LTX-315在制备抑制冠状病毒的产品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了LTX‑315在制备抑制冠状病毒的产品中的应用。本发明专利技术提供了LTX‑315或其药学上可接受的盐或以LTX‑315或其药学上可接受的盐为主要成分的物质在如下中的应用：抑制冠状病毒；治疗或预防由于冠状病毒感染所致疾病；改善由于冠状病毒感染所致症状。LTX‑315能够与2019新型冠状病毒的nsp12蛋白结合、对2019新型冠状病毒的RNA聚合酶活性具有抑制作用，细胞实验显示出对2019新型冠状病毒的抑制作用。本发明专利技术对于COVID‑19的防治具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
LTX-315在制备抑制冠状病毒的产品中的应用
本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及LTX-315在制备抑制冠状病毒的产品中的应用。
技术介绍
冠状病毒是一类带有囊膜的不分节段的正义RNA病毒，能够感染多种哺乳动物和鸟类等宿主，其中包括SARS-CoV和MERS-CoV都被报道以蝙蝠作为其天然宿主。此前已知6种冠状病毒可以感染人，包括HCoV-229E、HCoV-NL63、HCoV-OC43、HCoV-HKU1、SARS-CoV和MERS-CoV。2019年12月以来，新型冠状病毒引起的肺炎疫情(COVID-19)对我国社会和公共健康造成了重大影响，截至2020年3月8日，我国共有80000多人感染，3100多人死亡，并且全球一百多个国家出现新冠疫情。目前临床上缺乏针对新型冠状病毒有效的疫苗和特异性的药物，因此迫切需要研发抗冠状病毒药物。LTX-315(式I)是一种具有高效抗癌活性的溶瘤肽，用于癌症治疗，目前已经完成Ⅰ期临床试验。目前正在招募试验人员，准备进行Ⅱ期临床试验。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供LTX-315在制备抑制冠状病毒的产品中的应用。第一方面，本专利技术要求保护(a)LTX-315或(b)其药学上可接受的盐或(c)以LTX-315或其药学上可接受的盐为主要成分的物质在如下任一中的应用：(A1)制备抑制冠状病毒的产品，或抑制冠状病毒；(A2)制备能够治疗或预防由于冠状病毒感染所致疾病的产品，或治疗或预防由于冠状病毒感染所致疾病；(A3)制备能够改善由于冠状病毒感染所致症状的产品，或改善由于冠状病毒感染所致症状。第二方面，本专利技术要求保护(a)LTX-315或(b)其药学上可接受的盐或(c)以LTX-315或其药学上可接受的盐为主要成分的物质在如下任一中的应用：(B1)制备能够与冠状病毒nsp12蛋白结合的产品，或与冠状病毒nsp12蛋白结合；(B2)制备能够抑制冠状病毒的RNA聚合酶活性的产品，或抑制冠状病毒的RNA聚合酶活性；(B3)制备能够在细胞水平抑制冠状病毒的产品，或在细胞水平抑制冠状病毒。在前文两方面中，所述冠状病毒可为能够感染人的冠状病毒。进一步地，所述冠状病毒可为2019新型冠状病毒(即引起COVID-19的冠状病毒)。在本专利技术的具体实施方式中，所述冠状病毒具体为2019新型冠状病毒毒株BetaCov/Wuhan/WH01/2019|EPI_ISL_406798。在前文第一方面中，由于所述冠状病毒感染所致疾病为COVID-19。在前文第一方面中，所述由于冠状病毒感染所致症状为发热、咳嗽、气促和/或呼吸困难。对于COVID-19而言，有部分核酸检测阳性患者无明显不适的无症状感染者。在本专利技术的具体实施方式中，前文第二方面中所述冠状病毒nsp12蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.1或SEQIDNo.1的第2-926位所示，或者与SEQIDNo.1或SEQIDNo.1的第2-926位具有95％以上同一性的序列。在本专利技术的具体实施方式中，所述冠状病毒的RNA聚合酶活性具体体现为所述冠状病毒的RNA聚合酶的引物延伸活性。在前文两方面中，所述产品具体可为药品。第三方面，本专利技术要求保护一种产品。本专利技术所要求保护的产品，其主要成分为LTX-315或其药学上可接受的盐；所述产品具有如下任一用途：(A1)抑制冠状病毒；(A2)治疗或预防由于冠状病毒感染所致疾病；(A3)改善由于冠状病毒感染所致症状；(B1)与冠状病毒nsp12蛋白结合；(B2)抑制冠状病毒的RNA聚合酶活性；(B3)在细胞水平抑制冠状病毒。其中，所述冠状病毒可为能够感染人的冠状病毒。进一步地，所述冠状病毒可为2019新型冠状病毒(即引起COVID-19的冠状病毒)。在本专利技术的具体实施方式中，所述冠状病毒具体为2019新型冠状病毒毒株BetaCov/Wuhan/WH01/2019|EPI_ISL_406798。相应的，由于所述冠状病毒感染所致疾病为COVID-19。其中，所述由于冠状病毒感染所致症状为发热、咳嗽、气促和/或呼吸困难。对于COVID-19而言，有部分核酸检测阳性患者无明显不适的无症状感染者。在本专利技术的具体实施方式中，所述冠状病毒nsp12蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.1或SEQIDNo.1的第2-926位所示，或者与SEQIDNo.1或SEQIDNo.1的第2-926位具有95％以上同一性的序列。在本专利技术的具体实施方式中，所述冠状病毒的RNA聚合酶活性具体体现为所述冠状病毒的RNA聚合酶的引物延伸活性。其中，所述产品具体可为药品。LTX-315的结构式如式I所示。实验证明，LTX-315能够与2019新型冠状病毒的nsp12蛋白结合、对2019新型冠状病毒的RNA聚合酶活性具有抑制作用，细胞实验显示出对2019新型冠状病毒的抑制作用。本专利技术对于COVID-19的防治具有重要意义。附图说明图1为纯化后的2019新型冠状病毒的nsp12蛋白。图2为LTX-315与2019新型冠状病毒nsp12蛋白的结合情况。图3为纯化后的nsp7L8蛋白。图4为LTX-315对2019新型冠状病毒RNA聚合酶引物延伸活性的抑制作用。图5为细胞水平评价LTX-315对2019新型冠状病毒的抑制作用。图6为LTX-315对Vero细胞的毒性作用。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。LTX-315：上海陶素生化科技有限公司产品，编号为T6881。实施例1、LTX-315与2019新型冠状病毒nsp12蛋白的结合1、将2019新型冠状病毒的nsp12(nsp12氨基酸序列来自于GISAID:EPI_ISL_406798)，N端添加起始密码子，C端添加凝血酶酶切位点，6×His标签纯化标签序列以及2×Strep标签序列(完整蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，第2-926位为nsp12氨基酸序列)，序列经昆虫细胞密码子优化(优化物种：insect)由苏州泓迅生物科技股份有限公司合成并连接至pFastBac1载体(InvitrogenTM10360014)。优化后的基因序列如SEQIDNo.2所示。蛋白的表达纯化方法参照文献(Kirchdoerfer,R.N.,Ward,A.B.StructureoftheSARS-CoVnsp12polymeraseboundtonsp7andnsp8co-factors.NatCommun10,2342(2019).https://doi.org/10.1038/s41467-019-10280-3)。纯化本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.LTX-315或其药学上可接受的盐或以LTX-315或其药学上可接受的盐为主要成分的物质在如下任一中的应用：/n(A1)制备抑制冠状病毒的产品，或抑制冠状病毒；/n(A2)制备能够治疗或预防由于冠状病毒感染所致疾病的产品，或治疗或预防由于冠状病毒感染所致疾病；/n(A3)制备能够改善由于冠状病毒感染所致症状的产品，或改善由于冠状病毒感染所致症状。/n

