肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用制造技术

本申请提供了一种肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用中，通过对健康儿童和性早熟儿童进行肠道微生物菌群检测，将肠道菌群的丰富度变化和菌群的代谢研究相结合，从而分析菌群组成变动时相应产生的代谢产物的变化，发现性早熟儿童肠道菌群乳杆菌属、链球菌属、奈瑟氏菌属及巴斯德氏菌属的相对丰度下降，拟杆菌属、肠杆菌属及假单胞菌属的相对丰度上升，因此，将检测与研究结果相比较，来评估儿童肠道菌群微生物的水平变化；另外本申请中还提供了一种益生菌制剂，所述益生菌制剂的制备原料包括：混合乳杆菌、链球菌、葡萄糖、低聚葡萄糖、低聚果糖及脱脂牛奶，本申请提供的益生菌制剂可以辅助恢复性早熟患者的肠道菌群稳态。

The application of intestinal microflora in the evaluation of precocious puberty in children

【技术实现步骤摘要】
肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用
本申请涉及生物医学
，尤其涉及一种肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用。
技术介绍
近年来，随着我国居民生活水平的提高，饮食结构的改变和环境等因素，越来越多的儿童出现与真实年龄不符的第二性征，性早熟成为儿童最常见的内分泌疾病之一，并且发病频率有逐年升高的趋势，已经在全球范围内引起儿科专家的重视。目前我国普遍认为，女孩在8岁前、男孩在9岁前表现出第二性征的发育即可定义为性早熟，以女孩居多。根据中国健康促进与教育协会2018年公布的调查数据显示，我国儿童性早熟患病率为0.43％，全国约有53万名患儿，性早熟已经成为仅次于肥胖的第二大儿童内分泌疾病。中枢性性早熟是下丘脑-垂体-性腺轴功能提前启动，造成第二性征提早发育，占性早熟病例的80％左右。大脑与胃肠道之间可以相互影响，相互作用，近些年研究发现，肠道通透性发生改变后，肠道微生物或代谢产物可进入血液，从而影响神经系统和宿主的健康，大脑和肠道双向的互动反应通过迷走神经相互联系，肠道菌群可以通过脑-肠轴影响神经系统的功能，脑-肠轴功能的变化也会改变肠道菌群结构，进而形成了细菌-脑-肠轴这一新的概念体系。人体肠道中的微生物群落与宿主之间的关系极为密切，肠道菌群失调与多种临床疾病密切相关；肠道菌群在儿童性早熟过程中的作用并不明确，寻找可用来进行儿童性早熟评估的微生物标志物对探究肠道菌群在儿童性早熟过程中的作用机制具有重要的意义；且目前评估儿童性早熟的发生，除了出现肉眼可见的第二性征之外，还需要抽取静脉血进行性激素指标的检测，儿童对抽血时的刺痛感十分恐惧并反感，配合度较低。
技术实现思路
本申请提供了一种肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用，以寻找可以用来评估儿童性早熟状况的微生物标志物。为了解决上述技术问题，本申请实施例公开了如下技术方案：本申请提供了一种肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用，所述微生物包括特征菌属，用于评估儿童性早熟，其中：所述特征菌属包括：乳杆菌属、链球菌属、奈瑟氏菌属及巴斯德氏菌属。可选的，所述特征菌属还包括：拟杆菌属、肠杆菌属及假单胞菌属。可选的，所述乳杆菌属、链球菌属、奈瑟氏菌属及巴斯德氏菌属的相对丰度下降。可选的，所述拟杆菌属、肠杆菌属及假单胞菌属的相对丰度上升。可选的，所述应用还包括益生菌制剂：所述益生菌制剂的制备原料按照质量分数包括：混合乳杆菌35％-45％、链球菌30％-40％、葡萄糖5％-10％、低聚葡萄糖1％-5％、低聚果糖1％-5％及脱脂牛奶0.1％-1％。可选的，所述混合乳杆菌包括嗜酸乳杆菌、发酵乳杆菌及瑞士乳杆菌，其中：所述嗜酸乳杆菌、发酵乳杆菌及瑞士乳杆菌的质量份数比例为1：1：1。可选的，所述链球菌为嗜热链球菌。可选的，所述益生菌制剂的制备方法包括：将所述混合乳杆菌、链球菌、葡萄糖、低聚葡萄糖及低聚果糖混合成混合液；将所述混合液经离心、弃去上清液后得到浓缩菌液；向所述浓缩菌液中加入脱脂牛奶后梯度降温得到预冷菌液；将所述预冷菌液真空冷冻干燥得到益生菌制剂。本申请提供了一种肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用中，通过对健康儿童和性早熟儿童进行肠道微生物菌群检测，将肠道菌群的丰富度变化和菌群的代谢研究相结合，从而分析菌群组成变动时相应产生的代谢产物的变化，发现乳杆菌属、链球菌属、奈瑟氏菌属及巴斯德氏菌属的相对丰度下降，拟杆菌属、肠杆菌属及假单胞菌属的相对丰度上升，因此，将检测与研究结果相比较，来评估儿童肠道菌群微生物的水平变化，根据肠道菌群微生物的水平变化来判断是否存在性早熟的风险；另外本申请中还提供了一种益生菌制剂，所述益生菌制剂的制备原料按照质量分数包括：混合乳杆菌35％-45％、链球菌30％-40％、葡萄糖5％-10％、低聚葡萄糖1％-5％、低聚果糖1％-5％及脱脂牛奶0.1％-1％，本申请提供的益生菌制剂可以辅助恢复性早熟患者的肠道菌群稳态。