一种快速检测马铃薯黑胫病的RPA引物、试剂盒、方法及系统技术方案

本发明专利技术公开了一种快速检测马铃薯黑胫病(Pectobacterium spp.)的RPA引物、试剂盒及快速检测方法，涉及植物病害检测领域。所述RPA引物具有如SEQ ID NO.1‑2所示的核苷酸序列，本发明专利技术利用RPA引物对提取的马铃薯黑胫病菌的DNA仅需进行20min的恒温扩增，即可对马铃薯黑胫病进行检测。本发明专利技术提供的马铃薯黑胫病RPA检测引物特异性好、灵敏度高、检测高效快捷、操作简便、不需要特殊仪器，能够对马铃薯黑胫病早期诊断提供技术依据。

RPA primer, kit, method and system for rapid detection of potato black shank

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测马铃薯黑胫病的RPA引物、试剂盒、方法及系统
本专利技术涉及农作物病害检测、鉴定及防治
，具体涉及一种马铃薯黑胫病(Pectobacteriumspp.)的RPA检测引物、试剂盒、快速检测方法及系统。
技术介绍
马铃薯是以块茎繁殖为主的无性繁殖作物，生产中常会受到病菌的侵染，带菌种薯会传染到下一代种薯，从而影响马铃薯的正常生长发育，降低马铃薯产量，尤其使其种性退化。马铃薯黑胫病是由果胶杆菌属(Pectobacteriumspp.)和狄基氏菌属(Dickeyaspp.)引起的细菌性病害，是一种土传性和贮藏性病害。马铃薯黑胫病又称黑脚病，是以马铃薯植株茎基部变黑的症状而得名的，该病在我国东北、华北、西北等马铃薯产区都有不同程度地发生。马铃薯黑胫病在马铃薯各个生长时期均可发生，包括地上茎部及地下块茎，平均发病率3％～5％，严重时可达40％～50％，甚至绝产。马铃薯黑胫病(Pectobacteriumspp.)是我国常见的细菌性病害，目前报道的果胶杆菌属(Pectobacteriumspp.)有胡萝卜软腐果胶杆菌巴西亚种(Pe本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速检测马铃薯黑胫病的RPA引物，其特征在于，其具有如SEQ ID NO.1-2所示的核苷酸序列：/nSEQ ID NO.1ACTACCTGAACCGTAACAAGACGCCAATCCACCC；/nSEQ ID NO.2CACTTTCACAGACACCACAGCAATCAGCCCTTCG。/n

【技术特征摘要】
1.一种快速检测马铃薯黑胫病的RPA引物，其特征在于，其具有如SEQIDNO.1-2所示的核苷酸序列：
SEQIDNO.1ACTACCTGAACCGTAACAAGACGCCAATCCACCC；
SEQIDNO.2CACTTTCACAGACACCACAGCAATCAGCCCTTCG。


2.一种快速检测马铃薯黑胫病试剂盒，其特征在于，其具有如权利要求1所述的RPA引物和具有重组酶聚合酶的反应液。


3.一种快速检测马铃薯黑胫病的方法，其特征在于：其利用权利要求1所述的RPA引物或权利要求2所述的试剂盒实现，包括以下步骤：
选取、培养并提取待测马铃薯病原菌DNA；
利用权利要求1所述的RPA引物对待测马铃薯病菌DNA待测进行恒温扩增，得到待测马铃薯病菌DNA的恒温扩增片段；
对待测马铃薯病菌DNA的恒温扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳检测，得到琼脂糖凝胶电泳结果；
当琼脂糖凝胶电泳结果为阳性，则判定待测马铃薯病菌为马铃薯黑胫病，反之则判定待测马铃薯病菌不是马铃薯黑胫病。


4.如权利要求3所述的快速检测马铃薯黑胫病的方法，其特征在于，所述利用权利要求1所述的RPA引物对待测马铃薯病菌DNA待测进行恒温扩增的反应体系为：总体积50μL，其中含模板DNA2μL，RehydrationBuffer29.5μL、引物F和R各2.4μL...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤浩，李华伟，邱思鑫，罗文彬，许国春，许泳清，纪荣昌，刘中华，李国良，林赵淼，张鸿，邱永祥，
申请(专利权)人：福建省农业科学院作物研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35