用于检测三磷酸腺苷的检测试剂及其制备方法、利用其检测三磷酸腺苷的方法和装置制造方法及图纸

本发明专利技术提供了用于检测三磷酸腺苷含量的检测试剂及其制备方法、利用其检测三磷酸腺苷含量的方法和装置。该检测试剂包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂包括：ZIF‑90晶粒；和漆酶，所述漆酶内嵌于所述ZIF‑90晶粒的晶体结构中，所述第二试剂包括多巴胺。该检测试剂制备工艺简单、原料易得、成本较低，易于工业化生产，利用该检测试剂检测三磷酸腺苷含量时，具有特别突出的抗干扰能力，线性范围宽，可完全覆盖三磷酸腺苷的生理浓度范围，检出限低、灵敏度高，稳定性强、重现性好，可实现快速、实时、连续对待测样品中的三磷酸腺苷进行检测，且特别适合用于活体脑神经生理过程中三磷酸腺苷的检测。

Detection reagent and preparation method for adenosine triphosphate detection, method and device for adenosine triphosphate detection

【技术实现步骤摘要】
用于检测三磷酸腺苷的检测试剂及其制备方法、利用其检测三磷酸腺苷的方法和装置
本专利技术涉及分析化学
，具体地，涉及用于检测三磷酸腺苷的检测试剂及其制备方法、利用其检测三磷酸腺苷的方法和装置。
技术介绍
目前，三磷酸腺苷是生物体内不可缺少的生物分子之一。它作为生物物质化学能的主要来源及其在细胞过程中的作用已被广泛认识，在调节许多细胞功能和过程中起着至关重要的作用，包括充当能量提供者、催化各种酶，维持细胞呼吸的细胞外信号转导介质等。此外，在大脑环境中，三磷酸腺苷的释放是中枢化学感觉传导的关键步骤。然而，在相关技术中，检测三磷酸腺苷含量的方法的抗干扰能力较差，且灵敏度低；同时，无法实现快速、实时、连续地检测三磷酸腺苷。因而，现有的检测三磷酸腺苷含量的方法仍有待改进。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提出一种制备工艺简单、原料易得、成本较低、易于工业化生产、利用其检测三磷酸腺苷含量时具有特别突出的抗干扰能力、线性范围宽、可完全覆盖三磷酸腺苷的生理浓度范围、检出限低、灵敏度高、稳定性强、重现性好、可实现快速、实时、连续对待测样品中的三磷酸腺苷进行检测或者特别适合用于活体脑神经生理过程中三磷酸腺苷的检测试剂。在本专利技术的一些实施例中，本专利技术提供了一种用于检测三磷酸腺苷含量的检测试剂。根据本专利技术的实施例，该检测试剂包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂包括：ZIF-90晶粒；和漆酶，所述漆酶内嵌于所述ZIF-90晶粒的晶体结构中，所述第二试剂包括多巴胺。专利技术人发现，该检测试剂制备工艺简单、原料易得、成本较低，易于工业化生产，利用该检测试剂检测三磷酸腺苷含量时，具有特别突出的抗干扰能力，线性范围宽，可完全覆盖三磷酸腺苷的生理浓度范围，检出限低、灵敏度高，稳定性强、重现性好，可实现快速、实时、连续对待测样品中的三磷酸腺苷进行检测，且特别适合用于活体脑神经生理过程中三磷酸腺苷的检测。根据本专利技术的实施例，所述第一试剂的粒径为1μm～2μm。根据本专利技术的实施例，所述第一试剂包括：1重量份的所述ZIF-90晶粒；和0重量份～4重量份的所述漆酶，且所述漆酶的重量份不为0。在本专利技术的另一个方面，本专利技术提供了一种制备前面所述的检测试剂的方法。根据本专利技术的实施例，该方法包括制备所述第一试剂的步骤；和制备所述第二试剂的步骤，其中，制备所述第一试剂的步骤包括：将咪唑-2-甲醛和所述漆酶混合，得到第一混合物；将锌源和所述第一混合物混合，得到第二混合物；将所述第二混合物进行搅拌处理，以便得到所述第一试剂。专利技术人发现，该方法操作简单、方便，容易实现，易于工业化生产，且可以有效制备得到前面所述的检测试剂。根据本专利技术的实施例，所述搅拌处理的转速为200r/min～800r/min。根据本专利技术的实施例，所述锌源包括硫酸锌、硝酸锌、氯化锌、乙酸锌、二水合乙酸锌、磷酸锌或者草酸锌中的至少一种。根据本专利技术的实施例，所述锌源为二水合乙酸锌。在本专利技术的又一个方面，本专利技术提供了一种使用前面所述的检测试剂检测待测样品中三磷酸腺苷含量的方法。