【技术实现步骤摘要】
免疫印迹一步法
本专利技术属于生物检测
，具体涉及一种免疫印迹一步法。
技术介绍
免疫印迹试验即WesternBlot，它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织蛋白样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。WesternBlot常规实验流程为：制胶→电泳→转膜→封闭→一抗→二抗→曝光，实验周期长，整个流程花费的时间在2天左右，实验流程复杂，且需要多步条件优化。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术通过筛选合适条件的一抗和二抗，将一抗和二抗混合一起孵育，在保证实验灵敏度的情况下，缩短了WesternBlot的实验周期，提高检测效率。为实现上述目的，本专利技术所提供的免疫印迹一步法，采用的试剂包括二抗和良级一抗，步骤为：a)样品依次进行电泳、转膜；b)转膜后，将印迹膜与二抗和良级一抗同时孵育，直至达到后续显色标准；c)随后洗膜进行显色；
【技术保护点】
1.一种免疫印迹一步法，它采用的试剂包括二抗和良级一抗，其特征在于，步骤为：/na)样品依次进行电泳、转膜；/nb)转膜后，将印迹膜与二抗和良级一抗同时孵育，直至达到后续显色标准；/nc)随后洗膜进行显色；/n其中，所述二抗为与良级一抗能匹配使用的二抗；/n所述良级一抗为通过抗体分级方法检测的一抗；所述抗体分级检测方法为:采样三个或以上不同生物类别来源的样本，经常规免疫印迹实验检测后，进行曝光，所产生条带结果满足条件的为良级一抗，所述条件为：/n1)至少3个泳道有单一目的条带，有目的条带的泳道无杂带，其余泳道无带；/n或2)至少3个泳道有单一目的条带且有目的条带的泳道有杂带...
【技术特征摘要】
1.一种免疫印迹一步法，它采用的试剂包括二抗和良级一抗，其特征在于，步骤为：
a)样品依次进行电泳、转膜；
b)转膜后，将印迹膜与二抗和良级一抗同时孵育，直至达到后续显色标准；
c)随后洗膜进行显色；
其中，所述二抗为与良级一抗能匹配使用的二抗；
所述良级一抗为通过抗体分级方法检测的一抗；所述抗体分级检测方法为:采样三个或以上不同生物类别来源的样本，经常规免疫印迹实验检测后，进行曝光，所产生条带结果满足条件的为良级一抗，所述条件为：
1)至少3个泳道有单一目的条带，有目的条带的泳道无杂带，其余泳道无带；
或2)至少3个泳道有单一目的条带且有目的条带的泳道有杂带，杂带位于与目的条带间隔2个marker以上的位置；
所述条带为经图像识别软件分析，灰度值180以上的条带。
2.根据权利要求1所述的免疫印迹一步法，其特征在于：所述抗体分级检...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄长青，程瑶，雷雅君，赵骞，
申请(专利权)人：武汉爱博泰克生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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