人源化二肽基肽酶IV(DPP4)动物制造技术

本发明专利技术涉及人源化二肽基肽酶IV(DPP4)动物。本发明专利技术提供了包含人DPP4核酸序列或人源化DPP4核酸序列的非人动物。描述了包含用人DPP4基因或人源化DPP4基因对内源Dpp4基因进行的置换的非人动物，或者除了内源Dpp4基因之外还包含人DPP4基因或人源化DPP4基因的非人动物。还提供了包含处于人或非人DPP4调控元件控制下的人DPP4基因或人源化DPP4基因的非人动物，包括在内源非人Dpp4基因座处用人DPP4编码序列置换非人Dpp4编码序列的非人动物。提供了包含人DPP4基因或人源化DPP4基因序列的非人动物，其中所述非人动物是啮齿动物。描述了用于制备和使用所述非人动物的方法。

Human dipeptidyl peptidase IV (DPP4) animal

【技术实现步骤摘要】
人源化二肽基肽酶IV(DPP4)动物本申请是申请日为2015年5月28日、中国申请号为201580027887.6、专利技术名称为“人源化二肽基肽酶IV(DPP4)动物”的专利技术申请的分案申请。相关申请的交叉引用本申请要求2014年5月30日提交的美国临时专利申请No.62/005,476、2014年9月17日提交的美国临时专利申请No.62/051,626、以及2014年10月30日提交的美国临时专利申请No.62/072,692的优先权，每一专利申请的公开内容均以引用方式全文并入本文。
本专利技术涉及包含编码二肽基肽酶IV(DPP4)蛋白的核酸序列的非人动物，所述二肽基肽酶IV(DPP4)蛋白包含人序列。本专利技术涉及包含DPP4基因的转基因非人动物，所述DPP4基因全部或部分是人的。本专利技术涉及表达人DPP4蛋白或人源化DPP4蛋白的非人动物。本专利技术还涉及产生和使用包含人DPP4核酸序列或人源化DPP4核酸序列的非人动物的方法。
技术介绍
二肽基肽酶IV(DPP4)是治疗多种人类疾病、障碍和病症的治疗靶标，所述疾病、障碍和病症包括例如高血糖症(参见例如，Gerich(2013)PathogenesisandManagementofPostpandrialHyperglycemia:RoleofIncretin-BasedTherapies,Intl.J.Gen.Med.6:877-895(Gerich，2013年，“餐后高血糖的发病机理和管理：基于肠降血糖素的疗法的作用”，《国际全科医学杂志》，第6卷，第877-895页))和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)感染(参见例如，Rajetal.(2013)DipeptidylPeptidase4isaFunctionalReceptorfortheEmergingHumanCoronovirus-EMC,Nature495(7440):251-254(Raj等人，2013年，“二肽基肽酶4是新兴的人冠状病毒-EMC的功能受体”，《自然》，第495卷，第7440期，第251-254页))。对特异性靶向人DPP4蛋白的治疗性分子的药代动力学(PK)和药效动力学(PD)的评价通常在非人动物如啮齿动物(例如小鼠或大鼠)中进行。然而，在某些非人动物中如果这些治疗性分子也不靶向内源Dpp4蛋白，则在不能适当地确定此类分子的PD。而且，在其中物种特异性拮抗剂不与内源Dpp4蛋白相互作用的某些非人动物中，在疾病的非人动物模型中评价人DPP4特异性小分子、肽或蛋白质(即，生物)拮抗剂的体内治疗功效是有问题的。此外，在其中治疗靶分子本身不与内源Dpp4蛋白相互作用的某些非人动物中，评价靶向与人DPP4蛋白特异性相互作用的分子的小分子、肽或蛋白质(即，生物)拮抗剂的体内治疗功效也是有问题的。因此，存在对包含人DPP4基因或人源化DPP4基因的非人动物如啮齿动物(例如小鼠或大鼠)的需要。例如，存在对其中非人动物的Dpp4基因全部或部分人源化或用包含编码人DPP4蛋白或人源化DPP4蛋白的序列的人DPP4基因置换(例如，在内源非人基因座处置换)的非人动物如啮齿动物(例如小鼠或大鼠)的需要。也存在对这样的包含DPP4基因(例如，人DPP4基因或人源化DPP4基因)的非人动物的需要：其中所述DPP4基因在非人调控元件(例如，内源调控元件)的控制下，例如DPP4基因的5’侧翼区中的调控元件(例如，启动子和一个或多个增强子)或3’非翻译区中的调控元件。也存在对这样的包含DPP4基因(例如，人DPP4基因或人源化DPP4基因)的非人动物的需要：其中所述DPP4基因在人调控元件的控制下，例如人DPP4基因的5’侧翼区中的调控元件(例如，启动子或一个或多个增强子)或3’非翻译区中的调控元件。还存在对这样的人源化非人动物的需要：所述人源化非人动物在免疫细胞(例如T细胞)表面上，和/或在一种或多种组织(例如胎盘、肾、肺、肝、骨骼肌、心脏、脑和/或胰腺)中的细胞表面上表达人DPP4蛋白或人源化DPP4蛋白，表达水平类似于表达功能性Dpp4蛋白但不包含人DPP4基因或人源化DPP4基因的年龄匹配的非人动物的免疫细胞(例如T细胞)表面上，和/或一种或多种组织(例如胎盘、肾、肺、肝、骨骼肌、心脏、脑和/或胰腺)中的细胞表面上的Dpp4蛋白表达水平。此外，存在对这样的人源化非人动物的需要：所述人源化非人动物在免疫细胞(例如T细胞)表面上，和/或在一种或多种组织(例如胎盘、肾、肺、肝、骨骼肌、心脏、脑和/或胰腺)中细胞表面上表达人DPP4蛋白或人源化DPP4蛋白，表达水平高于或低于表达功能性Dpp4蛋白但不包含人DPP4基因或人源化DPP4基因的年龄匹配的非人动物的免疫细胞(例如T细胞)表面上，和/或一种或多种组织(例如胎盘、肾、肺、肝、骨骼肌、心脏、脑和/或胰腺)中的细胞表面上的Dpp4蛋白的水平。在本说明书通篇中，引用了各种专利、专利申请和其他类型的出版物(例如，期刊论文、电子数据库条目等)。本文所引用的所有专利、专利申请和其他出版物的公开内容，出于所有目的，均据此以引用方式全文并入本文。
技术实现思路
本专利技术提供了包含编码DPP4蛋白的核酸序列的非人动物，所述DPP4蛋白包含人序列。本专利技术提供了包含DPP4基因的转基因非人动物，所述DPP4基因全部或部分是人的。本专利技术提供了表达人DPP4蛋白或人源化DPP4蛋白的非人动物。本专利技术提供了内源非人动物Dpp4基因被置换(全部或部分置换)的非人动物。本专利技术提供了在内源非人Dpp4基因座处包含DPP4人源化(全部或部分人源化)的非人动物。本专利技术提供了具有人DPP4基因或人源化DPP4基因的非人动物，其中所述非人动物不表达内源Dpp4蛋白，并且其中所述非人动物在免疫细胞(例如T细胞)表面上，和/或在一种或多种组织(包括胎盘、肾、肺、肝、骨骼肌、心脏、脑和/或胰腺)中的细胞表面上表达人DPP4蛋白或人源化DPP4蛋白，表达水平类似于表达功能性内源Dpp4蛋白但不包含置换的年龄匹配的非人动物的免疫细胞(例如T细胞)表面上，和/或一种或多种组织(包括胎盘、肾、肺、肝、骨骼肌、心脏、脑和/或胰腺)中的细胞表面上存在的Dpp4蛋白的水平。在一个方面，本专利技术提供了包含人DPP4核酸序列或人源化DPP4核酸序列的非人动物。在一个方面，本专利技术提供了经遗传修饰的非人动物，该非人动物在内源Dpp4基因座处用编码人DPP4蛋白或人源化DPP4蛋白的基因对编码内源Dpp4基因的基因进行了置换。本专利技术提供了在内源Dpp4基因座处用人DPP4基因置换内源Dpp4基因的啮齿动物，例如小鼠或大鼠。在一个实施例中，啮齿动物对于在内源Dpp4基因座处用编码人DPP4蛋白或人源化DPP4蛋白的基因置换内源Dpp4基因而言是杂合的。在一个实施例中，啮齿动物对于在内源Dpp4基因座处用编码人DPP4蛋白或人源化DPP4蛋白的基因置换内源Dpp4基因而言是纯合的。在一个实施例中，啮齿动物是小鼠。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种啮齿动物，包含内源啮齿动物Dpp4基因的人源化，其中所述人源化包括在内源啮齿动物Dpp4基因座处用编码人DPP4基因的至少一个外显子的核酸序列置换编码Dpp4基因的外显子的啮齿动物基因以形成经修饰的DPP4基因，其中所述经修饰的DPP4基因的表达处于所述内源啮齿动物Dpp4基因座处的啮齿动物调控元件的控制下。/n