根据本专利技术的实施例，所述待测样品为液体样品，所述方法包括：将所述第一试剂与待测样品混合，得到第一预制液；将所述第一预制液与所述第二试剂混合，得到第二预制液；对所述第二预制液施加预定电位，使所述第二预制液中的有效组分发生还原反应，得到还原电流值，其中，所述预定电位为-0.1V～-0.6V；根据所述还原电流值，确定所述待测样品中三磷酸腺苷的含量。专利技术人发现，该方法具有特别突出的抗干扰能力，线性范围宽，可完全覆盖三磷酸腺苷的生理浓度范围，检出限低、灵敏度高，稳定性强、重现性好，可实现快速、实时、连续对待测样品中的三磷酸腺苷进行检测，且特别适合用于活体脑神经生理过程中三磷酸腺苷的检测。根据本专利技术的实施例，所述预定电位为-0.3V。根据本专利技术的实施例，所述方法包括：将所述第一试剂和待测样品同步通入第一反应器中，得到第一预制液；将位于所述第一反应器中的所述第一预制液和所述第二试剂同步通入与所述液体输送管相连通的第二反应器中，得到位于所述第二反应器中的所述第二预制液；使所述第二预制液流入薄层流动电解池中，并对所述第二预制液施加所述预定电位，以使所述第二预制液中的所述有效组分发生还原反应，得到所述还原电流值；根据所述还原电流值，确定所述待测样品中三磷酸腺苷的含量。根据本专利技术的实施例，根据所述还原电流值，确定所述待测样品中三磷酸腺苷的含量的步骤进一步包括：将所述还原电流值代入标准曲线方程，计算得到所述待测样品中所述三磷酸腺苷的含量。根据本专利技术的实施例，所述方法包括：将所述第一试剂和空白对照液连续同步通入所述第一反应器中，并将得到的第一混合溶液与所述第二试剂连续同步通入与所述第一反应器相连通的第二反应器中，使得到的第二混合溶液流入所述薄层流动电解池中，并对所述第二混合溶液施加所述预定电位，以得到背景电流值I0；配制一系列不同浓度的三磷酸腺苷标准溶液，并分别将一系列不同浓度的所述三磷酸腺苷标准溶液和所述第一试剂同步通入所述第一反应器中，得到一系列所述第一预制液，分别将位于所述第一反应器中的所述一系列第一预制液和所述第二试剂同步通入所述第二反应器中，得到位于所述第二反应器中的一系列第二预制液，分别使所述第二预制液流入薄层流动电解池中，并分别对一系列所述第二预制液施加所述预定电位，以使一系列所述第二预制液中的所述有效组分发生还原反应，得到一系列所述还原电流值，记为I1，I2，······，In-1，In，并分别计算所述I1，I2，······，In-1，In与所述背景电流值I0之差，得到多组标准电流差值I1-I0，I2-I0，······，In-1-I0，In-I0，其中，n为所述一系列不同浓度的三磷酸腺苷标准溶液的数量；根据所述多组标准电流差值I1-I0，I2-I0，······，In-1-I0，In-I0的值和一系列不同浓度的所述三磷酸腺苷标准溶液的摩尔浓度C的值，确定标准曲线方程；将所述第一试剂和待测样品同步通入所述第一反应器中，得到所述第一预制液；将位于所述第一反应器中的第一预制液和所述第二试剂同步通入所述第二反应器中，得到位于所述第二反应器中的第二预制液；对所述第二预制液施加预定电位，使所述第二预制液中的有效组分发生还原反应，得到还原电流值，记为Ix，计算所述Ix与所述背景电流值I0之差，得到所述待测样电流差值Ix-I0；将所述待测样电流差值Ix-I0代入所述标准曲线方程，计算得到所述待测样品中三磷酸腺苷的含量。根据本专利技术的实施例，所述空白对照液包括人工脑脊液。根据本专利技术的实施例，所述方法满足以下条件的至少之一：所述标准曲线方程为In-I0＝0.012×C+0.961；线性相关系数R2不小于0.992；线性范围为2nmol/L～1000nmol/L；检出限不高于0.12nmol/L。在本专利技术的再一个方面，本专利技术提供了一种用于实施前面所述方法的装置。专利技术人发现，该装置结构本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测三磷酸腺苷含量的检测试剂，其特征在于，包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂包括：/nZIF-90晶粒；和/n漆酶，所述漆酶内嵌于所述ZIF-90晶粒的晶体结构中，/n所述第二试剂包括多巴胺。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测三磷酸腺苷含量的检测试剂，其特征在于，包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂包括：
ZIF-90晶粒；和
漆酶，所述漆酶内嵌于所述ZIF-90晶粒的晶体结构中，
所述第二试剂包括多巴胺。


