一种细胞表面展现式快速筛选抗体表达细胞的方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，公开了提供了一种细胞表面展现式快速筛选抗体表达细胞的方法。该方法主要通过对抗体表达细胞引入并表达带有抗体结合能力的蛋白A/G相关的cDNA序列，该序列表达物是一种含信号肽、IgG结合区和跨膜区的蛋白质。该蛋白质与抗体分子的复合物最终随囊泡转运至质膜后，便会出现于细胞表面。利用抗原与抗体的特异性结合，筛选到相应的分泌细胞。本发明专利技术能够避免常规单抗筛选中的繁琐的多孔平板培养、检测和筛选过程，不需要抗性条件，大幅节省时间和人力物力，缩短抗体制作周期。

A method of rapid screening antibody expressing cells by cell surface display

【技术实现步骤摘要】
一种细胞表面展现式快速筛选抗体表达细胞的方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种细胞表面展现式快速筛选抗体表达细胞的方法。
技术介绍
抗体是指抗原刺激机体后，由B淋巴细胞或浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。其中，由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体，称为单克隆抗体，简称单抗。它具有特异性强、纯度高、均一性好等优点。第一代单抗由Kohler和Milstein在1975年制备，它是来源于小鼠B细胞杂交瘤的抗绵羊红细胞的单克隆抗体。近年来，随着研究的不断深入，越来越多的单克隆抗体药物被发掘并应用于治疗肿瘤、病毒性感染、心血管病以及其它疾病，尤其是在肿瘤免疫治疗中显示出良好的前景。单克隆抗体与抗血清(又称多克隆抗体，多抗)的主要差别是单抗为单一B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。最常用的单抗是小鼠的单克隆抗体，制备单克隆抗体的技术又称杂交瘤技术。杂交瘤技术的基本原理是用分泌抗体但不能长期培养的B细胞与能在体外长期培养并可低温保存的肿瘤细胞进行杂交，经筛选得到既能分泌抗体又有瘤细胞的特性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞表面展现式快速筛选抗体表达细胞的方法，其包括如下步骤：构建一种质粒或病毒表达体系，所述表达体系转染或感染细胞后表达含有信号肽、IgG结合区和C-末端跨膜区结构的蛋白；所述抗体与所述蛋白相结合而展现于细胞表面。/n

【技术特征摘要】
1.一种细胞表面展现式快速筛选抗体表达细胞的方法，其包括如下步骤：构建一种质粒或病毒表达体系，所述表达体系转染或感染细胞后表达含有信号肽、IgG结合区和C-末端跨膜区结构的蛋白；所述抗体与所述蛋白相结合而展现于细胞表面。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括：筛选抗体表达细胞。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述表达体系为pLVX-Puro-TETON载体。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述pLVX-Puro-TETON载体是在PLVX-Puro载体的位点XhoI和EcoRI之间插入TET操纵子序列得到。


5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体。


6.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于，所述抗体为多克隆抗体。


7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
1)构建病毒表达体系，所述表达体系携带编码含有信号肽、IgG结合区和C-末端跨膜区结构的proteinA/G的cDNA序列；
2)制备重组病毒悬液，收集重组病毒颗粒；
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【专利技术属性】
技术研发人员：苏庆宁，苏文颀，张艺，李世和，
申请(专利权)人：澳世科技深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44