心肌细胞多元活性检测的叉指排布导电纳米管传感装置制造方法及图纸

本发明专利技术公开了一种心肌细胞多元活性检测的传感装置，该装置包括PCB电路板和多组叉指电极；多组叉指电极呈中心对称分布；叉指电极包括总线和叉指电极阵列，多个叉指电极对垂直分布在总线一端组成叉指电极阵列，每两根总线的叉指电极阵列相对交错排布构成叉指电极。总线另一端与PCB电路板上的焊盘连接。叉指电极表面上固定一用于培养细胞的培养腔。所述叉指电极由沉积在PET多孔膜的导电纳米空心管构成。本发明专利技术采用铂空心纳米管阵列作为三维生物界面，具有生物相容性良好，比表面积大，与细胞更好地耦合，使得制备得到的传感器可以在实现心肌细胞电生理、生长与机械搏动信号、代谢信号多元活性同步检测的同时，极大提高各类信号的检测灵敏性。

A interdigital conductive nanotube sensor for the detection of multiple activities of cardiomyocytes

【技术实现步骤摘要】
心肌细胞多元活性检测的叉指排布导电纳米管传感装置
本专利技术涉及一种叉指排布导电纳米管传感器，尤其涉及一种能检测心肌细胞多元活性的传感装置。
技术介绍
目前，用于心肌细胞活性的检测指标，包括心肌电信号、电阻抗、生化标志物，从而反映心肌细胞电生理、生长、代谢。然而，通常对于这些参数检测传感装置存在着孤立单一的问题，无法研究在内外因作用下心肌细胞各参数间的协同变化内在联系。同时，通常用于心肌细胞检测的传感装置常为微米尺度的平面电极，与细胞膜耦合效果较差，从而影响了检测心肌细胞电生理信号与生长与机械搏动信号的灵敏性，此外，常用的平面电化学电极也无法穿透细胞膜记录胞内的生化与活性，只能检测胞外微弱的代谢信号，因此，这些都成为了阻碍心肌细胞多参数同步高灵敏一体化分析的发展。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有心肌传感装置无法同步检测细胞电生理信号、生长与机械搏动信号、代谢信号的问题，同时微米尺度的平面电极与细胞耦合效果较差，并且无法穿透细胞膜的缺点，开发了基于叉指排布导电纳米管传感装置，用于心肌细胞电生理、生长与机械搏动信号、代谢信号的多元活性的同步检测。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：一种心肌细胞多元活性检测的传感装置，包括PCB电路板和多组叉指电极；多组叉指电极呈中心对称分布；叉指电极包括总线和叉指电极阵列，多个叉指电极对垂直分布在总线一端组成叉指电极阵列，每两根总线的叉指电极阵列相对交错排布构成叉指电极。总线另一端与PCB电路板上的焊盘连接。叉指电极表面上固定一用于培养细胞的培养腔。总线和叉指电极阵列由沉积在PET多孔膜的导电纳米管构成；进一步地，叉指电极阵列的宽度为80～120μm，相邻两个叉指电极阵列的间距为30μm。进一步地，所述导电纳米空心管的直径为450nm、长度为1～2μm。进一步地，所述总线和叉指电极阵列由沉积在绝缘PET多孔膜的空心铂纳米管构成，由以下步骤制得：(1)光刻获得叉指图案：以孔径为450nm的PET多孔膜1作为绝缘基底,采用光刻制备具有中心对称分布的多组叉指电极排布图案，获得图案化的PET多孔膜；(2)镀电极:在步骤(1)中获得的图案化的PET多孔膜上磁控溅射30nm金或铂，去除叉指电极排布图案外的金或铂得到导电的PET多孔膜。(3)制备空心铂纳米管阵列：以PET膜镀金属面接触铜片为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂丝为对电极，以含有1wt％氯铂酸、0.5M盐酸的电解液在恒电流工作模式下电沉积200s，在导电的PET多孔膜的孔壁形成空心铂纳米管状结构。再利用O2等离子体刻蚀掉PET多孔膜上未溅射金属面的部分PET多孔膜，露出直径450nm、长度1～2μm的叉指排布空心铂纳米管。进一步地，还包括一与培养腔相匹配的培养腔盖，细胞培养腔的直径为1cm，培养腔盖采用15ml离心管盖子。本专利技术的有益效果是，本专利技术采用铂空心纳米管阵列作为三维生物界面，具有生物相容性良好，比表面积大，与细胞更好地耦合，使得制备得到的传感器可以在实现心肌细胞电生理、生长与机械搏动信号、代谢信号多元活性同步检测的同时，极大提高各类信号的检测灵敏性。附图说明下面结合附图和实施例对本专利技术进一步说明。图1是绝缘PET多孔膜上的电极分布示意图；图2是传感器集成单元组装示意图；图3是PET膜上叉指电极部分放大后导电纳米管分布示意图；图4是PET膜上的叉指电极低倍数SEM结果图；图5是PET膜上的叉指电极局部放大的导电纳米管排布高倍数SEM表征图；图6是心肌细胞电生理实验多通道结果图；图7为多个通道心肌细胞生长阻抗谱信号测试多通道结果图；图8为多个通道心肌细胞长时代谢信号测试多通道结果图；图中，PET多孔膜1、电极外部接口2、总线3、叉指电极阵列4、PCB电路板5、焊盘6、排针7、玻璃培养腔8、培养腔盖9、导电纳米空心管10。具体实施方式本专利技术开发了基于叉指排布导电纳米管纳米传感装置，可以同步检测心肌细胞电生理、生长与机械搏动信号、代谢信号多元活性。如图2所示，该传感装置包括PCB电路板5和多组叉指电极；多组叉指电极呈中心对称分布；叉指电极包括总线3和叉指电极阵列4，多个叉指电极对垂直分布在总线3一端组成叉指电极阵列4，每两根总线3的叉指电极阵列4相对交错排布构成叉指电极，如图3、4所示。总线3另一端与PCB电路板5上的焊盘6连接。叉指电极表面上固定一用于培养细胞的培养腔8。玻璃培养腔8垂直粘结在叉指电极表面上，使底部覆盖叉指电极阵列4所在区域，形成不漏液的培养腔。所述叉指电极由沉积在PET多孔膜1的导电纳米空心管10构成，如图4、5所示；作为优选，总线3的另一端设有电极外部接口2，电极外部接口2与相匹配的焊盘6连接。另外，叉指电极的个数随尺寸大小而定，本实施例选取8个叉指电极呈中心对称分布，叉指电极朝向圆心，总线3朝外，便于培养腔8覆盖叉指电极，一个叉指电极是一个通道，如图1所示。叉指电极阵列4的单个电极的宽度以及相邻两个电极的间距会影响测试的灵敏度和一致性。在本专利技术的一种优选实施方式中，选取叉指电极阵列4中的各电极的宽度为80-120μm，相邻两个电极间距为30μm，不仅能提高阻抗检测灵敏度，还能使细胞阻抗处于较低频段的变化，而低频段可以检测到精确阻抗。在一个优选的方式中，培养腔8采用石英玻璃材料，还包括一采用15ml离心管盖子作为培养腔盖9，该腔盖9与培养腔8相匹配，使得培养腔盖9置于培养腔8上可防止测试过程中细菌污染和培养液蒸发。如图3所示，叉指电极上有垂直排布的导电纳米空心管10，直径为450nm、长度约为1～2μm。该具有三维形貌的电极阵列可以更好地与细胞耦合，在一定的激励条件下，导电纳米管可以穿透细胞膜，检测细胞膜内外的反应变化，提高各类信号的检测灵敏性。所述导电纳米空心管的直径为450nm、长度为1～2μm。导电纳米空心管可以为空心铂纳米管、三氧化二铝纳米空心管等。本实施方式中提供一种空心铂纳米管的制备方法，具体如下：采用光刻与电化学沉积相结合的方法制备叉指排布的铂纳米管阵列。以孔径为450nm的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)高分子膜1作为绝缘基底，首先采用光刻技术，在PET膜上旋涂一层RZJ-390PG正性光刻胶，紫外光通过具有叉指排布图案的掩膜版照射到光刻胶表面进行曝光，在显影液中浸泡后，曝光部分的光刻胶被除去。然后将显影之后的PET膜进行磁控溅射30nmAu、铂或其他金属，以使PET膜导电，溅射后的膜采用丙酮浸泡，溶解剩余的光刻胶的同时也除去光刻胶上溅射的金属，从而得到具有叉指电极4图案化的PET膜如图4所示。接着采用电化学沉积技术，将PET膜置于电化学工作站和三电极工作体系中，以PET膜镀金面接触铜片为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂丝为对电极，以含有1wt％氯铂酸、0.5M盐酸的电解液在恒电流工作模式下电沉积200s，在PET膜的孔壁形成空心管状结构。再利用O2等离子体刻本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种心肌细胞多元活性检测的传感装置，其特征在于，包括PCB电路板(5)和多组叉指电极；多组叉指电极呈中心对称分布；叉指电极包括总线(3)和叉指电极阵列(4)，多个叉指电极对垂直分布在总线(3)一端组成叉指电极阵列(4)，每两根总线(3)的叉指电极阵列(4)相对交错排布构成叉指电极。总线(3)另一端与PCB电路板(5)上的焊盘(6)连接。叉指电极表面上固定一用于培养细胞的培养腔(8)。总线(3)和叉指电极阵列(4)由沉积在PET多孔膜(1)的导电纳米管(10)构成。/n