应当理解的是，以上的一般描述和后文的细节描述仅是示例性和解释性的，并不能限制本申请。附图说明为了更清楚地说明本申请的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，对于本领域普通技术人员而言，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本申请实施例提供的健康儿童和性早熟儿童的肠道菌群测序结果示意图；图2为本申请实施例提供的健康儿童和性早熟儿童的肠道菌群功能分析中D-丙氨酸代谢途径差异示意图。具体实施方式为了使本
的人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本申请保护的范围。本申请提供了一种肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用中，通过将对象粪便排入一个清洁干燥的容器内，用采样勺从粪便内部挖取约500mg粪便，置于保存管中，用粪便菌群试剂盒提取微生物组总DNA，设计含有barcode序列的特异引物，PCR扩增16SrRNA的V1-V2区，建立扩增子文库，illuminaHiSeq2500测序平台进行测序；降噪优化后的数据与健康儿童肠道菌群数据进行对比，具体结果如下：本申请提供了一种肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用，所述微生物包括特征菌属，用于评估儿童性早熟，其中：所述特征菌属包括：乳杆菌属、链球菌属、奈瑟氏菌属及巴斯德氏菌属。所述特征菌属还包括：拟杆菌属、肠杆菌属及假单胞菌属。降噪优化后的数据与健康儿童肠道菌群数据进行对比，所述乳杆菌属、链球菌属、奈瑟氏菌属及巴斯德氏菌属的相对丰度下降。所述拟杆菌属、肠杆菌属及假单胞菌属的相对丰度上升。在本实施例中，相对丰度下降或上升是指丰度差异，而丰度差异是指与正常或对照用靶的体内水平相比，在性早熟儿童的患者体内得到更高或更低水平的微生物，从本申请的目的出发，本申请中选用正常儿童与性早熟儿童作对比，具体选取正常儿童与性早熟儿童中的粪便作为样本。由上述可见，乳杆菌属、链球菌属、奈瑟氏菌属及巴斯德氏菌属，拟杆菌属、肠杆菌属及假单胞菌属这几个菌属为性早熟儿童肠道菌群评估的特征菌，因此为评估体系的关键。因此，可以将检测与研究结果相比较，来评估儿童肠道菌群微生物中上述特征菌的水平变化，根据肠道菌群微生物的水平变化来判断是否存在性早熟的风险。本申请发现了特征菌群在性早熟儿童中的水平变化，通过检测特征菌群的变化，可以实现性早熟儿童的评估，使用本专利技术的特征微生物作为标志物进行诊断，特异性高、敏感性强。由上述技术方案可见，本申请通过分析确定与性早熟疾病相关的关键菌群和具有显著差异的标志物分子，根据测序结果分析，确定性早熟疾病患者肠道微生本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用，其特征在于，所述微生物包括特征菌属，用于评估儿童性早熟，其中：/n所述特征菌属包括：乳杆菌属、链球菌属、奈瑟氏菌属及巴斯德氏菌属。/n

【技术特征摘要】
1.一种肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用，其特征在于，所述微生物包括特征菌属，用于评估儿童性早熟，其中：
所述特征菌属包括：乳杆菌属、链球菌属、奈瑟氏菌属及巴斯德氏菌属。


2.根据权利要求1所述的肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用，其特征在于，所述特征菌属还包括：拟杆菌属、肠杆菌属及假单胞菌属。


3.根据权利要求1所述的肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用，其特征在于，所述乳杆菌属、链球菌属、奈瑟氏菌属及巴斯德氏菌属的相对丰度下降。


4.根据权利要求2所述的肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用，其特征在于，所述拟杆菌属、肠杆菌属及假单胞菌属的相对丰度上升。


5.根据权利要求1所述的肠道菌群微生物在儿童性早熟评估中的应用，其特征在于，所述应用还包括益生菌制剂：
所述益生菌制剂的制备原料按照质量分数包括：
混合乳杆菌35...

【专利技术属性】
技术研发人员：盖中涛，葛永胜，赵璐，刘毅，
申请(专利权)人：济南市儿童医院，
类型：发明
国别省市：山东;37