MAPK14抑制剂在制备药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供MAPK14抑制剂在制备药物中的应用，所述药物用于下列至少之一：抑制PRL的生成；抑制PRL的分泌；抑制垂体泌乳素腺瘤的生长。MAPK14促进了垂体泌乳素腺瘤的生长和PRL的分泌，而通过抑制或敲除MAPK14基因，能够显著抑制垂体泌乳素腺瘤的生长和PRL的分泌。因此，MAPK14可作为新的泌乳素腺瘤的治疗靶点，MAPK14抑制剂可用于制备预防或治疗泌乳素腺瘤的药物。垂体泌乳素腺瘤患者垂体组织中MAPK14和PRL蛋白共定位现象显著，垂体泌乳素腺瘤患者垂体组织中MAPK14和PRL蛋白表达均显著增加。因此，可将MAPK14基因作为泌乳素腺瘤诊断标志物用于诊断泌乳素腺瘤。

The application of Mapk14 inhibitor in the preparation of drugs

【技术实现步骤摘要】
MAPK14抑制剂在制备药物中的应用
本专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及MAPK14抑制剂在制备药物中的应用、MAPK14基因作为泌乳素腺瘤诊断标志物的用途、筛选药物的方法、试剂在制备试剂盒中的应用和调控泌乳素腺瘤细胞增殖能力的方法。
技术介绍
垂体瘤是常见的颅内良性肿瘤之一，发病率在颅内肿瘤中仅次于脑胶质细胞瘤和脑膜瘤，约占颅内肿瘤的10％，且随着诊断水平的不断提高，发病率有逐年增加趋势。随着肿瘤不断生长，可压迫蝶鞍区周围结构，如视神经、海绵窦、脑底动脉、下丘脑等，甚至累及额叶、脑干，而导致严重的功能障碍。同时，肿瘤生长还可导致垂体激素分泌紊乱。按照外周血激素水平，垂体瘤分为无功能型垂体瘤(NFPA)和功能型垂体瘤，包括：泌乳素腺瘤、促肾上腺皮质激素腺瘤、生长激素腺瘤、促甲状腺激素腺瘤、促性腺激素腺瘤及混合激素分泌腺瘤等。泌乳素腺瘤是最常见的垂体肿瘤，约占垂体瘤的80％～85％，是由垂体泌乳素细胞瘤分泌过量泌乳素(prolactin,PRL)引起的下丘脑-垂体疾病中常见的一种疾病，典型临床表现：女性为闭经、溢乳、不育、高泌乳素血症；男性为阳痿，性功能减退，乳房发育；肿瘤压迫及侵犯周围结构所引起的症状和体征。有临床症状的泌乳素微腺瘤一般不会长成大腺瘤，部分腺瘤有侵袭性生长，出现腺瘤增大。根据2014版的《中国垂体泌乳素腺瘤诊治共识》，垂体泌乳素腺瘤治疗方案首选多巴胺受体激动剂进行药物治疗。使用多巴胺受体激动剂不仅可以降低血清PRL水平，同时可以帮助恢复性腺功能并缩小肿瘤体积。目前治疗垂体催乳素腺瘤的药物主要有以下几种：溴隐亭、卡麦角林、培高利特及喹高利特，前3种为麦角碱衍生物类多巴胺受体激动剂，喹高利特为非麦角碱衍生物类，且均为多巴胺D2受体(DRD2)激动剂。甲磺酸培高利特因为增加心脏瓣膜损害的风险而自愿退市。目前在临床治疗过程中，约有8％～25％的垂体泌乳素腺瘤患者经溴隐亭治疗后出现耐药现象。溴隐亭为多巴胺D2受体(DRD2)激动剂，治疗泌乳素腺瘤效果显著，但价格昂贵，且存在一定副作用，例如：溴隐亭对80％～90％的患者可有效降低PRL、恢复性腺功能、缩小或控制肿瘤生长，其副作用主要是胃肠道反应，剂量较大时可有眩晕、体位性低血压、头痛、瞌睡与便秘等。对溴隐亭耐药或对其不良反应不耐受的患者，没有可替代治疗的药品。因此，为保证垂体泌乳素腺瘤患者的健康，并保障其治疗的安全性，迫切需要研究开发泌乳素腺瘤的治疗新靶点和药物。目前，泌乳素腺瘤的发病机制尚不完全清楚，临床治疗靶点很少且治疗药物缺乏，因此临床上亟待寻找泌乳素腺瘤的治疗新靶点和药物。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供MAPK14抑制剂在制备药物中的应用、MAPK14基因作为泌乳素腺瘤诊断标志物的用途、筛选药物的方法、试剂在制备试剂盒中的应用和调控泌乳素腺瘤细胞增殖能力的方法。为实现以上目的，本专利技术提供以下技术方案。本专利技术第一方面提供MAPK14抑制剂在在制备药物中的应用，所述药物用于下列至少之一：抑制PRL的生成；抑制PRL的分泌；抑制垂体泌乳素腺瘤的生长。作为上述技术方案的进一步改进，所述药物用于预防或治疗泌乳素腺瘤。作为上述技术方案的进一步改进，所述MAPK14抑制剂包括下述至少一种：特异性抑制MAPK14的小分子化合物；特异性干扰MAPK14基因表达的干扰分子；特异性敲除MAPK14基因的基因编辑试剂；特异性与MAPK14基因编码的蛋白结合的抗体或配体。作为上述技术方案的进一步改进，所述特异性干扰MAPK14基因表达的干扰分子为siRNA。