一种实验室溪蟹感染并殖吸虫的方法技术

本发明专利技术是一种实验室条件下溪蟹感染并殖吸虫的方法，其主要包括：收集大鼠感染并殖吸虫镜检有虫卵的粪便，清水融化后带虫卵粪液过五号药筛再过9药号筛，将附着虫卵的9药号筛置于川卷螺饲养水池清洗，让虫卵充分进入川卷螺饲养水池中，每个水池投放川卷螺60‑80个，川卷螺饲养水池水温保持在18‑23℃，虫卵进入川卷螺饲养水池中两周后每天驱赶川卷螺一次；将感染并殖吸虫三周以上的川卷螺转移到溪蟹饲养繁殖箱的水池中，每个饲养繁殖箱投入体重20‑30g溪蟹80‑100只。随着川卷螺成熟尾蚴的逸出，川卷螺与溪蟹在饲养繁殖箱内共栖六周后，溪蟹并殖吸虫感染率可达到90%以上，远远超过目前自然感染率，完全能满足实验室研究感染并殖吸虫溪蟹的需要。

A method of Paragonimus infection in laboratory crab

【技术实现步骤摘要】
一种实验室溪蟹感染并殖吸虫的方法
本专利技术涉及实验室条件下溪蟹感染并殖吸虫的方法。
技术介绍
目前，并殖吸虫人兽共患病研究、并殖吸虫肝纤维化和肺纤维化动物模型开发、并殖吸虫成虫分泌蛋白研究、以及特殊并殖吸虫种类的保种等工作，都需要大量感染并殖吸虫的溪蟹，随着森林的减少，保虫宿主野生动物群体逐渐缩小；农药化肥的大量使用，以及人类医疗卫生条件的改善，并殖吸虫发病人群减少等因素，直接导致第二中间宿主溪蟹的减少，并且溪蟹并殖吸虫感染率均呈现逐年下降的趋势（自然感染率20%左右），无法满足实验需要。为了解决这一现实问题，科研人员有必要在解决溪蟹繁殖技术的基础上，建立一种提高溪蟹感染并殖吸虫的方法。并殖吸虫的第一中间宿主为川卷螺（虫卵到尾蚴），溪蟹是并殖吸虫的第二中间宿主（尾蚴到囊蚴），人、犬、猴、家猫、大白鼠等哺乳动物是保虫宿主（囊蚴到成虫）；哺乳动物感染并殖吸虫（囊蚴）后3个月，成虫产生的虫卵便随痰和粪便排出体外。基于并殖吸虫复杂的生活史，课题组进行了实验室条件下溪蟹感染并殖吸虫的研究。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种实验室条件下溪蟹感染并殖吸虫的方法。本专利技术的实验室条件下溪蟹感染并殖吸虫方法的步骤为：1.收集实验室感染并殖吸虫大鼠100天以上的粪便（镜检有虫卵的粪便），每20g粪便加180ml清水融化后轻轻震荡摇匀过五号药筛(180μm±7.6μm)充分过滤粪便颗粒，让虫卵顺利通过五号药筛，通过五号药筛含虫卵的液体再过9号药筛（75±4.1um）保证并殖吸虫的虫卵附着在9号药筛上，附着虫卵的9号药筛及时用保鲜袋密封保存在（16-20℃）闭光环境下保存备用，时间不超过24小时；2.川卷螺的并殖吸虫尾蚴感染2.1建立川卷螺饲养水池；2.2每个水池投放川卷螺60-80个，水池水面始终保持15-20棵水白菜，保障川卷螺吸附和食用，同时利用水白菜发达的根系消耗水中氮，防止水体富营养化；2.3将附着有并殖吸虫虫卵的24小时内9药号筛放于川卷螺饲养水池，用毛刷轻轻刷洗，让虫卵充分进入川卷螺饲养水池中；2.4川卷螺饲养水池水温保持在18-23℃，保证并殖吸虫虫卵充分孵化为毛蚴，并殖吸虫虫卵进入川卷螺饲养水池中两周后每天驱赶川卷螺一次，让川卷螺迁移运动，增加毛蚴侵入川卷螺体的机会；3.将感染并殖吸虫三周以上的川卷螺转移到溪蟹饲养繁殖箱的水池中，每个饲养繁殖箱投入人工繁殖的体重20-30g溪蟹80-100只，随着川卷螺体内不断成熟尾蚴的逸出，溪蟹并殖吸虫尾蚴感染率逐渐上升，川卷螺与溪蟹在饲养繁殖箱内共栖六周后，溪蟹并殖吸虫感染率可达到90%以上，远远超过目前自然感染率，完全能满足实验室研究感染并殖吸虫溪蟹的需要。随着川卷螺体内不断成熟尾蚴的逸出，溪蟹并殖吸虫尾蚴感染率逐渐上升，川卷螺与溪蟹在饲养繁殖箱内共栖六周后，溪蟹并殖吸虫感染率可达到90%以上，远远超过目前自然感染率，完全能满足实验室研究感染并殖吸虫溪蟹的需要。具体实施方式本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限定本专利技术的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过购买获得的常规产品。实施例11.收集实验室感染并殖吸虫大鼠100天以上的镜检有虫卵的粪便，每20g粪便加180ml清水融化后轻轻震荡摇匀过五号药筛(180μm±7.6μm)充分过滤粪便颗粒，让虫卵顺利通过五号药筛，通过五号药筛含虫卵的液体再过9药号药筛（75±4.1um），保证并殖吸虫的虫卵附着在9药号筛上，附着虫卵的9药号筛及时用保鲜袋密封保存在（16-20℃）闭光环境下保存备用，时间不超过24小时。