一种冬虫夏草人工培育方法技术

本发明专利技术具体涉及一种冬虫夏草人工培育方法，包括如下步骤：配置液体培养基、液体培养基灭菌、液体培养基接种、液体菌种培养、固体培养基选择、固体培养基制备、接菌、黑暗发菌、光照发菌、黑暗生长、烘干粉碎灭菌后封装保存。通过上述技术方案，实现人工量化种植虫草素含量高于野生的冬虫夏草，采用黄粉虫作为虫源，可大大提高冬虫夏草中虫草素的含量，通过控制虫草的发育进程，使之介于菌丝体和子实体之间，可获得高质量的冬虫夏草，经过检测，其虫草素含量可达到野生冬虫夏草的两倍。

An artificial cultivation method of Cordyceps sinensis

【技术实现步骤摘要】
一种冬虫夏草人工培育方法
本专利技术属于生物培养
，具体涉及一种冬虫夏草人工培育方法。
技术介绍
冬虫夏草是冬虫夏草菌感染并寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上长出的子座(子实体)及幼虫虫体的复合体，属于可食用的真菌，是我国一种传统的名贵滋补中药材，有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳等多种功效。蝙蝠蛾幼虫被冬虫夏草菌感染，菌丝充满整个虫体组织，结成坚硬的假菌核，在冬季低温干燥土壤内保持虫形不变达数月之久(冬虫)，待夏季温湿适宜时从菌核长出棒状子实体(子座)并露出地面(夏草)，因此得名冬虫夏草。野生的冬虫夏草仅生长在青藏高原海拔3000-5000米的高山草甸、高原草甸等高寒植被中，随着人们生活水平和生活质量的提高，对功能保健产品的需求也日趋扩大，冬虫夏草不仅是具有良好保健功能的药用真菌，而且是具有很高营养价值的高档滋补食用真菌，所以冬虫夏草具有极大的市场潜力。由于冬虫夏草生长条件十分苛刻和人类盲目的毁灭性采挖，导致野生资源濒临灭绝，使冬虫夏草的价格与日俱增，因此，推广人工培育北冬虫夏草技术应运而生。我国科研人员一直在进行利用冬虫夏草菌的无性型人工发酵菌丝和培植子实体来替代野生冬虫夏草的产业化研究，力图让昂贵的冬虫夏草能够走进寻常百姓家。目前国内许多个人和单位研究和公开冬虫夏草培养基和发酵生产方法，但是，这些技术多采用微生物发酵常用培养基，基本上以蛋、奶、马铃薯作为发酵食源，虽然都是按照微生物学的发酵原理使菌种能够生长，但食源的不同必然造成菌丝体的性质有所差异，而且培养基成本较高，所生产的冬虫夏草发酵产品在化学成分和活性物质与天然冬虫夏草有差异，因而现有技术中培育出的冬虫夏草普遍存在质量差，营养成分含量较低的问题。对于人工培育来说，养虫、培菌和育草是人工培养冬虫夏草的必要条件。如在其他地区人工培养，除了这三者外，还必须模拟适宜三者生长发育的环境条件。这在理论上是可行的，但实践中操作难度非常大。目前，仅在实验室中可以模拟高原特有的生态环境，但成本非常高，没有产业化价值。同时，大规模饲养蝙蝠蛾幼虫和培养虫草属菌的技术仍未解决。野生冬虫夏草中真菌要寄生于蝙蝠蛾幼虫，蝙蝠蛾的一个生活周期在自然状况下需4年以上，而各虫态的变化，龄期的长短，因受虫种、温度、海拔、饲料等因素的决定，所以在时间上存在一定的差异。人工培育蝙蝠蛾幼虫的生产周期长，经试验，感染成活率非常低，无法进行产业应用，因此人们尝试采用其他宿主代替蝙蝠蛾幼虫作为虫草菌的宿主。此外，由于冬虫夏草人工培育困难，野生资源有限，因此《中国药典》将冬虫夏草同属真菌蛹虫草作为冬虫夏草的替代品。蛹虫草的真菌已经可以实现人工培育，获得子实体。