鸭坦布苏病毒胶体金快速检测试纸及其制备方法技术

一种家禽防疫用品及制作方法，即一种鸭坦布苏病毒胶体金快速检测试纸及其制备方法，所述试纸包括底板、样品垫、胶体金垫、硝酸纤维膜及吸水垫，样品垫贴在PVC底板的一端，吸水垫贴于另一端，硝酸纤维膜贴于底板中部，硝酸纤维膜一端与胶体金垫相连，另一端与吸水垫连接，胶体金垫与样品垫相连，E蛋白单克隆抗体用胶体金包被结合于胶体金垫上，鼠抗E蛋白多抗包被于硝酸纤维膜的划线处作为检测线，羊抗鼠IgG作为二抗包被于质控线的位置。有益效果是：胶体金灵敏度高，试纸特异性强，仅对坦布苏病毒显示阳性，可快速识别坦布苏病毒，可对初期症状进行鉴别，也可用于普通鸭群的筛查，可大幅缩短检测时间，使该病及早发现，将养殖户的损失降为最低。

Rapid detection of duck tambusu virus by colloidal gold and its preparation

【技术实现步骤摘要】
鸭坦布苏病毒胶体金快速检测试纸及其制备方法
本专利技术涉及一种家禽防疫用品及制作方法，即一种鸭坦布苏病毒胶体金快速检测试纸及其制备方法。
技术介绍
鸭坦布苏病毒（DTMUV）是一种鸭新型传染性病毒。2010年我国山东江浙等沿海地区首次爆发，经国家多个实验室分析后将其命名。2016年内蒙古东部地区出现类似病例，在内蒙古民族大学动科实验室进行多项试验后最终确定该病死鸭感染了鸭坦布苏病毒。鸭坦布苏病毒的主要感染症状为鸭产蛋率下降、生长迟缓及卵巢出血等。该病毒传播速度快，感染率高，严重威胁我国养鸭业，急需得到有效的防治。可是，由于缺乏快速确诊技术，该病毒的症状不易识别，难以早期控制，很容易造成蔓延。因此，找到快速识别的技术和器材，是防治该病毒的关键环节。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能够快速识别鸭坦布苏病毒的胶体金快速检测试纸及其制备方法。上述目的是由以下技术方案实现的：研制一种鸭坦布苏病毒胶体金快速检测试纸，其特点是：所述试纸包括底板、样品垫、胶体金垫、硝酸纤维膜及吸水垫，样品垫粘贴在PVC底板的一端，吸水垫粘本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鸭坦布苏病毒胶体金快速检测试纸，其特征在于：所述试纸包括底板（1）、样品垫（5）、胶体金垫（6）、硝酸纤维膜（2）及吸水垫（7），样品垫（5）粘贴在PVC底板（1）的一端，吸水垫（7）粘贴于底板（1）的另一端，硝酸纤维膜（2）粘贴于底板（1）的中部，硝酸纤维膜（2）一端与胶体金垫（6）相连，胶体金垫（6）与样品垫相连，另一端与吸水垫（7）连接，将E蛋白单克隆抗体作为金标探针用胶体金进行包被结合于胶体金垫（6）上，再将鼠抗E蛋白多抗1:1稀释包被于硝酸纤维膜（2）的划线处作为检测线（3），羊抗鼠IgG做相同处理后作为二抗包被于质控线（4）的位置。/n

【技术特征摘要】
1.一种鸭坦布苏病毒胶体金快速检测试纸，其特征在于：所述试纸包括底板（1）、样品垫（5）、胶体金垫（6）、硝酸纤维膜（2）及吸水垫（7），样品垫（5）粘贴在PVC底板（1）的一端，吸水垫（7）粘贴于底板（1）的另一端，硝酸纤维膜（2）粘贴于底板（1）的中部，硝酸纤维膜（2）一端与胶体金垫（6）相连，胶体金垫（6）与样品垫相连，另一端与吸水垫（7）连接，将E蛋白单克隆抗体作为金标探针用胶体金进行包被结合于胶体金垫（6）上，再将鼠抗E蛋白多抗1:1稀释包被于硝酸纤维膜（2）的划线处作为检测线（3），羊抗鼠IgG做相同处理后作为二抗包被于质控线（4）的位置。


2.根据权利要求1所述鸭坦布苏病毒胶体金快速检测试纸的制备方法：其特征在于：以鸭坦布苏病毒DTMUV的囊膜蛋白E蛋白为核心蛋白，设计E蛋白引物，上游引物序列F为5/-TTAGGATCCTTCAGCTGTCTGGGGATG-3/（划线处为BamHⅠ酶切位点），下游引物序列R为5/-TGAGAGCTCGGCATTGACATTTACTGC-3/（划线处为SacⅠ酶切位点），进行E蛋白的克隆表达：所克隆基因片段大小为1500bp，表达蛋白大小为63ku；采用尿素梯度离心法对E蛋白进行分离纯化，纯化蛋白的浓度为4.98mg/ml；用E蛋白（100ug）三次免疫BALB/c小鼠，之后用间接ELISA法筛...

【专利技术属性】
技术研发人员：王学理，张玲艳，宋丽丽，贾伟娟，
申请(专利权)人：内蒙古民族大学，
类型：发明
国别省市：内蒙;15