【技术特征摘要】
1.一种心肌细胞多元活性检测的传感装置，其特征在于，包括PCB电路板(5)和多组叉指电极；多组叉指电极呈中心对称分布；叉指电极包括总线(3)和叉指电极阵列(4)，多个叉指电极对垂直分布在总线(3)一端组成叉指电极阵列(4)，每两根总线(3)的叉指电极阵列(4)相对交错排布构成叉指电极。总线(3)另一端与PCB电路板(5)上的焊盘(6)连接。叉指电极表面上固定一用于培养细胞的培养腔(8)。总线(3)和叉指电极阵列(4)由沉积在PET多孔膜(1)的导电纳米管(10)构成。


2.根据权利要求1所述心肌细胞多元活性检测的传感装置，其特征在于，叉指电极阵列的宽度为80～120μm，相邻两个叉指电极阵列的间距为30μm。


3.根据权利要求1所述心肌细胞多元活性检测的传感装置，其特征在于，所述导电纳米空心管(10)的直径为450nm、长度为1～2μm。


4.根据权利要求1所述心肌细胞多元活性检测的传感装置，其特征在于，所述总线(3)和叉指电极阵列(4)由沉积在绝缘PET多孔膜(1)的空心铂纳...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡宁，徐冬馨，谢曦，黎洪波，方佳如，杨成端，杨成，陈惠娟，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东;44