱俊义，尹春丽，廖卓，候智文，
申请(专利权)人：通化天妍生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22
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