一种羰基还原酶突变体及其在制备(R)-4-氯-3-羟基-丁酸酯中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物制药和生物工程技术领域，具体为一种羰基还原酶突变体及其在制备(

A carbonyl reductase mutant and its application in the preparation of (R) - 4-chloro-3-hydroxy-butyrate

【技术实现步骤摘要】
一种羰基还原酶突变体及其在制备(R)-4-氯-3-羟基-丁酸酯中的应用
本专利技术属于生物制药和生物工程
，具体涉及羰基还原酶YOL151W突变体及其编码基因，涉及含有所述羰基还原酶突变体基因和葡萄糖脱氢酶基因的工程菌的制备方法，涉及该基因工程菌在不对称还原氯乙酰乙酸酯（I），制备(R)-4-氯-3-羟基-丁酸酯（II）中的应用。
技术介绍
(R)-4-氯-3-羟基-丁酸酯是一类重要的手性化合物，其结构式如下述反应式中化合物（II）所示，式中R为C1-C8烷基或环烷基，单取代或多取代芳基或芳烷基。化合物（II）被广发应用于许多有价值的药物及活性分子的合成，例如减肥营养补充品L-肉碱[中国专利CN104726507、文献沈阳化工大学学报，2017，31，311-314]。生物不对称还原氯乙酰乙酸酯（I）是制备(R)-4-氯-3-羟基-丁酸酯（II）的一条简便、高效、高选择性、绿色、经济的途径。其中，Kim和Sakai等（文献J.Microbiol.Biotechnol.,2010,20,1300-1306;Tetrahedron,2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 一种羰基还原酶突变体；其特征在于，是对如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的蛋白质进行如下突变得到：/n（a）将第85位苯丙氨酸替换为甲硫氨酸，或者/n（b）在（a）氨基酸序列的基础上且保持酶催化活力的前提下，对85位之外的一个或几个位点经过氨基酸残基替换。/n

【技术特征摘要】
1.一种羰基还原酶突变体；其特征在于，是对如SEQIDNO.2所示氨基酸序列的蛋白质进行如下突变得到：
（a）将第85位苯丙氨酸替换为甲硫氨酸，或者
（b）在（a）氨基酸序列的基础上且保持酶催化活力的前提下，对85位之外的一个或几个位点经过氨基酸残基替换。


2.根据权利要求1所述的羰基还原酶YOL151W突变体，其特征在于，所述（b）中所述位点为的第128位的苯丙氨酸、第132位的苯丙氨酸、第162位的缬氨酸，分别或共同替换为其它任意氨基酸。


3.一种分离的核酸，其特征在于，所述核酸编码如权利要求1或2中所述的任一羰基还原酶突变体。


4.一种包含如权利要求3所述的核酸的重组表达载体。


5.一种既包含如权利要求4所述的重组表达载体又包含葡萄糖脱氢酶重组表达载体的基因工程菌。


6.一种如权利要求1或2所述的羰基还原酶突变体在还原氯乙酰乙酸酯（I）生成(R)-4-氯-3-羟基-丁酸酯（II）反应中的应用，其特征在于，反应体系包括：底物氯乙酰乙酸酯（I）、酶催化剂、葡萄糖、与水不...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈芬儿，黄则度，王泽旭，刘敏杰，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海;31