即使是这样，对于蛹虫草的培育也很难获得真正的产品，市面上出售的所谓蛹虫草产品多为蛹虫草的子座，属于残次品，而非真正虫草，并且其有效成分的含量远远低于真正的冬虫夏草并且在培育过程中为了防虫，需要喷洒农药，经常导致农药残留超标，人若经常服用，又对其身体又产生了新的危害。同时，经过蛋白质等简单的化学成分分析对比，人工种植冬虫夏草和野生冬虫夏草相似度达90％以上，但是从真正的免疫成分“虫草素”上来讲还是有显著差异，人工种植的冬虫夏草中虫草素的含量远达不到野生冬虫夏草中该成分的含量。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种冬虫夏草人工培育方法，以解决人工种植的冬虫夏草虫草素含量低的技术问题。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种冬虫夏草人工培育方法，包括如下步骤：(1)配置液体培养基：按比例称取葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1、黄豆粉和水，混匀，倒入量杯量取体积，然后加热煮沸，低速离心，取上清液，加水补足蒸发量，冷却至室温；(2)液体培养基灭菌：将液体培养基倒入三角瓶内，填装量为三角瓶容积的50％，装瓶后用无菌透气封口膜将瓶口封好进行灭菌，静置冷却至室温；(3)液体培养基接种：在无菌条件下将冬虫夏草菌种接种至灭菌后的液体培养基中，接种量为液体培养基填装量的5％；(4)液体菌种培养：将接种后的液体培养基室温恒温培养1周，得到液体菌种；(5)固体培养基选择：选取健康的活体黄粉虫作为宿体，用蒸馏水洗掉虫体上的灰尘和杂质；(6)固体培养基制备：将宿体虫放进烘干机进行烘干后取出，再装入事先清洗干燥并消毒过的发菌盒，装虫量为发菌盒容积的45％，然后加等量水进行灭菌；(7)接菌：在无菌条件下将步骤(4)得到的液体菌种均匀地喷洒在固体培养基的虫体上，隔绝空气密封；(8)黑暗发菌：将接菌完成的发菌盒放在条件设置好的黑暗发菌室中的培养架上，控制温度15-20度，湿度75-85％，培育发菌13-17天长满菌丝；(9)光照发菌：用日光灯模拟自然光给予光照，光照强度80-150Lx，光照时间48小时；(10)黑暗生长：将光照后的发菌盒放回暗室中15-25天，即可获得子实体；(11)烘干粉碎灭菌后封装保存。所述发菌盒为广口玻璃瓶发菌专用盒。所述固体培养基制备过程中每次烘干量为200kg，烘干程度至水份质量含量3-10％。经过严格检测和动物试验、临床实验，冬虫夏草具有下列药理或保健功能：一是具有明显的安神镇静作用。二是抗炎作用。三是耐缺氧作用。上述三种保健功能，不仅是现代科学实验的结论，也是人们使用后感觉得到的反应。因此消费者都公认虫草具有护心养脑、强肾固本、改善血液循环、抗疲提神、改善亚健康状况等作用。抗肿瘤作用是冬虫夏草新发现的功能。体外实验研究表明，不加虫草的肿瘤细胞培养至第六天，B16细胞、K526细胞、HL260细胞分别增长75、68、58倍，而虫草组在不影响造血细胞生长的情况下，培养第六天，肿瘤细胞保持在原来接种时的水平，增殖完全停止。可见，虫草确实具有阻抗肿瘤、抑制病毒作用，对晚期肝癌患者的肿瘤细胞复制、扩散犹有较好的延缓影响。与其他滋补品的“热补路线”不同，虫草具有“温补”的特性，适合于任何年龄、体质层次的人，尚未发现任何副作用。黄粉虫又叫面包虫，在昆虫分类学上隶属于鞘翅目，拟步行虫科，粉甲虫属(拟步行虫属)。原产北美洲，50年代从苏联引进我国饲养，黄粉虫干品含脂肪30％，含蛋白质高达50％以上，此外还含有磷、钾、铁、钠、铝等常量元素和多种微量元素。因干燥的黄粉虫幼虫含蛋白质40％左右、蛹含57％、成虫含60％。黄粉虫可以制成饲料，作为动物的蛋白质来源，也可以作为食物，为人类提供高蛋白。