一种用于弓形虫感染预防的疫苗及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种用于弓形虫感染预防的疫苗及其制备方法和应用，属于属于免疫学和分子生物学技术领域。本发明专利技术根据GenBank发表的弓形虫ROP47序列设计合成引物，通过PCR扩增ROP47基因，构建重组质粒pEGFP‑C1‑ROP47(pROP47)，提取的含目的基因的重组质粒获得弓形虫ROP47 DNA疫苗，并以单磷酰脂质A(MPLA)作为佐剂，制备重组弓形虫ROP47 DNA和MPLA联合疫苗，有效提高小鼠针对弓形虫的免疫保护性反应，减少脑组织内包囊的形成，因此具有良好的实际应用之价值。

A vaccine for prevention of Toxoplasma gondii infection and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种用于弓形虫感染预防的疫苗及其制备方法和应用
本专利技术属于免疫学和分子生物学
，具体一种用于弓形虫感染预防的疫苗及其制备方法和应用。
技术介绍
本专利技术
技术介绍
中公开的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。弓形虫(T.gondii)是世界上一种流行的寄生虫病，是一种细胞内寄生虫。刚地弓形虫在不同程度上影响了全世界三分之一的人。最近几年，使用抗弓形虫DNA疫苗的工作取得了重大进展。许多弓形虫DNA被广泛用作基因疫苗的候选基因。弓形虫的弓形虫棒状体蛋白(rhoptryprotein，ROP)基因表达重要的蛋白质，这些蛋白质在寄生虫的生命周期中起决定性作用。此外，这些基因被认为是抗弓形虫DNA疫苗的杰出候选者。研究者证明了弓形虫的ROP1，ROP16，ROP18等基因可以引起小鼠体内的细胞和体液免疫反应。但是并没有达到所期望的完全保护性效果。究其原因，由于弓形虫生活史复杂，形态多样，宿主范围广泛，不同性质的抗原其免疫原也本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于弓形虫感染预防的核苷酸序列，其特征在于，其含有选自以下1)-3)中任意一种或多种的核苷酸序列：/n1)SEQ ID NO.1所示棒状体蛋白ROP47的核苷酸序列；/n2)与1)中核苷酸序列互补的核苷酸序列；/n3)对上述1)或2)所示的核苷酸序列进行一个或多个碱基的取代、缺失或添加修饰的核苷酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于弓形虫感染预防的核苷酸序列，其特征在于，其含有选自以下1)-3)中任意一种或多种的核苷酸序列：
1)SEQIDNO.1所示棒状体蛋白ROP47的核苷酸序列；
2)与1)中核苷酸序列互补的核苷酸序列；
3)对上述1)或2)所示的核苷酸序列进行一个或多个碱基的取代、缺失或添加修饰的核苷酸序列。


2.一种载体，其特征在于，所述载体包含权利要求1所述核苷酸序列。


3.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒为ROP47基因插入真核表达载体pEGFP-C1中获得；优选的，所述重组质粒为ROP47基因插入真核表达载体pEGFP-C1中KpnI和BamHI位点间构建获得。


4.一种蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列由权利要求3所述重组质粒编码获得。


5.一种疫苗，其特征在于，所述疫苗包含权利要求1所述核苷酸序列、权利要求2所述载体和/或权利要求3所述重组质粒，还包括药学上可接受的载体。


6.如权利要求5所述的疫苗，其特征在于，所述药学上可接受的载体为佐剂；优选的，所述佐剂为TLR激动剂；进一步优选为单磷酰脂质A。


7.权利要求5或6所述疫苗的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
构建重组弓形虫ROP4...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕刚，赵英会，李巧玲，高云云，
申请(专利权)人：山东第一医科大学山东省医学科学院，
类型：发明
国别省市：山东;37