2.川卷螺的并殖吸虫尾蚴感染2.1建立川卷螺饲养水池（1mm不锈钢板制成）长100×宽60×高30cm水深20cm；2.2每个水池投放川卷螺80个，水池水面始终保持20棵水白菜，保障川卷螺吸附和食用，同时利用水白菜发达的根系消耗水中氮，防止水体富营养化；2.3将附着有并殖吸虫虫卵的24小时内9药号筛放于川卷螺饲养水池，用毛刷轻轻刷洗，让虫卵充分进入川卷螺饲养水池中；2.4川卷螺饲养水池水温保持在18-23℃，保证并殖吸虫虫卵充分孵化为毛蚴，并殖吸虫虫卵进入川卷螺饲养水池中两周后每天驱赶川卷螺一次，让川卷螺迁移运动增加毛蚴侵入川卷螺体的机会。3.将感染并殖吸虫三周以上的川卷螺转移到溪蟹饲养繁殖箱（长100×宽60×高30cm）的水池中，每个饲养繁殖箱投入人工繁殖的体重20-30g溪蟹100只。实施例2：1.收集实验室感染并殖吸虫大鼠100天以上的镜检有虫卵的粪便，每20g粪便加180ml清水融化后轻轻震荡摇匀过五号药筛(180μm±7.6μm)充分过滤粪便颗粒，让虫卵顺利通过五号药筛，通过五号药筛含虫卵的液体再过9药号药筛（75±4.1um），保证并殖吸虫的虫卵附着在9药号筛上，附着虫卵的9药号筛及时用保鲜袋密封保存在（16-20℃）闭光环境下保存备用，时间不超过24小时。2.川卷螺的并殖吸虫尾蚴感染2.1建立川卷螺饲养水池（1mm不锈钢板制成）长100×宽60×高30cm水深20cm；2.2每个水池投放川卷螺60个，水池水面始终保持15棵水白菜，保障川卷螺吸附和食用，同时利用水白菜发达的根系消耗水中氮，防止水体富营养化；2.3将附着有并殖吸虫虫卵的24小时内9药号筛放于川卷螺饲养水池，用毛刷轻轻刷洗，让虫卵充分进入川卷螺饲养水池中；2.4川卷螺饲养水池水温保持在18-23℃，保证并殖吸虫虫卵充分孵化为毛蚴，并殖吸虫虫卵进入川卷螺饲养水池中两周后每天驱赶川卷螺一次，让川卷螺迁移运动增加毛蚴侵入川卷螺体的机会。3.将感染并殖吸虫三周以上的川卷螺转移到溪蟹饲养繁殖箱（长100×宽60×高30cm）的水池中，每个饲养繁殖箱投入人工繁殖的体重20-30g溪蟹80只。随着川卷螺体内不断成熟尾蚴的逸出，溪蟹并殖吸虫尾蚴感染率逐渐上升，川卷螺与溪蟹在饲养繁殖箱内共栖六周后，溪蟹并殖吸虫感染率可达到90%以上，远远超过目前自然感染率，完全能满足实验室研究感染并殖吸虫溪蟹的需要。以上显示和描述了本专利技术的基本原理、主要特征和本专利技术的优点。本行业的技术人员应该了解，本专利技术不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本专利技术的原理，在不脱离本专利技术精神和范围的前提下，本专利技术还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本专利技术范围内。本专利技术要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种实验室溪蟹感染并殖吸虫的方法，其特征在于：按以下步骤进行：/n1）收集实验室感染并殖吸虫大鼠100天以上的镜检有虫卵的粪便，每20g粪便加180ml清水融化后轻轻震荡摇匀过五号药筛，充分过滤粪便颗粒，让虫卵顺利通过五号药筛，通过五号药筛的含虫卵液体再过9号药筛，保证并殖吸虫的虫卵附着在9号药筛上，附着虫卵的9号药筛及时用保鲜袋密封保存在16-20℃闭光环境下保存备用，备用时间不超过24小时；/n2）川卷螺的并殖吸虫尾蚴感染/n（1）建立川卷螺饲养水池；/n（2）每个水池投放川卷螺60-80个，水池水面始终保持15-20棵水白菜，保障川卷螺吸附和食用，同时利用水白菜发达的根系消耗水中氮，防止水体富营养化；/n（3）将附着有并殖吸虫虫卵的24小时内9药号筛放于川卷螺饲养水池，用毛刷轻轻刷洗，让虫卵充分进入川卷螺饲养水池中；/n（4）川卷螺饲养水池水温保持在18-23℃，保证并殖吸虫虫卵充分孵化为毛蚴，并殖吸虫虫卵进入川卷螺饲养水池中两周后每天驱赶川卷螺一次，让川卷螺迁移运动增加毛蚴侵入川卷螺体的机会；/n3）将感染并殖吸虫三周以上的川卷螺转移到溪蟹饲养繁殖箱水池中，每个饲养繁殖箱投入人工繁殖的体重2-30g溪蟹80-100只，随着川卷螺体内不断成熟尾蚴的逸出，溪蟹并殖吸虫尾蚴感染率逐渐上升，川卷螺与溪蟹在饲养繁殖箱内共栖六周以上，确保溪蟹并殖吸虫感染率可达到90%以上。/n...

