一种检测丝状真菌转化体系遗传稳定性的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测黑曲霉转化体系遗传稳定性的方法，属于生物技术领域。本发明专利技术提供了一种可用于转化黑曲霉等丝状真菌且可用于检测黑曲霉转化体系等丝状真菌转化体系遗传稳定性的重组质粒，此重组质粒同时携带GUS报告基因和目的基因，使用此重组质粒将目的基因转化至丝状真菌的基因组时，可通过简单的将重组丝状真菌长出的菌丝进行GUS染色来判断目的基因是否转化成功，筛选效率高；使用此重组质粒检测丝状真菌转化体系遗传稳定性时，也可通过简单的将传代后的重组丝状真菌长出的菌丝进行GUS染色来判断重组丝状真菌中目的基因的遗传是否稳定，检测效率高。

A method to detect the genetic stability of transformation system of filamentous fungi

【技术实现步骤摘要】
一种检测丝状真菌转化体系遗传稳定性的方法
本专利技术涉及一种检测丝状真菌转化体系遗传稳定性的方法，属于生物

技术介绍
黑曲霉(Aspergillusniger)是一种真核微生物，属于丝状真菌，其作为重要的细胞工厂已有100多年的历史，主要被用于生产酶(淀粉酶类、果胶酶和木聚糖酶)和有机酸(如柠檬酸)。与此同时，黑曲霉属于美国FDA认证的安全级微生物菌种(GenerallyRecognizedasSafe，GRAS)，其所产产物的应用基本上不会对人类和环境造成任何伤害。此外，黑曲霉还具有高产、高分泌等优势，这使得黑曲霉成为了异源蛋白表达的理想宿主菌。因此，黑曲霉在现代发酵工业中的重要性不言而喻。在将黑曲霉应用于生产酶和有机酸等产物的过程中，通过基因工程手段将不同来源的基因转化至黑曲霉的基因组中以获得可表达不同外源基因的重组黑曲霉十分关键。但是，黑曲霉的基因组是多倍体。对微生物进行基因工程改造时，最困难的就是面对多倍体现象。这主要是因为多倍体在分裂繁殖时，会发生同源染色体分离，很难把改造遗传给所有子代，遗传稳定性很差。因此，建立一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒包含编码启动子的基因、第一酶切位点、GUS报告基因、第二酶切位点、目的基因、编码终止子的基因和抗性基因。/n

【技术特征摘要】
1.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒包含编码启动子的基因、第一酶切位点、GUS报告基因、第二酶切位点、目的基因、编码终止子的基因和抗性基因。


2.如权利要求1所述的一种重组质粒，其特征在于，所述编码启动子的基因位于GUS报告基因的上游；所述编码终止子的基因位于GUS报告基因的下游。


3.如权利要求1或2所述的一种重组质粒，其特征在于，所述第一酶切位点位于编码启动子的基因的下游且位于GUS报告基因的上游；所述第二酶切位点位于GUS报告基因的下游且位于目的基因的上游。


4.如权利要求1-3任一所述的一种重组质粒，其特征在于，所述抗性基因位于编码启动子的基因的上游且所述抗性基因的编码顺序与编码启动子的基因的编码顺序相反。


5.如权利要求1-4任一所述的一种重组质粒，其特征在于，所述目的基因位于...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴敬，颜正飞，鲁梦唯，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32