同步三频超声场下的酶膜耦合制备玉米肽的方法技术

本发明专利技术公开了同步三频超声场下的酶膜耦合制备玉米肽的方法，属于功能肽加工技术领域。首先从玉米黄粉中提取玉米蛋白，然后制备固定化碱性蛋白酶，在20/28/40kH、功率150W/L、占空比66.7％的同步三频超声场下，以及加酶量6320U/g、pH 8.5、温度40℃、出肽流速7mL/min、超声时间30min的条件下酶解130min，同时在线实时收集3kDa超滤膜分离的透过液，然后冷冻干燥获得玉米肽。本发明专利技术通过同步三频超声场下的酶解‑在线膜分离耦合技术使得蛋白质转化率提高了10.7％，多肽浓度提高了9.6％，ACE抑制率提高了11.2％，大大提高了玉米肽的ACE抑制活性和产量。

Preparation of corn peptide by enzyme membrane coupling in three frequency ultrasonic field

【技术实现步骤摘要】
同步三频超声场下的酶膜耦合制备玉米肽的方法
本专利技术涉及生物活性肽加工
，特指一种以玉米黄粉为原料、在同步三频超声场下采用酶膜耦合联合制备玉米ACE抑制肽的方法。
技术介绍
玉米黄粉作为食品工业生产淀粉或酿酒工业提纯后的副产物，通常是在简单加工的基础上作为动物饲料使用，并没有被充分的开发利用，而玉米黄粉具有价格低廉、蛋白质含量高、富含疏水性氨基酸等优点，是制备多肽的优良原料来源。因此，研究玉米黄粉酶解制备多肽的方法，更新酶解技术手段，不仅在提高玉米黄粉资源的附加值方面有重要作用，在提高多肽生产效能与价值方面也有重要意义。ACE抑制肽通过与ACE两个活动功能区竞争性结合来抑制ACE活性，从而阻碍血管紧张素I转化为血管紧张素II过程，减少血管紧张素II的生成，最终起到降压效果。相比于降血压药物，天然来源的ACE抑制肽由于本身所具有的安全性高、易吸收、毒副作用小且可长期使用等独特优势而备受关注，目前制备ACE抑制肽的最主要的方式是采用酶法降解，而改进ACE抑制肽的酶解制备方法、提高酶解产物肽的ACE抑制率具有很高的研究价值。传本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.同步三频超声场下的酶膜耦合制备玉米肽的方法，其特征在于按照下述步骤进行：/n(1)玉米蛋白的提取：将玉米黄粉与蒸馏水以1:7.5(mg/mL)的比例混匀，在50℃水浴中搅拌溶解4.5h，过程中维持pH值为8.5，再于4500rpm下离心15min，上清液经过抽滤后再过30kDa超滤膜，稀释至3.1mg/mL，得到玉米蛋白提取液；/n(2)固定化酶的制备：先配制3％的CaCl

【技术特征摘要】
1.同步三频超声场下的酶膜耦合制备玉米肽的方法，其特征在于按照下述步骤进行：
(1)玉米蛋白的提取：将玉米黄粉与蒸馏水以1:7.5(mg/mL)的比例混匀，在50℃水浴中搅拌溶解4.5h，过程中维持pH值为8.5，再于4500rpm下离心15min，上清液经过抽滤后再过30kDa超滤膜，稀释至3.1mg/mL，得到玉米蛋白提取液；
(2)固定化酶的制备：先配制3％的CaCl2溶液在4℃下冷却2h；再配制3％海藻酸钠溶液，煮沸50min，补水至原重量，放冷至室温；将碱性蛋白酶(酶活2.3×105U/mL)以1:8的比例稀释于pH9.5的硼酸缓冲液中；取5mL稀释后的酶液加入配制的海藻酸钠溶液中室温放置1h，然后再逐滴滴入CaCl2溶液中，于4℃硬化2h，其中海藻酸钠溶液和CaCl2溶液的体积比为1:16.7；制成的固体圆球颗粒，再用自来水清洗后抽滤1h，最后在滤纸上晾50min，收集备用；
(3)玉米肽的制备：将步骤(1)制得的蛋白提取液置于酶膜耦合反应器中，在20/28/40kHz的同步三频超声场下，以一定酶底比(加酶量)加入步骤(2)制备的固定化碱性蛋白酶，进行固定化酶解-在线3k...

【专利技术属性】
技术研发人员：曲文娟，冯依婷，宋雅婷，再米热·沙塔尔，居静，熊婷，马海乐，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32