一组埃博霉素B葡萄糖苷类化合物及其酶法制备与应用制造技术

本发明专利技术公开了一组埃博霉素B葡萄糖苷类化合物，是埃博霉素B 7‑O‑β‑D葡萄糖苷、埃博霉素B 7‑O‑β‑D‑glucosyl‑(1→3)‑β‑D葡萄糖苷、埃博霉素B 7‑O‑β‑D‑glucosyl‑(1→2)‑β‑D葡萄糖苷或埃博霉素B 7‑O‑β‑D‑glucosyl‑(1→2)‑β‑D‑glucosyl‑(1→4)‑β‑D葡萄糖苷。该化合物是由埃博霉素B和UDP‑O‑β‑D‑glucose与糖基转移酶BsGT‑1的I62A突变蛋白介导糖基化反应获得。本发明专利技术还公开了所述埃博霉素B葡萄糖苷类化合物在制备预防和治疗肝癌的药物中的应用。实验证实本发明专利技术的化合物埃博霉素B 7‑O‑β‑D葡萄糖苷在浓度为9.84μM时，对人肝癌细胞HepG2有半抑制作用；并且对正常肝细胞HL7702的毒性相比于埃博霉素B原药下降了9430倍。有望增益埃博霉素在抗肿瘤活性中的应用价值，提升社会效益和经济价值。

A group of ebomycin B glucosids and their enzymatic preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一组埃博霉素B葡萄糖苷类化合物及其酶法制备与应用
本专利技术涉及一组埃博霉素糖苷化合物及其制备与应用，尤其涉及埃博霉素B葡萄糖一糖，二糖，三糖苷化合物及其酶法制备的方法，以及该埃博霉素B葡萄糖苷化合物在制备治疗和预防肝癌的药物中的应用。属于微生物技术及其制品与应用

技术介绍
纤维堆囊菌(Sorangiumcellulosum)属于粘球菌目，堆囊菌亚目，堆囊菌科，堆囊菌属，是一类广泛分布于土壤中的革兰氏阴性细菌。能够产生丰富的次级代谢产物。埃博霉素(Epothilone)是一类16元大环内酯类化合物，目前仅来源于纤维堆囊菌。在作用机制上，尽管埃博霉素与紫杉醇都是通过聚合微管蛋白而抑制肿瘤生长，但埃博霉素对多重耐药的肿瘤细胞表现出比紫杉醇更好的抑制活性，并且具有大规模发酵生产的潜力，被认为是紫杉醇良好的替代品。该类化合物有两种主产物，分别是埃博霉素A和埃博霉素B，其结构式如下：Epothilone结构式(R＝H，epothiloneA；R＝CH3，epothiloneB)埃博霉素的化学结构相比于紫杉醇更为简本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一组埃博霉素B葡萄糖苷类化合物，其特征在于，所述埃博霉素B葡萄糖苷类化合物是化合物1：埃博霉素B 7-O-β-D葡萄糖苷；或是化合物2：埃博霉素B 7-O-β-D-glucosyl-(1→3)-β-D葡萄糖苷；或是化合物3：埃博霉素B 7-O-β-D-glucosyl-(1→2)-β-D葡萄糖苷；或是化合物4：埃博霉素B 7-O-β-D-glucosyl-(1→2)-β-D-glucosyl-(1→4)-β-D葡萄糖苷。/n

【技术特征摘要】
1.一组埃博霉素B葡萄糖苷类化合物，其特征在于，所述埃博霉素B葡萄糖苷类化合物是化合物1：埃博霉素B7-O-β-D葡萄糖苷；或是化合物2：埃博霉素B7-O-β-D-glucosyl-(1→3)-β-D葡萄糖苷；或是化合物3：埃博霉素B7-O-β-D-glucosyl-(1→2)-β-D葡萄糖苷；或是化合物4：埃博霉素B7-O-β-D-glucosyl-(1→2)-β-D-glucosyl-(1→4)-β-D葡萄糖苷。


2.根据权利要求1所述的埃博霉素B葡萄糖苷类化合物，其特征在于：所述埃博霉素B葡萄糖苷类化合物是化合物1：埃博霉素B7-O-β-D葡萄糖苷。


3.权利要求1或2所述埃博霉素B葡萄糖苷类化合物酶法制备的方法，步骤是：
以如下比例量，在50mMTris-HCl,10mMMgCl2的缓冲液环境下，以终浓度为10mM的埃博霉素B和终浓度为50mM的UDP-O-β-D-glucose与500μg/ml的糖基转移酶BsGT-1的I62A突变蛋白进行体外酶活反应实验，反应混合液在37±1℃孵育12±2小时，然后添加3倍体积量的甲醇终止反应，14000r/min，30min去除蛋白沉淀，对样品旋转蒸干处理，再添加甲醇重悬产物，14000r/min再次离心30min后将产物通过半制备液相进行分离纯化；色谱柱尺...

【专利技术属性】
技术研发人员：李越中，张鹏，吴长生，汤亚杰，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37