一种用于DNA分离的磁珠分选液及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种用于DNA分离的磁珠分选液，以51ml体积的该磁珠分选液计，包含1ml GE磁珠、5‑10g PEG、12.5‑50mg吐温20、50‑125mmol NaCl、0.25‑1mmol Tris、0.025‑0.1mmol EDTA和0.085‑0.34mmol HCl。本发明专利技术还提供制备该磁珠分选液的制备方法。该制备方法以GE磁珠为原料，包括GE磁珠清洗步骤和GE磁珠重悬步骤，具有操作简单、稳定、耗时短、成本低的优点。制得的磁珠分选液具有纯化DNA和片段化筛选的功能，能长期保持稳定，不需要进一步化学修饰，提高DNA分离纯化效率，可以替代进口磁珠，适用于大规模建库生产。

A magnetic bead separation solution for DNA separation and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
一种用于DNA分离的磁珠分选液及其制备方法
本专利技术涉及生化检测领域，具体涉及一种用于DNA分离的磁珠分选液及其制备方法。
技术介绍
磁珠包裹有四氧化三铁(Fe3O4)磁性物质，因此具有超顺磁性，对外加磁场有较强的磁响应性。分散在溶液中的磁珠在外加磁场作用下，会被吸附到溶液容器的内壁上，而当撤去磁场后，磁珠又重新均匀分散于溶液中。基于这个性质，可以采用磁珠结合溶液中的某种成分，然后通过外加磁场吸附分离磁珠来达到分离该成分的目的。为了将磁珠用于结合DNA片段，在磁珠颗粒的表面上一般修饰有特异性的基团，如羧基、羟基等功能基团。这些功能基团能选择性地结合靶标核酸，然后通过外加磁场吸附收集磁珠，最后用无核酸酶的水(简称无酶水)或TE缓冲液洗脱实现靶标核酸的分离。用磁珠分离DNA的一般步骤是，首先将样本DNA裂解形成DNA片段，接着加入磁珠分选体系使磁珠与DNA片段结合，然后施加磁场使结合了DNA片段的磁珠分离出来，再加入洗脱液使DNA片段从磁珠上洗脱下来，最后将包含DNA片段的溶液转移到另一个容器，得到纯化的DNA片段。<br>磁珠分选体系主本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于DNA分离的磁珠分选液，其特征在于，以51ml体积的所述磁珠分选液计，包含1ml GE磁珠、5-10g PEG、12.5-50mg吐温20、50-125mmol NaCl、0.25-1mmol Tris、0.025-0.1mmol EDTA和0.085-0.34mmol HCl。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于DNA分离的磁珠分选液，其特征在于，以51ml体积的所述磁珠分选液计，包含1mlGE磁珠、5-10gPEG、12.5-50mg吐温20、50-125mmolNaCl、0.25-1mmolTris、0.025-0.1mmolEDTA和0.085-0.34mmolHCl。


2.根据权利要求1所述的磁珠分选液，其特征在于，所述PEG为PEG4000、PEG6000或PEG8000。


3.一种制备根据权利要求1或2所述的磁珠分选液的制备方法，其特征在于，所述制备方法以GE磁珠为原料，包括以下步骤：
(1)GE磁珠清洗：用磁珠清洗液清洗所述GE磁珠，其中所述磁珠清洗液包含0.05体积％的吐温20和1mMTris-HCl；
(2)GE磁珠重悬：将1ml经清洗的所述GE磁珠重悬在29.75ml预结合缓冲液中，然后加入20ml的25-50％PEG储液和0.25ml的5-20％吐温20储液，混合均匀，得到所述磁珠分选液，其中所述预结合缓冲液由25ml的2-5MNaCl储液、0.5ml的0.5-2MTris储液、0.5ml的0.05-0.2MEDTA储液、0.17ml的0.5-2NHCl储液和3.58ml的水配制而成。


4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在步骤(...

【专利技术属性】
技术研发人员：许明炎，张晓妮，沈广强，
申请(专利权)人：深圳海普洛斯医学检验实验室，深圳市海普洛斯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44