【技术实现步骤摘要】
利用甲醇和木糖共底物产脂肪酶的基因工程菌及其应用
本专利技术属于生物工程领域，特别涉及一株利用甲醇和木糖共底物产脂肪酶的基因工程菌及其应用。
技术介绍
微生物脂肪酶种类繁多，广泛存在于生物体内，因具有比动物脂肪酶更广的作用pH、作用温度范围等优点，以及在酶理论研究和实际应用中的作用而得到广泛研究，脂肪酶可催化酯类化合物的分解、合成、酯交换等多种反应，具有高度的化学、区域和立体选择性，近几年，在有机合成、制药、去污剂、生物表面活性剂等领域得到广泛应用。南极假丝酵母脂肪酶是一种重要的脂肪酶，具有许多优良的特性，由于它是一种新型的非特异性酶，它无论在溶液中还是以固定化形式存在时均具有很强的稳定性，在进行热处理时酶活最初下降很快，但在一段时间后酶活力便稳定下来，即使进行进一步的热处理也不会有明显变化，其在水解反应和有机合成反应中具有很高的立体选择性，在糖脂的合成中也具有潜在的应用价值。目前，生产南极假丝酵母脂肪酶的培养基成本较高，使南极假丝酵母脂肪酶生产成本较高，因此，若能以廉价的还原性的底物为原料，可以在一定程度上降低成本...
【技术保护点】
1.一株利用甲醇和木糖共底物产脂肪酶的基因工程菌，其特征在于，向宿主菌中导入甲醇氧化酶基因
【技术特征摘要】 【专利技术属性】
1.一株利用甲醇和木糖共底物产脂肪酶的基因工程菌，其特征在于，向宿主菌中导入甲醇氧化酶基因aox1、二羟基丙酮合酶基因das、过氧化氢酶基因cta和二羟基丙酮激酶基因dak；所述宿主菌为可利用木糖产脂肪酶的南极假丝酵母。
2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述宿主菌为南极假丝酵母Candidaantarctica）ZJB09193。
3.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，构建方法如下：
（1）构建TEF-aox1-CYC1t、TEF-das-tCYC1、PDC1p-cta-TDH2t、pGPD-dak-TXPR2表达框，通过多片段克隆的方法，将TEF-das-tCYC1、pGPD-dak-TXPR2两个基因片段与113质粒连接，将TEF-aox1-CYC1t、PDC1p-cta-TDH2t两个基因片段与Pki质粒连接，转化至E.coliDH5α中；
（2）将测序正确的质粒通过酶切得到基因重组片段，将基因重组片段电转化至宿主菌，再通过G418抗性筛选得到所述基因工程菌。
4.权利要求1~3任一项所述基因工程菌在发酵产脂肪酶中的应用。
技术研发人员：章文明，姜岷，杨桥，信丰学，马江锋，李艳，董维亮，周杰，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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