血浆中乙酰螺旋霉素含量的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种血浆中乙酰螺旋霉素含量的检测方法。该方法包括以下步骤：(A)制备微生物悬液；(B)制备标准曲线：分别向微生物悬液中加入梯度浓度的乙酰螺旋霉素，培养，测定吸光度，制备得到标准曲线；(C)样品采集：采集血浆；(D)分别精密量取待测血浆样品和空白血浆样品，加入步骤(A)的微生物悬液中混匀，得待测混合溶液和空白对照；(E)测定待测混合溶液的微生物浓度；(F)将待测混合溶液的微生物浓度与空白对照进行比较，通过标准曲线计算得出乙酰螺旋霉素的浓度。本发明专利技术方法的分析时间短、灵敏度高，准确度、精密度、回收率、稳定性经考察后均符合要求，适用于乙酰螺旋霉素在体内的药代动力学试验研究。

Determination of Acetylspiramycin in plasma

【技术实现步骤摘要】
血浆中乙酰螺旋霉素含量的检测方法
本专利技术涉及抗生素类药物的血药浓度监测
，特别是涉及一种血浆中乙酰螺旋霉素含量的检测方法。
技术介绍
乙酰螺旋霉素(Acetylspiramycin)是由单乙酰螺旋霉素Ⅱ、单乙酰螺旋毒素Ⅲ、双乙酰螺旋霉素Ⅱ和双乙酰螺旋霉素Ⅲ四个组分为主的混合物，结构和成分复杂，具体结构如式1所示。纯品为白色至微黄色粉末，在甲醇、乙醇、丙酮或乙醚中溶解，在水中几乎不溶，在石油醚中不溶。对紫外线敏感，在阳光下照射1天，可分解50％。乙酰螺旋霉素对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、炭疽杆菌和梭菌属等有较强的抗菌活性，对李斯特菌属、卡他布兰汉菌、淋球菌、胎儿弯曲菌、流感杆菌、百日咳杆菌、类杆菌属、产气荚膜杆菌、痤疮丙酸杆菌、消化球菌和消化链球菌以及支原体、衣原体、梅毒螺旋体、弓形体、隐孢子虫等也有较强的作用。由于厂家生产工艺和原料的差异，不同厂家生产的乙酰螺旋霉素其组分的比例各不相同，而目前并无研究阐明各组分与其药效的具体关系，故一般的化学分析方法或高效液相色谱法等检测方法无法通过对各组分的分别定量构建本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血浆中乙酰螺旋霉素含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(A)制备微生物悬液；/n(B)制备标准曲线：分别向微生物悬液中加入梯度浓度的乙酰螺旋霉素，培养，测定吸光度，制备得到标准曲线；/n(C)样品采集：采集血浆；/n(D)分别精密量取待测血浆样品和空白血浆样品，加入步骤(A)的微生物悬液中混匀，得待测混合溶液和空白对照；/n(E)测定待测混合溶液的微生物浓度；/n(F)将待测混合溶液的微生物浓度与空白对照进行比较，通过标准曲线计算得出乙酰螺旋霉素的浓度。/n

【技术特征摘要】
1.一种血浆中乙酰螺旋霉素含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(A)制备微生物悬液；
(B)制备标准曲线：分别向微生物悬液中加入梯度浓度的乙酰螺旋霉素，培养，测定吸光度，制备得到标准曲线；
(C)样品采集：采集血浆；
(D)分别精密量取待测血浆样品和空白血浆样品，加入步骤(A)的微生物悬液中混匀，得待测混合溶液和空白对照；
(E)测定待测混合溶液的微生物浓度；
(F)将待测混合溶液的微生物浓度与空白对照进行比较，通过标准曲线计算得出乙酰螺旋霉素的浓度。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(A)中，所述微生物悬液按以下步骤制备：
A1：取微生物接种在营养琼脂斜面上；
A2：35-37℃恒温培养20小时-22小时，于2-8℃临时保存；
A3：用灭菌水或(0.9±0.1)％氯化钠溶液将微生物洗下，备用；
A4：将步骤A3得到的微生物移入经灭菌的置有营养肉汤的试管中，振摇成均匀的菌液。


3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(B)中，所述制备标准曲线包括以下步骤：
B1：称取乙酰螺旋霉素对照品，用溶剂溶解，用灭菌水稀释为特定浓度溶液；
B2：移取适量B1所得溶液，用缓冲液稀释，得不同浓度的标准系列溶液；
B3：在不同容器中精密量取微生物悬液，分别加入等体积的空白血...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙晶晶，凌珊，谢瑞，吴家欣，吴宜，
申请(专利权)人：广州医药研究总院有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44