【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种重组人铜锌超氧化物歧化酶活性恢复的方法
本专利技术属于蛋白质医药生物工程与
，具体涉及一种重组蛋白的金属离子活性恢复的方法，尤其是涉及一种重组人铜锌超氧化物歧化酶活性恢复的方法。
技术介绍
基因重组蛋白是通过基因重组技术由不同宿主细胞或宿主菌表达的蛋白。以大肠杆菌为宿主的蛋白表达体系，由于其遗传背景清楚，繁殖快，成本低，表达量高，易于操作，以及大量可供选择利用的克隆和高效表达载体,使之成为人们表达外源基因的首选菌株。虽然研究人员开发出了多种真核表达体系以克服大肠杆菌含内毒素、蛋白翻译后加工修饰体系不完善、高表达时易折叠错误形成包含体等不足,但仍不能完全取代大肠杆菌表达体系。在宿主菌的表达过程中，可能由于缺乏某些蛋白质折叠过程中需要的酶和辅助因子，或环境不适，或无法形成正确的次级键等原因形成无活性的蛋白质。如有些是需要金属离子与其配位才能产生活性，有些蛋白质含有巯基，形成的自由巯基易与多种基团发生化学反应，形成不可逆的错误修饰，常出现结构错误、二硫键错配的无活性蛋白，而同时这种错配蛋白在纯化过程中很难除去。超氧化物歧...
【技术保护点】
一种重组人铜锌超氧化物歧化酶活性恢复的方法，其特征在于，使SOD蛋白处于舒展状态后加入含有Cu
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】一种重组人铜锌超氧化物歧化酶活性恢复的方法，其特征在于，使SOD蛋白处于舒展状态后加入含有Cu2+的溶液和β-巯基乙醇。
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，通过改变蛋白环境使蛋白处于舒展状态；所述β-巯基乙醇在加入含Cu2+的溶液充分反应后加入；加入β-巯基乙醇后，调节pH至8.0±1，充分反应。
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述改变蛋白环境使蛋白处于舒展状态具体为加入氯化钠后，调节pH至4.5～6.5。
根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述氯化钠的终浓度为0.2-2M。
根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述蛋白的终浓度为0.2-3mg/ml。
根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：齐连权，姜玲，万永胜，尤冬超，孙涛，郑博恺，
申请(专利权)人：北京泰德制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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