一种检测猪附红细胞体病的RAA引物、探针及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种RAA荧光法检测猪附红细胞体的引物、探针及检测方法，其中引物和探针适用于RAA荧光法检测，并且能够准确地检测出猪附红细胞体质粒和阳性样本，与猪肺炎支原体、猪链球菌、猪大肠杆菌、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、非洲猪瘟病毒、健康猪血液无交叉反应，特异性达100％；检测方法快速、容易实现高通量，同时降低了检测时间和检测成本，本发明专利技术提供的基于RAA荧光法快速检测猪附红细胞体DNA的方法，灵敏度高，每反应检测灵敏度达到1copy/μL。

A RAA primer, probe and detection method for eperythrozoonosis

【技术实现步骤摘要】
一种检测猪附红细胞体病的RAA引物、探针及检测方法
本专利技术属于病原体分子检测
，具体涉及一种检测猪附红细胞体病的RAA引物、探针及检测方法。
技术介绍
猪附红细胞体病是由附红细胞体寄生于猪红细胞表面、血浆及骨髓,引起机体出现发热、黄疸、贫血等症状，是一种人兽共患传染病。有学者认为附红细胞体应属寄生虫，是单细胞原虫的一种，也有学者认为附红细胞体应属附红细胞体属，是乏浆体科，立克次氏体目，目前附红细胞体究竟属何种科目尚有争论，仍未形成共识，但认为附红细胞体从传染病学上分类应属于立克次氏体的研究较多。附红细胞体可感染各种动物，感染附红细胞体的动物常出现热性、溶血性疾病。附红细胞体没有严格的宿主，猪、牛、羊、马、鹿等多种动物以及人均可感染附红细胞体，且有较高的感染率。近年很多猪场感染附红细胞体病，也因此造成了巨大的经济损失。不同日龄的猪均可感染附红细胞体，但仔猪尤为易感，且同其它日龄的猪相比死亡率较高，母猪的感染也比较严重。传染源以患病猪和隐性感染的猪为主。该病的主要传播途径有体液、昆虫，以昆虫传播方式较多，并以吸血虱为主。感染附红细本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测猪附红细胞体的RAA荧光法扩增用的引物对，其特征在于，所述的引物对用于扩增序列为SEQ ID NO：1的核酸片段的全部或部分片段。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测猪附红细胞体的RAA荧光法扩增用的引物对，其特征在于，所述的引物对用于扩增序列为SEQIDNO：1的核酸片段的全部或部分片段。


2.如权利要求1所述的引物对，其特征在于，所述的引物对包含有序列为SEQIDNO：3的上游引物和序列为SEQIDNO：4的下游引物。


3.一种探针，其特征在于，所述的探针用于检测权利要求1或权利要求2所述的引物对的扩增产物。


4.如权利要求3所述的探针，其特征在于，探针序列为SEQIDNO：6。


5.如权利要求4所述的探针，其特征在于，所述的探针采用荧光报告基团和荧光淬灭基团进行修饰，其中荧光报告基团修饰在探针序列离5′端碱基数30bp的位置上；荧光淬灭基团修饰在探针序列离3′端碱基数21bp的位置上，荧光报告基团与淬灭基团之间间隔1个碱基A，其中A用四氢呋喃残基替换。


6.如权利要求5所述的探针，其特征在于，所述的荧光报告基团为FAM、HEX、TET、JOE或VIC；所述荧光淬灭基团为BHQ1、BHQ2或BHQ3。


7.权利要求1或权利要求2所述的引物对和权利要求3～6任一项所述的探针在制备RAA荧光检测试剂盒中的应用。


8.一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜秋明，吴晓东，郑秀红，樊晓旭，赵永刚，许龙春，乔启波，
申请(专利权)人：中国动物卫生与流行病学中心，
类型：发明
国别省市：山东;37