作为上述技术方案的进一步改进，所述siRNA具有如SEQIDNO：1～3所示的核苷酸序列。本专利技术第二方面提供MAPK14基因作为泌乳素腺瘤诊断标志物的用途。本专利技术第三方面提供一种筛选药物的方法，所述药物用于预防或治疗泌乳素腺瘤，包括：将候选药物用于泌乳素腺瘤模型；定量检测用药前后泌乳素腺瘤模型中的MAPK14蛋白；用药后相比于用药前，所述泌乳素腺瘤模型中MAPK14蛋白的表达水平降低，表明所述候选药物为目标药物。本专利技术第四方面提供试剂在制备试剂盒中的应用，所述试剂用于定量检测MAPK14蛋白表达水平，所述试剂盒用于诊断泌乳素腺瘤或判断药物治疗泌乳素腺瘤有效性。本专利技术第五方面提供一种调控泌乳素腺瘤细胞增殖能力的方法，包括：在培养过程中调控泌乳素腺瘤细胞的MAPK14蛋白的表达水平升高或降低。作为上述技术方案的进一步改进，所述MAPK14蛋白的表达水平降低，所述泌乳素腺瘤细胞增殖能力降低。作为上述技术方案的进一步改进，所述MAPK14蛋白的表达水平降低是通过siRNA实现的。作为上述技术方案的进一步改进，所述siRNA具有如SEQIDNO：1～3所示的核苷酸序列。作为上述技术方案的进一步改进，所述MAPK14蛋白的表达水平升高，所述泌乳素腺瘤细胞增殖能力增强。作为上述技术方案的进一步改进，所述MAPK14蛋白的表达水平升高是通过将携带有MAPK14基因的表达载体导入所述泌乳素腺瘤细胞中实现的。本专利技术的有益效果：MAPK14促进了垂体泌乳素腺瘤的生长和PRL的分泌，而通过抑制或敲除MAPK14基因，能够显著抑制垂体泌乳素腺瘤的生长和PRL的分泌。因此，MAPK14可作为新的泌乳素腺瘤的治疗靶点，MAPK14抑制剂可用于制备预防或治疗泌乳素腺瘤的药物。垂体泌乳素腺瘤患者垂体组织中MAPK14和PRL蛋白共定位现象显著，垂体泌乳素腺瘤患者垂体组织中MAPK14和PRL蛋白表达均显著增加。因此，可将MAPK14基因作为泌乳素腺瘤诊断标志物用于诊断泌乳素腺瘤。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对本专利技术范围的限定。图1为免疫荧光检测正常小鼠和模型小鼠垂体中MAPK14和PRL的荧光图。图2为各组小鼠垂体瘤与其体重的比值的对比图(n＝5)。图3为ELISA测定各组小鼠血清中PRL的含量结果图(n＝3)。图4为RT-qPCR测定各组小鼠垂体中PRL基因的表达结果图(n＝3)。图5～6为Westernblot测定各组小鼠垂体中蛋白含量结果图(n＝3)。图7为各组小鼠垂体瘤与其体重的比值的对比图(n＝5)。图8为ELISA测定各组小鼠血清中PRL的含量结果图(n＝3)。图9为RT-qPCR测定各组小鼠垂体中PRL基因的表达结果图(n＝3)。图10～11为Westernblot测定各组小鼠垂体中蛋白含量结果图(n＝3)。图12为RT-qPCR测定各组GH3细胞中MAPK14基因的表达结果图(n＝3)。图13为RT-qPCR测定各组GH3细胞中PRL基因的表达结果图(n＝3)。...

【技术保护点】
1.MAPK14抑制剂在在制备药物中的应用，其特征在于，所述药物用于下列至少之一：/n抑制PRL的生成；/n抑制PRL的分泌；/n抑制垂体泌乳素腺瘤的生长。/n

【技术特征摘要】
1.MAPK14抑制剂在在制备药物中的应用，其特征在于，所述药物用于下列至少之一：
抑制PRL的生成；
抑制PRL的分泌；
抑制垂体泌乳素腺瘤的生长。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物用于预防或治疗泌乳素腺瘤。


3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述MAPK14抑制剂包括下述至少一种：
特异性抑制MAPK14的小分子化合物；
特异性干扰MAPK14基因表达的干扰分子；
特异性敲除MAPK14基因的基因编辑试剂；
特异性与MAPK14基因编码的蛋白结合的抗体或配体。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述特异性干扰MAPK14基因表达的干扰分子为siRNA。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述siRNA具有如SEQIDNO：1～3所示的核苷酸序列。


6.MAPK14基因作为泌乳素腺瘤诊断标志物的用途。
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【专利技术属性】
技术研发人员：王雄，丁巧燕，吴金虎，
申请(专利权)人：王雄，武汉市第三医院，
类型：发明
国别省市：湖北;42