基于GC-MS的小鼠肠-脑轴相关组织样本中短链脂肪酸的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种小鼠肠‑脑轴相关组织中短链脂肪酸的检测方法，涉及脑组织、结肠组织、结肠内容物和粪便，包括如下步骤：将脑组织、结肠组织、结肠内容物和粪便进行预处理，得到脑组织、结肠组织、结肠内容物和粪便提取液；向脑组织、结肠组织、结肠内容物和粪便提取液中加入内标物，并加入五氟溴卞进行衍生化反应；衍生后溶液经过萃取后，利用GC‑MS对萃取液中的乙酸、丙酸和丁酸进行检测。本发明专利技术通过衍生化方法，建立了一种脑组织、结肠组织、结肠内容物和粪便中3种短链脂肪酸的检测气相色谱质谱快速测定方法。针对不同的生物样本进行预处理，并进行衍生化处理，加入内标进行校正，实现准确定量。

Detection method of short chain fatty acids in mouse gut brain axis related tissue samples based on GC-MS

【技术实现步骤摘要】
基于GC-MS的小鼠肠-脑轴相关组织样本中短链脂肪酸的检测方法
本专利技术涉及分析化学
，具体而言，涉及一种基于GS-MS的小鼠肠-脑轴相关组织样本中短链脂肪酸的检测方法，主要涉及脑组织、结肠组织、结肠内容物和粪便。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。短链脂肪酸(Shortchainfattyacids)是膳食纤维在大肠部位被消化分解后产生的主要代谢产物，主要包括乙酸、丙酸和丁酸。SCFAs在盲肠和近端结肠中的浓度最高，是结肠细胞的主要能量来源。此外，SCFAs可通过免疫、内分泌、神经和体液途径在肠-脑轴相互作用中发挥重要作用。研究证明，SCFAs可以越过血脑屏障，作为肠-脑轴的信号分子，为神经细胞直接供能。所以，确定SCFAs对肠-脑轴互作途径的影响对很多疾病的研究至关重要。专利技术人发现，目前对于脑组织和结肠组织中短链脂肪酸的定量检测方法还未见报道，目前针对结肠内容物及粪便中短链脂肪本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于GC-MS的小鼠肠-脑轴相关组织样本中短链脂肪酸的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：/n向采集的脑组织、结肠组织、结肠内容物和粪便中加入预冷的超纯水，低温下研磨均匀，然后经涡旋、超声提取、离心，取上清液即得提取液；/n向各个提取液中加入内标物2-乙基丁酸，并进行衍生化反应；/n衍生后溶液分别经过萃取后，利用GC-MS对各个萃取液中的乙酸、丙酸和丁酸进行检测。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于GC-MS的小鼠肠-脑轴相关组织样本中短链脂肪酸的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
向采集的脑组织、结肠组织、结肠内容物和粪便中加入预冷的超纯水，低温下研磨均匀，然后经涡旋、超声提取、离心，取上清液即得提取液；
向各个提取液中加入内标物2-乙基丁酸，并进行衍生化反应；
衍生后溶液分别经过萃取后，利用GC-MS对各个萃取液中的乙酸、丙酸和丁酸进行检测。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：脑组织、结肠组织、结肠内容物和粪便样品与超纯水的质量比为1:4-5；
进一步的，低温研磨的温度为3-5℃，优选为4℃。


3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：低温研磨时，脑组织的研磨时间为55-65s；结肠组织的研磨时间为120～180s；结肠内容物的研磨时间为30～60s；粪便的研磨时间为55-65s；
进一步的，涡旋的工艺条件为：转速为2500rpm，时间设定为1min；
超声提取的工艺条件为：设定超声提取时间为10-20min,温度设定为3-5℃。


4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：向各个提取液中加入五氟溴卞进行衍生化反应。

【专利技术属性】
技术研发人员：宋月，曲新艳，王泉博，
申请(专利权)人：山东省分析测试中心，
类型：发明
国别省市：山东;37