检测RBM5基因相对表达量的方法、引物和探针以及试剂盒技术

本发明专利技术公开了用于检测RBM5基因相对表达量的方法、引物和探针以及试剂盒，均涉及检测RBM5基因表达水平的引物RBM5‑F、RBM5‑R，探针RBM5‑Probe；检测内参基因Actin的引物Actin‑F，Actin‑R，探针Actin‑Probe。该引物和探针经测试特异性好，灵敏度高，操作简便。本发明专利技术可快速检测样本中存在的RBM5基因及其表达量的多少，可为肺癌患者辅助制定个体化治疗方案和疾病预后判断。

Methods, primers, probes and kits for detecting the relative expression of rbm5 gene

【技术实现步骤摘要】
检测RBM5基因相对表达量的方法、引物和探针以及试剂盒
本专利技术属于生命科学和生物
，特别涉及一种用于检测RBM5基因相对表达量的引物、探针、方法和试剂盒，采用荧光PCR技术，用于检测肿瘤患者体内RBM5基因的表达水平。
技术介绍
肺癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤，其中80％～85％的病例为肺小细胞肺癌(NSCLC)。据统计，在欧洲，每年新发病例超过20万，其中死亡人数占所有癌症相关死亡的20％。在美国，每年约有15万患者死于肺癌。在中国大陆，肺癌的发病率和病死率均呈显著升高的趋势。尽管诊断手段，外科手术、化疗药物及放疗方法不断更新、发展，但在过去的30年里肺癌的5年生存率仍然只有13％～15％。吸烟是是肺癌的一个重要的危险因子，85％肺癌患者吸烟。分子学上认为非小细胞肺癌的形成缘于致癌基因的激活及抑癌基因的失活。人类3号染色体短臂2区1带3亚带(3p21.3)缺失是肺癌最常见的基因改变，已证实在95％的小细胞肺癌和50％～80％的非小细胞肺癌的细胞中存在该区域中的基因杂合性缺失，这个区域共有19个基因，这19个基因都在不同程度本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于检测样本中RBM5基因相对表达量的引物和探针，其特征在于，所述引物和探针包括检测RBM5基因的上游引物RBM5-F、下游引物RBM5-R、探针RBM5-Probe，其碱基序列如下所示：/nRBM5-F：TCTCAGACCTTCACAAGCAAA/nRBM5-R：GCTCGGTCTCGGTATTTCAT/nRBM5-Probe：FAM-TGGACATCTATCGACGATCCAGGCTGA-TAMRA。/n

【技术特征摘要】
1.用于检测样本中RBM5基因相对表达量的引物和探针，其特征在于，所述引物和探针包括检测RBM5基因的上游引物RBM5-F、下游引物RBM5-R、探针RBM5-Probe，其碱基序列如下所示：
RBM5-F：TCTCAGACCTTCACAAGCAAA
RBM5-R：GCTCGGTCTCGGTATTTCAT
RBM5-Probe：FAM-TGGACATCTATCGACGATCCAGGCTGA-TAMRA。


2.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其特征在于，所述引物和探针还包括检测内参基因Actin的上游引物Actin-F、下游引物Actin-R、探针Actin-Probe，其碱基序列如下所示：
Actin-F：GATACGAAGGGAGGGTGTACCA
Actin-R：CTCGGCCAGGGTGTTGAA
Actin-Probe：FAM-GCTTCTGATGGCAAGCTCTACGTCTCCT-TAMRA。


3.如权利要求1所述的引物和探针，其特征在于，RBM5-F、RBM5-R和RBM5-Probe的摩尔比为1:1:1。


4.如权利要求2所述引物和探针，其特征在于，Actin-F、Actin-R和Actin-Probe的摩尔比为1:1:1。


5.一种检测样本中RBM5基因相对表达量的方法，所述方法包括以下步骤：(1)提取样本中的RNA；(2)将步骤(1)中的RNA逆转录cDNA；(3)利用荧光PCR扩增步骤(2)所述的cDNA，并计算RBM5基因相对表达量，其特征在于，步骤(3)中的荧光PCR扩增是在检测RBM5基因的上游引物RBM5-F、下游引物RBM5-R、探针RBM5-Probe以及检测内参基因Actin的上游引物Actin-F、下游引物Actin-R、探针Actin-Probe的存在下进行的，其碱基序列如下所述：
RB...

【专利技术属性】
技术研发人员：李允章，刘赵玲，王淑一，
申请(专利权)人：武汉艾迪康医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42