一种降解伏马毒素的饲用枯草芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种降解伏马毒素的饲用枯草芽孢杆菌及其应用，属于微生物与饲料添加剂制备技术领域。本发明专利技术提供的饲用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)命名为AH02，保藏编号为CGMCC NO.18923，该菌能够耐95℃的高温、可在pH值2.0以上的酸性环境生长，耐胆盐能力强，同时具有降解伏马毒素的作用，将枯草芽孢杆菌AH02制成菌剂后用于饲喂动物效果安全可靠，在降低腹泻率，提高饲料转化效率，促进生长方面有积极作用。

A feed Bacillus subtilis degrading fumonisin and its application

【技术实现步骤摘要】
一种降解伏马毒素的饲用枯草芽孢杆菌及其应用
本专利技术涉及微生物及饲料添加剂领域，具体地涉及一种具有降解伏马毒素效果的饲用枯草芽孢杆菌及其菌剂在动物养殖领域的应用。
技术介绍
霉菌毒素的污染对全球畜禽养殖业而言是个很大的挑战，饲料中所含有的霉菌毒素大多数是来自于饲料原料、生产加工以及储存等过程中霉菌的污染。而且霉菌的生长繁殖以及毒素的产生都很难人为进行控制，给畜牧业的经济效益带来很大影响。全球范围内，在80％的地区，霉菌毒素对畜牧行业的生产形成了严重的威胁。伏马毒素(Fumonisins，FB)是一种由串珠镰刀菌等真菌代谢产生的霉菌毒素，是一种污染很广泛的霉菌毒素，可以污染玉米、小麦等多种动物饲料原料。伏马毒素对多种动物具有毒性作用，主要造成动物器官损伤，大剂量或长期低剂量摄入会引起动物急性或慢性中毒，降低动物的生长性能，造成免疫抑制，甚至导致动物死亡。另一方面，由于毒素在体内代谢后产生一些次级代谢产物，通过动物的肌肉、蛋、奶以及内脏等可食用途径进入人体内，间接损害人体健康。还可能通过尿液或粪便排泄至环境中，导致毒素在环境中蓄积，污染土壤及植物。目前降解饲料中霉菌毒素的方法主要有物理方法、化学方法及生物学方法。物理方法需要较大的场地和空间，因此投入人力物力成本较高，而且效果相对一般，化学方法在降解霉菌毒素的同时，破坏了饲料的营养特性，因此较少使用，微生物降解霉菌毒素是一类近年来兴起的方法，具有施用条件温和，对饲料营养物质影响较小，操作简单方便等优点。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种具有降解伏马毒素作用的饲用枯草芽孢杆菌及其应用。为了实现本专利技术的目的，本专利技术的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)是从中国农业大学肉牛饲养基地的肉牛瘤胃液中筛选得到，命名为AH02。经基因序列分析，该菌株AH02为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。该菌株已于2019年11月8日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis，保藏号为CGMCCNo.18923。本专利技术提供的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)AH02的微生物学特性为：革兰氏阳性菌，细胞形态为杆状，长度不超过2μm，宽度不超过0.8μm，具有芽孢且芽孢不膨大；单菌落大小约为3mm，颜色呈米白色，不透明，菌落表面平整，边缘不规则。枯草芽孢杆菌AH02在高温95℃下处理20min后的活菌数均大于1010CFU/ml。AH02可在pH值2.0以上的酸性环境生长，耐胆盐能力强。且具有降解伏马毒素的能力，枯草芽孢杆菌AH02在pH7.4-7.6，37℃下处理发霉饲料3h后对伏马毒素的降解率达到47.62％。且3h后的枯草芽孢杆菌AH02活菌数量级不变。本专利技术的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)AH02，其16SrDNA序列如SEQIDNO.1所示。其保藏编号为CGMCCNO.18923。本专利技术提供含有该枯草芽孢杆菌AH02的菌剂。本专利技术还提供一种含有该枯草芽孢杆菌AH02的动物饲料添加剂。该饲料添加剂含有的枯草芽孢杆菌AH02活菌数为5×108CFU/g～5×1012CFU/g；优选地，含有的枯草芽孢杆菌AH02饲料添加剂的活菌数为5×1010CFU/g～5×1011CFU/g。本专利技术还提供一种含有该枯草芽孢杆菌AH02的动物饲料。其中，所述动物饲料中枯草芽孢杆菌AH02的活菌数为5×107CFU/kg～5×109CFU/kg，优选的5×108CFU/kg。本专利技术对枯草芽孢杆菌AH02的益生效果进行了体外法鉴定，结果显示，枯草芽孢杆菌AH02能够耐酸、酸胆盐，能抵抗胃肠道的内环境，具备益生菌的潜力。本专利技术的一个重要发现在于枯草芽孢杆菌AH02具有降解伏马毒素的能力，因此本专利技术提供了含有枯草芽孢杆菌AH02的抑制伏马毒素的药物，以及提供了枯草芽孢杆菌AH02在降低食品或饲料中伏马毒素污染中的应用。本专利技术实施例中，验证了枯草芽孢杆菌AH02对伏马毒素的降解率达到47.62％。本领域技术人员能够基于本专利技术提供的枯草芽孢杆菌AH02，用于验证其对其他霉菌毒素的降解效果，这不超出本领域技术人员的基本能力范围，因此枯草芽孢杆菌AH02具有降解霉菌毒素并用于制备降解霉菌毒素的药物、以及在降低食品或饲料中霉菌毒素污染中的应用均属于本专利技术的保护范围。附图说明图1为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)AH02CGMCCNo.18923的菌落形态图。图2为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)AH02CGMCCNo.18923的革兰氏染色图。图3为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)AH02CGMCCNo.18923的耐酸性检测结果。图4为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)AH02CGMCCNo.18923的耐胆盐检测结果。图5为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)AH02CGMCCNo.18923的生长曲线。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。下述实施例中所使用的材料、试剂等如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中所使用的培养基如无特殊说明配方如下：LB培养基：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，用蒸馏水定容至1L，用5mol/L的氢氧化钠将pH调至7.0。本专利技术中伏马毒素的检测方法参照《GB5009.240-2016食品安全国家标准食品中伏马毒素的测定》。伏马毒素降解率检测方法参考文献：(1)陈亭亭,张巧艳,王坡,林琳,杨华,杨兰花,杨胜利,袁玉伟.基于羧酸酯酶降解伏马毒素研究.饲料工业,2018,39(8):48-53.(2)BINDEREM,BINDERJ,ELLENDN,etal.Microbiologicaldegradationofdeoxynivalenoland3-acetyl-deoxynivalenol。Mycotoxinsandphycotoxins-developmentsinchemistry,toxicologyandfoodsafety.FortCollins:AlakenInc.,1998:279-285.(3)FUCHSE,BINDEREM,HEIDLERD,etal.StructuralcharacterizationofmetabolitesafterthemicrobialdegradationoftypeatrichothecenesbythebacterialstrainBBSH797.FoodAdditivesandContaminants,2002,19(4):379-386。实施例1枯草芽孢杆菌(Bac本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AH02，其16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)AH02，其16SrDNA序列如SEQIDNO.1所示。


2.如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)AH02，其保藏编号为CGMCCNO.18923。


3.含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)AH02的菌剂、饲料添加剂或动物饲料。


4.含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)AH02的药物。


5.如权利要求4所述的药物，其特征在于，其为抑制霉菌毒素的药物。

...

【专利技术属性】
技术研发人员：马曦，姬琳堡，孙美鸽，李佩健，王贤锋，陈柱生，
申请(专利权)人：江苏澳华生物科技研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32