【技术特征摘要】
1.一种实验室溪蟹感染并殖吸虫的方法，其特征在于：按以下步骤进行：
1）收集实验室感染并殖吸虫大鼠100天以上的镜检有虫卵的粪便，每20g粪便加180ml清水融化后轻轻震荡摇匀过五号药筛，充分过滤粪便颗粒，让虫卵顺利通过五号药筛，通过五号药筛的含虫卵液体再过9号药筛，保证并殖吸虫的虫卵附着在9号药筛上，附着虫卵的9号药筛及时用保鲜袋密封保存在16-20℃闭光环境下保存备用，备用时间不超过24小时；
2）川卷螺的并殖吸虫尾蚴感染
（1）建立川卷螺饲养水池；
（2）每个水池投放川卷螺60-80个，水池水面始终保持15-20棵水白菜，保障川卷螺吸附和食用，同时利用水白菜发达的根系消耗水中氮，防止水体富营养化；
（3）将附着有并殖吸虫虫卵的24小时内9药号筛放于川卷螺饲养水池，用毛刷轻轻刷洗，让虫卵充分进入川卷螺饲养水池中；

【专利技术属性】
技术研发人员：王文林，郑红，角建林，李波，
申请(专利权)人：昆明医科大学，
类型：发明
国别省市：云南;53