制备多肽步骤中色谱固定相的再生方法技术

本发明专利技术提供一种适用于工业化应用的色谱固定相再生方法，通过色谱固定相与含有至少一种弱碱、一种有机溶剂和少于70％(v/v)水的再生溶液接触来恢复色谱固定相的性能，实现了在色谱纯化循环内完成色谱固定相的再生，使色谱柱再生后就可以进行下一个纯化循环，使多个纯化循环可以连续进行，不破坏色谱固定相，操作简单、安全且经济有效。

Regeneration method of chromatographic stationary phase in peptide preparation

【技术实现步骤摘要】
制备多肽步骤中色谱固定相的再生方法
本专利技术涉及色谱纯化领域。更具体的说，本专利技术涉及再生色谱固定相的方法。
技术介绍
多肽药物已被应用于多种疾病如糖尿病和肿瘤等的治疗，批准的多肽药物包括胰岛素及其突变体、利拉鲁肽、索玛鲁肽、艾塞那肽、戈舍瑞林、亮丙瑞林等，这些药物的全球市场销售额超过100亿美元，在改善患者的生活质量和提高患者健康方面发挥着重要作用。由于天然的多肽药物一般半衰期较短，因此一般需要通过化学修饰等技术手段改善其药理特定，例如典型的变体为酰胺、糖类、烷基、酰基、酯、聚乙二醇化等修饰，相关的技术报道可参考WO96/29342、WO98/08871、WO99/43708、WO00/34331、WO00/69911、CN97198413.1和CN200680006674.6等。多肽药物在制备过程中，由于其分子量较普通蛋白质要小一些，因此纯化的整个过程中经常用到多步纯化法。其中，反相高压色谱法(RP-HPLC)是工业上分离多肽的优选方法，而且该方法已被证明对于大规模纯化多种多肽是通用的。同时，只有高纯度的多肽样品本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种再生色谱固定相的方法，其中所述色谱固定相与含有至少一种弱碱、一种有机溶剂和少于70％(v/v)的水的再生溶液接触。/n

【技术特征摘要】
1.一种再生色谱固定相的方法，其中所述色谱固定相与含有至少一种弱碱、一种有机溶剂和少于70％(v/v)的水的再生溶液接触。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述弱碱包括氨水、碳酸盐、DIEA等铵类化合物。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述弱碱浓度为0.1-2％(v/v)、0.2-1.5％(v/v)、0.5-1.5％(v/v)、0.8-1.2％(v/v)或1％(v/v)。


4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述有机溶剂包括乙腈、乙醇、甲醇或异丙醇。


5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述有机溶剂浓度为30％-70％(v/v)、35％-65％(v/v)、40％-60％(v/v)、45％-55％(v/v)，或50％(v/v)。


6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述再生液的pH范围为9-12、9.5-11.5、10-11或pH为11。
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【专利技术属性】
技术研发人员：徐文长，马国昌，徐飞虎，李博，
申请(专利权)人：杭州九源基因工程有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33