一种一锅法制备用于检测β-D-葡萄糖醛酸苷酶的底物的方法技术

本发明专利技术公开了一种一锅法制备用于检测β‑D‑葡萄糖醛酸苷酶的底物的方法，具体为以式（I）结构化合物和乙酰溴‑α‑D‑葡萄糖醛酸甲酯为原料，在极性溶剂、偶联试剂存在的条件下反应8‑24h后加入碱性试剂，室温反应4‑8h后加入酸性试剂调节pH至2‑3，经后处理制所述用于检测β‑D‑葡萄糖醛酸苷酶的底物。本发明专利技术以苯酚结构上取代或未取代的酚酞以及乙酰溴‑α‑D‑葡萄糖醛酸甲酯为反应物，制备了用于检测β‑D‑葡萄糖醛酸苷酶的底物，反应步骤和操作非常简便，降低了工艺复杂性，易于扩大化生产。

A one pot method for the determination of \u03b2 - d-glucuronidase substrate

【技术实现步骤摘要】
一种一锅法制备用于检测β-D-葡萄糖醛酸苷酶的底物的方法
本专利技术属于生物检测
，涉及药物合成，具体涉及一种一锅法制备用于检测β-D-葡萄糖醛酸苷酶的底物的方法。
技术介绍
β葡萄糖醛酸苷酶是细胞溶酶体中的水解酶，广泛分布于自然界多种生物体系中，负责催化葡萄糖醛酸结合物的水解反应，在肝细胞中含量较高。人体内β-葡萄糖醛酸苷酶的表达与一些炎症及癌症的发生发展过程密切相关，因此也被认为是一种重要的肿瘤标志物。测定β葡萄糖醛酸苷酶，有助于病情观察和预后评价，它的生物技术潜力正越来越受到人们的关注。但由于其制备方法较为繁杂、现有的制备方法多存在收率低、需更换溶剂等问题，因此尚未实现大规模制备。申请号为CN201810068438.1的专利申请中公开了检测β-D-葡萄糖醛酸苷酶的底物及其制备方法和试剂盒，并具体公开了将百里酚酞与乙酰溴-α-D-葡萄糖酮酸甲基酯反应制得百里酚酞-α-乙酰基-D-葡糖醛酸甲酯，脱除乙酰基得到百里酚酞-α-D-葡糖醛酸甲酯，然后经水解反应得到百里酚酞-α-D-葡糖醛酸的方法。但上述方法在百里酚酞与乙酰溴-α-D-葡萄糖本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种一锅法制备用于检测β-D-葡萄糖醛酸苷酶的底物的方法，其特征在于，以式（I）结构化合物和乙酰溴-α-D-葡萄糖醛酸甲酯为原料，在极性溶剂、偶联试剂存在的条件下反应一段时间后加入碱性试剂，继续反应一定时间后加入酸性试剂调节pH至酸性，经后处理制得式（II）结构化合物，即所述用于检测β-D-葡萄糖醛酸苷酶的底物；/n

【技术特征摘要】
1.一种一锅法制备用于检测β-D-葡萄糖醛酸苷酶的底物的方法，其特征在于，以式（I）结构化合物和乙酰溴-α-D-葡萄糖醛酸甲酯为原料，在极性溶剂、偶联试剂存在的条件下反应一段时间后加入碱性试剂，继续反应一定时间后加入酸性试剂调节pH至酸性，经后处理制得式（II）结构化合物，即所述用于检测β-D-葡萄糖醛酸苷酶的底物；

；
式（I）、（II）中R1、R2分别独立地选自H、卤素、CN、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C2-C6烯基、卤代C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、卤代C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，具体步骤如下：
S1：将式（I）结构化合物和乙酰溴-α-D-葡萄糖醛酸甲酯加入反应瓶内，加入极性溶剂、偶联试剂，反应8-24h；
S2：搅拌条件下加入碱性试剂，控制反应温度为室温，反应4-8h后加入酸性试剂，调pH至2-3，后旋蒸掉极性溶剂并经反相纯化得到式（II）结构化合物即产物β-D-葡萄糖醛酸。


3.根据权利要求1或2任一项所述的方法，其特征在于，式（I）、（II）中R1、R2分别独立地选自H、卤素、CN、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基；优选的，R1、R2分别独立地选自H、C1-C6烷基。

【专利技术属性】
技术研发人员：鲍彦，吴义进，刘真真，王忠，
申请(专利权)人：合肥华纳生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34