【技术特征摘要】
1.LTX-315或其药学上可接受的盐或以LTX-315或其药学上可接受的盐为主要成分的物质在如下任一中的应用：
(A1)制备抑制冠状病毒的产品，或抑制冠状病毒；
(A2)制备能够治疗或预防由于冠状病毒感染所致疾病的产品，或治疗或预防由于冠状病毒感染所致疾病；
(A3)制备能够改善由于冠状病毒感染所致症状的产品，或改善由于冠状病毒感染所致症状。


2.LTX-315或其药学上可接受的盐或以LTX-315或其药学上可接受的盐为主要成分的物质在如下任一中的应用：
(B1)制备能够与冠状病毒nsp12蛋白结合的产品，或与冠状病毒nsp12蛋白结合；
(B2)制备能够抑制冠状病毒的RNA聚合酶活性的产品，或抑制冠状病毒的RNA聚合酶活性；
(B3)制备能够在细胞水平抑制冠状病毒的产品，或在细胞水平抑制冠状病毒。


3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述冠状病毒为能够感染人的冠状病毒。


4.根据权利要求1-3中任一所述的应用，其特征在于：所述冠状病毒为2019新型冠状病毒。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：由于所述冠状病毒感染所致疾病为COVID-19。


6.根据权利要求1-5中任一所述的应用，其特征在于：所述由于冠状病毒感染所致症状为发热、咳嗽、气促和/或呼吸困难。

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【专利技术属性】
技术研发人员：施一，谭文杰，王敏，叶飞，彭齐，黄保英，王文玲，苏佳岐，赵静茹，袁斌，孙岩，白苏冉，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，
类型：发明
国别省市：北京;11