一种集成式外泌体分离芯片及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种集成式外泌体分离芯片及其制备方法和应用，所述微流控芯片分三个单元，进样单元，外泌体捕获与释放单元以及外泌体富集单元。所述进样单元位于外泌体捕获单元前方，所述富集单元位于外泌体捕获与释放单元后方。本发明专利技术通过将样品进入，外泌体的捕获与释放，非外泌体物质的清洗以及外泌体的收集纯化集中到一块微流控芯片上，优化了外泌体提取流程，极大的提高了外泌体提取纯化的效率，并且简化了人为操作的程序，取得了较好的外泌体分离纯化效果。

An integrated exosomes separation chip and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种集成式外泌体分离芯片及其制备方法和应用
本专利技术涉及外泌体分离领域，尤其涉及一种集成式外泌体分离芯片。技术背景外泌体是细胞经过“内吞-融合-外排”等一系列调整过程而形成的细胞外纳米级囊泡。其在人体内分布广泛，人体的尿液、汗液、血液、乳汁等均含有外泌体。外泌体在人体内的角色主要扮演两个角色，第一种是有免疫活性的外泌体，其主要在抗原呈递和共刺激中发挥作用，具有信息传递功能。第二种为含有数量可观的RNA并介导细胞间的遗传物质交流的外泌体，具有物质传递功能。随着研究的深入，人们发现外泌体在适应性免疫、炎症过程、胚胎形成、肿瘤的发生与发展过程中均发挥了重要的作用。就肿瘤来说，一百多年前，经过解剖人们发现特定的肿瘤细胞总是倾向于转移到特定的组织器官，并由此提出了著名的“种子与土壤”转移假说，认为肿瘤细胞只能在适宜的组织器官环境中才能形成转移灶。随着技术的发展肿瘤的转移机制在不断被完善，人们发现肿瘤可以通过分泌外泌体主动改变转移灶微环境，外泌体可以通过调节免疫功能，促进肿瘤血管新生以及肿瘤转移，或者直接作用于肿瘤细胞影响肿瘤进展。因此，对外泌体进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种集成式外泌体分离芯片，其特征在于：该微流控芯片主要由顶层通道芯片、多孔滤膜和底层通道芯片构成；/n所述顶层通道芯片由三个完全一样的独立五边形腔室组成，每个顶层通道腔室包含一个出口；出口的对面设置一个入口孔；/n所述多孔滤膜通过PDMS胶水封接在上、下层通道层之间；/n所述底层通道芯片由三个与顶层通道方向相反的五边形腔室组成，每个底层通道腔室包含一个入口，每个入口通过聚四氟乙烯管与顶层通道芯片对应位置的入口孔连接；/n顶层通道芯片与底层通道芯片上下两个对应的腔室加中间的滤膜构成一个单元，依次是进样单元、外泌体捕获与释放单元以及外泌体富集单元；/n所述外泌体捕获与释放单元位于进样单元后方，...

【技术特征摘要】
1.一种集成式外泌体分离芯片，其特征在于：该微流控芯片主要由顶层通道芯片、多孔滤膜和底层通道芯片构成；
所述顶层通道芯片由三个完全一样的独立五边形腔室组成，每个顶层通道腔室包含一个出口；出口的对面设置一个入口孔；
所述多孔滤膜通过PDMS胶水封接在上、下层通道层之间；
所述底层通道芯片由三个与顶层通道方向相反的五边形腔室组成，每个底层通道腔室包含一个入口，每个入口通过聚四氟乙烯管与顶层通道芯片对应位置的入口孔连接；
顶层通道芯片与底层通道芯片上下两个对应的腔室加中间的滤膜构成一个单元，依次是进样单元、外泌体捕获与释放单元以及外泌体富集单元；
所述外泌体捕获与释放单元位于进样单元后方，所述外泌体富集单元位于外泌体捕获与释放单元后方；
所述外泌体进样单元、外泌体捕获与释放单元及外泌体富集单元之间通过聚四氟乙烯管连接上个单元出口与下个单元入口来控制单元间的通断。


2.按照权利要求1所述外泌体分离芯片，其特征在于：所述进样单元的多孔滤膜孔径为100nm-200nm，所述外泌体捕获与释放单元的多孔滤膜孔径为2μm-5μm，所述外泌体富集单元的多孔滤膜孔径为20nm-40nm。


3.按照权利要求1所述外泌体分离芯片的制备方法，其特征在于：按照以下的步骤进行制备：使用SU8胶通过软光刻技术制备上下层通道模板，使用混合好的PDMS(PDMS：引发剂＝10:1)进行倒模，使用PDMS胶水将多孔滤膜封在下层通道上，80℃烘箱使胶水固化，使用氧等离子设备将上层通道和多孔滤膜封接。


4.按照权利要求1所述外泌体分离芯片的应用，其特征在于，采用外泌体分离芯片进行样品中外泌体的分离时，按照以下步骤进行：
(1)将芯片进行疏水修饰，具体为将芯片置于真空干燥器抽十分钟左右，向...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦建华，陈雯雯，苏文涛，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁;21