一种破伤风毒素检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种破伤风毒素检测试剂盒，所述试剂盒包括：链霉亲和素包被的酶联反应板，以生物素标记的第一抗体，以酶标记的第二抗体，显色剂；其中所述第一抗体和第二抗体分别由特异针对破伤风毒素的单克隆抗体杂交瘤细胞株产生。本发明专利技术基于甲醛灭活后的破伤风毒素即破伤风类毒素制备得到针对破伤风毒素的特异性单克隆抗体，并在特异性单克隆抗体的基础上开发了破伤风毒素的链霉亲和素‑生物素双抗夹心ELISA定量检测试剂盒，可作为破伤风毒素快速、有效的检测手段。

A tetanus toxin detection kit

【技术实现步骤摘要】
一种破伤风毒素检测试剂盒
本申请涉及生物检测
，具体涉及一种通过链霉亲和素-生物素双抗夹心ELISA实现破伤风毒素定量检测的检测试剂盒。
技术介绍
破伤风又名强直症，俗称锁口风，是破伤风梭菌感染伤口后分泌的一种神经毒素即破伤风毒素所致的一种人畜共患的致死性疾病。破伤风毒素的毒性仅次于肉毒素，可导致中毒者骨骼肌持续性或阵发性痉挛以及对外界刺激反射兴奋性增高，恐声恐光，致死率可高达20％～50％。酶联免疫吸附实验(ELISA)是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体在固相表面进行反应的技术。该技术可用于检测大分子抗原或抗体，具有特异性好、快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点，广泛应用于快速诊断检测领域，将链霉亲和素-生物素反应系统与ELISA技术相结合可进一步提高检测的灵敏度。近年来，全球政治局势仍然存在许多不稳定因素，局部地区战争、恐怖活动以及暴力骚乱频发，我国也面临着许多不稳定因素的威胁。破伤风外毒素由于其高毒性、易获得等特点极易被恐怖分子利用制造生物恐怖，是一种潜在的生物战剂。在特殊时期、复杂本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种破伤风毒素检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：/n链霉亲和素包被的酶联反应板，以生物素标记的第一抗体，以酶标记的第二抗体，显色剂；/n其中所述第一抗体和第二抗体分别由特异针对破伤风毒素的单克隆抗体杂交瘤细胞株产生，且一抗体和第二抗体的亲和力常数不低于1.7×10

【技术特征摘要】
1.一种破伤风毒素检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：
链霉亲和素包被的酶联反应板，以生物素标记的第一抗体，以酶标记的第二抗体，显色剂；
其中所述第一抗体和第二抗体分别由特异针对破伤风毒素的单克隆抗体杂交瘤细胞株产生，且一抗体和第二抗体的亲和力常数不低于1.7×10-10。


2.如权利要求1所述的破伤风毒素检测试剂盒，其特征在于，所述第一抗体和第二抗体为鼠源单克隆抗体。


3.如权利要求2所述的破伤风毒素检测试剂盒，其特征在于，所述第一抗体和第二抗体是通过包括下述步骤的方法制备得到的：
1)以破伤风类毒素蛋白(TTP)为抗原免疫第一小鼠；
2)当免疫第一小鼠的血清ELISA效价大于1∶50000时，利用杂交瘤技术制备得到分泌特异性针对破伤风毒素的单克隆抗体杂交瘤细胞株；
3)将所述单克隆抗体杂交瘤细胞株注入第二小鼠腹腔制备单抗腹水；
4)收集单抗腹水后，通过ProteinG亲和层析纯化得到单克隆抗体。


4.如权利要求3所述的破伤风毒素检测试剂盒，其特征在于，所述第一小鼠和第二小鼠均为Balb/C小鼠。


5.如权利要求1-4中任一项所述的破伤风毒...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗萍，章金勇，程平，敬海明，邹全明，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50