一种用于甘油醛-3-磷酸脱氢酶检测的化学发光酶联免疫试剂盒制造技术

本公开涉及一种用于甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶检测的化学发光酶联免疫试剂盒，包括：包被有甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶单克隆抗体的化学发光酶标板、甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶标准品、碱性磷酸酯酶标记的甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶单克隆抗体、样品稀释液、抗体稀释液、化学发光液和洗涤液。本公开采用化学发光酶联免疫试剂盒对甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶进行检测，操作简单、样品用量少、用时短、灵敏度高、准确性和重复性好。与传统的ELISA法比较，操作时间大幅度减少。

A chemiluminescent enzyme-linked immunosorbent kit for the detection of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase

【技术实现步骤摘要】
一种用于甘油醛-3-磷酸脱氢酶检测的化学发光酶联免疫试剂盒
本公开涉及临床诊断
，具体地说，本专利技术涉及一种用于甘油醛-3-磷酸脱氢酶检测的化学发光酶联免疫试剂盒。
技术介绍
这里的陈述仅提供与本公开有关的背景信息，而不必然构成现有技术。恶性肿瘤是全球性的常见病及多发病，是危害人们健康的重大疾病之一。我国2015年约有429.2万例新增癌症病例，平均每天新增1.2万例；同时约有281.4万人死于癌症，平均每天死亡例数达7500例。其中肺和支气管癌、胃癌、肝癌、食道癌和结直肠癌占所有癌症死亡情况的四分之三(CACancerJClin.2016；66:115-132)。我国恶性肿瘤发病率近年来呈持续高发趋势，已成为国内居民的首要死因。甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde3-phosphatedehydrogenase，GAPDH)是糖酵解过程中重要的酶。分子量37kDa，催化3-磷酸甘油醛(glyceraldehyde3-phosphate)到1，3-二磷酸甘油酸的反应(D-glycerate1,3-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于甘油醛-3-磷酸脱氢酶检测的化学发光酶联免疫试剂盒，其特征是，该试剂盒包括：/n包被有甘油醛-3-磷酸脱氢酶单克隆抗体的化学发光酶标板、甘油醛-3-磷酸脱氢酶标准品、碱性磷酸酯酶标记的甘油醛-3-磷酸脱氢酶单克隆抗体、样品稀释液、抗体稀释液、化学发光液和洗涤液；其中，所述化学发光液为3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷二钠盐0.02～0.04M、4-碘苯酚0.001～0.002M、4-4-甲氧基苯酚0.001～0.002M pH＝8.0～8.6的氨-氯化铵溶液。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于甘油醛-3-磷酸脱氢酶检测的化学发光酶联免疫试剂盒，其特征是，该试剂盒包括：
包被有甘油醛-3-磷酸脱氢酶单克隆抗体的化学发光酶标板、甘油醛-3-磷酸脱氢酶标准品、碱性磷酸酯酶标记的甘油醛-3-磷酸脱氢酶单克隆抗体、样品稀释液、抗体稀释液、化学发光液和洗涤液；其中，所述化学发光液为3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷二钠盐0.02～0.04M、4-碘苯酚0.001～0.002M、4-4-甲氧基苯酚0.001～0.002MpH＝8.0～8.6的氨-氯化铵溶液。


2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征是：所述化学发光酶标板的微孔的抗体包被浓度为2.5～5μg/mL。


3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征是：所述甘油醛-3-磷酸脱氢酶标准品的浓度分别为0ng/mL、0.625ng/mL、1.25ng/mL、2.5ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、40ng/mL。


4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征是：所述样品稀释液为磷酸盐缓冲液，pH＝7.4，磷酸盐缓冲液是每升含有8gNaCl，0.2gKCl，0.27gKH2PO4，1.42gNa2HPO4的水溶液。


5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征是：所述抗体稀释液为含有BSA的磷酸盐缓冲液，pH＝7.4，每升含有20gBSA，10gNaCl，0.5gKCl，0.27gKH2PO4，1.42gNa2HPO4的水溶液。


6.如权利要求1所述的试剂盒，其特征是：所述洗涤液是含有体积分数0.05％吐温20的pH＝7.4的磷酸盐缓冲液，磷酸盐缓冲液是每升含有8gNaCl，0.2gKCl，0.27gKH2PO4，1.42gNa2HPO4的水溶液。


7.权利要求1～6中任一项所述的用于甘油醛-3-磷酸脱氢酶检测的化学发光酶联免疫试剂盒的制备方法，其特征是，该方法包括以下步骤：
甘油醛-3-磷酸脱氢酶单克隆抗体的制备：采用基因工程技术以大肠杆菌为载体制备人重组甘油醛-3-磷酸脱氢酶，将纯化后的甘油醛-3-磷酸脱氢酶免疫小鼠，通过杂交瘤融合技术制备得到人甘油醛-3-磷酸脱氢酶单克隆抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：王泽宋，
申请(专利权)人：山东泽济生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37