黄粉虫体型小于蝙蝠蛾幼虫，一年四季能养，能满足大批量培育。通过该项技术培育出的冬虫夏草经过检测，其虫草素含量0.6377％，高达野生冬虫夏草的两倍以上，野生冬虫夏草中虫草素的检测含量0.00054％-0.4480％，平均0.01200％。本专利技术的有益效果:本专利技术通过上述技术方案，实现人工量化种植虫草素含量高于野生的冬虫夏草，采用黄粉虫作为虫源，可大大提高冬虫夏草中虫草素的含量，通过控制虫草的发育进程，使之介于菌丝体和子实体之间，可获得高质量的冬虫夏草，经过检测，其虫草素含量可达到野生冬虫夏草的两倍。具体实施方式下本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种冬虫夏草人工培育方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)配置液体培养基：按比例称取葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1、黄豆粉和水，混匀，倒入量杯量取体积，然后加热煮沸，低速离心，取上清液，加水补足蒸发量，冷却至室温；/n(2)液体培养基灭菌：将液体培养基倒入三角瓶内，填装量为三角瓶容积的50％，装瓶后用无菌透气封口膜将瓶口封好进行灭菌，静置冷却至室温；/n(3)液体培养基接种：在无菌条件下将冬虫夏草菌种接种至灭菌后的液体培养基中，接种量为液体培养基填装量的5％；/n(4)液体菌种培养：将接种后的液体培养基室温恒温培养1周，得到液体菌种；/n(5)固体培养基选择：选取健康的活体黄粉虫作为宿体，用蒸馏水洗掉虫体上的灰尘和杂质；/n(6)固体培养基制备：将宿体虫放进烘干机进行烘干后取出，再装入事先清洗干燥并消毒过的发菌盒，装虫量为发菌盒容积的45％，然后加等量水进行灭菌；/n(7)接菌：在无菌条件下将步骤(4)得到的液体菌种均匀地喷洒在固体培养基的虫体上，隔绝空气密封；/n(8)黑暗发菌：将接菌完成的发菌盒放在条件设置好的黑暗发菌室中的培养架上，控制温度15-20度，湿度75-85％，培育发菌13-17天长满菌丝；/n(9)光照发菌：用日光灯模拟自然光给予光照，光照强度80-150Lx，光照时间48小时；/n(10)黑暗生长：将光照后的发菌盒放回暗室中15-25天，即可获得子实体；/n(11)烘干粉碎灭菌后封装保存。/n...

【技术特征摘要】
1.一种冬虫夏草人工培育方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)配置液体培养基：按比例称取葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1、黄豆粉和水，混匀，倒入量杯量取体积，然后加热煮沸，低速离心，取上清液，加水补足蒸发量，冷却至室温；
(2)液体培养基灭菌：将液体培养基倒入三角瓶内，填装量为三角瓶容积的50％，装瓶后用无菌透气封口膜将瓶口封好进行灭菌，静置冷却至室温；
(3)液体培养基接种：在无菌条件下将冬虫夏草菌种接种至灭菌后的液体培养基中，接种量为液体培养基填装量的5％；
(4)液体菌种培养：将接种后的液体培养基室温恒温培养1周，得到液体菌种；
(5)固体培养基选择：选取健康的活体黄粉虫作为宿体，用蒸馏水洗掉虫体上的灰尘和杂质；
(6)固体培养基制备：将宿体虫放进烘干机进行烘干后取出，再装入事先清洗干燥并消毒过的发菌盒，装虫量为发菌盒容积的4...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐子贤，赵炜红，
申请(专利权)人：徐子贤，赵炜红，
类型：发明
国别省市：山东;37