【技术特征摘要】
20140530 US 62/005,476;20140917 US 62/051,626;20141.一种啮齿动物，包含内源啮齿动物Dpp4基因的人源化，其中所述人源化包括在内源啮齿动物Dpp4基因座处用编码人DPP4基因的至少一个外显子的核酸序列置换编码Dpp4基因的外显子的啮齿动物基因以形成经修饰的DPP4基因，其中所述经修饰的DPP4基因的表达处于所述内源啮齿动物Dpp4基因座处的啮齿动物调控元件的控制下。


2.一种用于产生人源化啮齿动物的方法，包括用包含编码人DPP4蛋白或人源化DPP4蛋白的人DPP4基因序列的一个或多个外显子的人DPP4基因序列置换编码啮齿动物Dpp4蛋白的啮齿动物Dpp4基因序列，其中所述置换发生在内源啮齿动物Dpp4基因座处，并且所述包含编码人DPP4蛋白或人源化DPP4蛋白的人DPP4基因序列的一个或多个外显子的人DPP4基因序列有效地连接至所述内源啮齿动物Dpp4基因座处的啮齿动物调控元件或序列。


3.一种产生...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·凯拉瑟斯，A·穆伊卡，
申请(专利权)人：再生元制药公司，
类型：发明
国别省市：美国;US