2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述第一试剂的粒径为1μm～2μm。


3.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述第一试剂包括：
1重量份的所述ZIF-90晶粒；和
0重量份～4重量份的所述漆酶，且所述漆酶的重量份不为0。


4.一种制备权利要求1～3中任一项所述的检测试剂的方法，其特征在于，包括制备所述第一试剂的步骤；和制备所述第二试剂的步骤，
其中，制备所述第一试剂的步骤包括：
将咪唑-2-甲醛和所述漆酶混合，得到第一混合物；
将锌源和所述第一混合物混合，得到第二混合物；
将所述第二混合物进行搅拌处理，以便得到所述第一试剂。


5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述搅拌处理的转速为200r/min～800r/min，
任选地，所述锌源包括硫酸锌、硝酸锌、氯化锌、乙酸锌、二水合乙酸锌、磷酸锌或者草酸锌中的至少一种，优选为二水合乙酸锌。


6.一种使用权利要求1～3中任一项所述的检测试剂检测待测样品中三磷酸腺苷含量的方法，其特征在于，所述待测样品为液体样品，所述方法包括：
将所述第一试剂与待测样品混合，得到第一预制液；
将所述第一预制液与所述第二试剂混合，得到第二预制液；
对所述第二预制液施加预定电位，使所述第二预制液中的有效组分发生还原反应，得到还原电流值，其中，所述预定电位为-0.1V～-0.6V，优选为-0.3V；
根据所述还原电流值，确定所述待测样品中三磷酸腺苷的含量。


7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，包括：
将所述第一试剂和待测样品同步通入第一反应器中，得到第一预制液；
将位于所述第一反应器中的所述第一预制液和所述第二试剂同步通入与所述液体输送管相连通的第二反应器中，得到位于所述第二反应器中的所述第二预制液；
使所述第二预制液流入薄层流动电解池中，并对所述第二预制液施加所述预定电位，以使所述第二预制液中的所述有效组分发生还原反应，得到所述还原电流值；
根据所述还原电流值，确定所述待测样品中三磷酸腺苷的含量。


8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，根据所述还原电流值，确定所述待测样品中三磷酸腺苷的含量的步骤进一步包括：
将所述还原电流值代入标准曲线方程，计算得到所述待测样品中所述三磷酸腺苷的含量。


9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，包括：
将所述第一试剂和空白对照液连续同步通入所述第一反应器中，并将得到的第一混合溶液与所述第二试...

【专利技术属性】
技术研发人员：林雨青，李凯，张望，王超，彭美红，任国圆，
申请(专利权)人：首都师范大学，
类型：发明
国别省市：北京;11