衍生自CLPB的蛋白质及其用途制造技术

本发明专利技术涉及包含ClpB蛋白的片段的多肽和蛋白质及其组合物。本发明专利技术还涉及治疗和/或预防炎症，特别是超重和/或与肥胖相关的疾病和病症。本发明专利技术还涉及诱导饱足感、延长饱腹感、减少进餐量、减少食物摄入、控制体重增加和刺激体重减轻的方法。

Protein derived from ClpB and its application

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】衍生自CLPB的蛋白质及其用途
本专利技术涉及炎症的治疗或预防，例如肥胖、超重和/或肥胖相关的疾病和病症。本专利技术涉及引起饱足感、延长饱腹感、减少食物摄入、控制体重增加和刺激体重减轻的方法。
技术介绍
肥胖是这种伴随许多合并症的难以治疗的慢性病之一。肥胖和超重通常以食物摄入量增加和能量消耗减少为特征，这表明肽能系统调节能量平衡的作用发生了改变。实际上，食欲和进食行为的调节涉及肠饥饿和饱腹感肽激素与含有促食性神经肽和厌食性神经肽的脑神经回路之间的相互作用(Schwartz等人，2000.Nature.404(6778)：661-71)。当前的食物摄入控制模式涉及肠源性饥饿和饱腹感激素信号传递至调节进食的体内平衡和享乐方面的几个脑回路(Berthoud，2011.Curr.Opin.Neurobiol.21(6)：888-896；Murphy等人，2006.Nature.444(7121)：854-859)。其中突出的是来自下丘脑弓状核(ARC)的厌食和促食途径，其分别包括阿黑皮素原(POMC)和神经肽Y(NPY)/刺豚鼠相关蛋白(AgRP)神经元，它们在室旁核(PVN)中传递(Atasoy等人，2012.Nature.488(7410)：172-177；Garfield等人，2015.Nat.Neurosci.18(6)：863-71；Shi等人，2013.CellMetab.17(2)：236-248)。由黑素皮质素肽组成的中枢黑素皮质素(MC)系统，包括从其前体阿黑皮素原(POMC)衍生并作用于MC4型受体(MC4R)的α-黑素细胞刺激激素(o-MSH)，其在调节能量平衡中至关重要(Cone，2006.Endocr.Rev.27(7)：736-49)。实际上，POMC表达和MC4R信号传导的缺乏会导致人类和转基因啮齿动物的食欲亢进和肥胖症(Huszar等人，1997.Cell.88(1)：131-41；Krude等人，1998.Nat.Genet.19(2)：155-7；Farooqi等人，2003.N.Engl.J.Med.348(12)：1085-95)。因此，对中枢MC4R的选择性刺激似乎是治疗食欲亢进和肥胖症的非常有吸引力的靶标，并且已经开发了几种α-MSH肽类似物并进行了临床测试，如setmelanotide作为POMC缺乏症期间的替代疗法并用于治疗普拉德-威利综合症情况下的食欲亢进(Chen等人，2015.J.Clin.Endocrinol.Metab.100(4)：1639-45；Kühnen等人，2016.N.Engl.J.Med.375(3)：240-6)。然而，高亲和力的α-MSH样药物在大脑中的渗透具有产生不良副作用(例如血压升高)的风险。最近，肠道共生大肠杆菌(E.coli)酪蛋白分解蛋白酶B(ClpB)蛋白已被鉴定为α-MSH的构象模拟物，这暗示了特定细菌蛋白作为新型肽样药物的潜在用途(Tennoune等人，2014.Transl.Psychiatry.4：e458)。ClpB蛋白具有大于95kDa的分子量，这引起一些困难(例如，制备、稳定性等)。结果表明，肠道肠内分泌细胞中MC4R的激活刺激饱食感激素胰高血糖素样肽1(GLP-1)和肽YY(PYY)的释放(Panaro等人，2014.CellMetab.20(6)：1018-1029)。最近的研究表明，对应于大肠杆菌ClpB序列的氨基酸残基第534至548位的ClpB片段是完整的微摩尔MC1R激动剂，对MC3R和MC5R具有部分活性，但对MC4R没有活性(Ericson等人，Bioorganic&MedicinalChemistryLetters，2015，25：5306-5308)。然而，完整的ClpB或含有针对MCR的α-MSH样表位的较大片段的活性可能不同于Ericson等人研究的修饰的短片段。还已知激素α-MSH对免疫系统的细胞以及表达黑皮质素受体的外周非免疫细胞类型(例如MC1R和MC3R)具有有效的抗炎作用和保护作用(Brzoska等人，2008.Endrocr.Rev.29(5)：581-602)。此外，最近的研究表明，α-MSH是治疗牛皮癣、过敏性鼻炎、骨关节炎和神经炎性疾病的感兴趣靶标(Auriemma等人，2012.J.Invest.Dermatol.132(7)：1814-24；Kleiner等人，Clin.Exp.Allergy.46(8)：1066-74；等人，2016.Biochem.Pharmacol.116：89-99；Mykicki等人，2016.Sci.Transl.Med.8(362)：362ra146)。因此，仍然需要鉴定保留α-MSH的生物学活性，特别是与黑皮质素受体结合的生物学活性的新多肽或蛋白质。专利技术人出乎意料地发现，与α-MSH表位具有序列同源性的ClpB片段对肠黏膜细胞具有直接作用以刺激PYY的分泌。因此，本专利技术涉及包含ClpB蛋白片段或其变体的多肽和蛋白及其用途。
技术实现思路
本专利技术涉及包含ClpB蛋白或其变体的片段的至少15个氨基酸的多肽或蛋白质，其包含带负电荷的残基以及两个连续的Arg和Trp残基，其中所述多肽或蛋白质不是全长ClpB蛋白质。在一个实施方案中，本专利技术的多肽或蛋白质包含氨基酸序列SEQIDNO：2。在一个实施方案中，本专利技术的多肽或蛋白质包含氨基酸序列SEQIDNO：3。在一个实施方案中，本专利技术的多肽或蛋白质包含氨基酸序列SEQIDNO：4。在一个实施方案中，本专利技术的多肽或蛋白质还包含与序列GKPV具有至少75％序列同源性的序列。在一个实施方案中，本专利技术的多肽或蛋白质包含氨基酸序列SEQIDNO：6。本专利技术还涉及包含本文所述的多肽或蛋白质的组合物。本专利技术还涉及药物组合物，其包含本文所述的多肽或蛋白质和至少一种药学上可接受的赋形剂。本专利技术的另一个目的是包含根据本专利技术的多肽或蛋白质的药物。本专利技术还涉及包含本文所述的多肽或蛋白质的膳食补充剂。本专利技术还涉及包含本文所述的多肽或蛋白质的食品组合物。本专利技术还涉及根据本专利技术的多肽或蛋白质、药物组合物或药物，其用于有需要的对象中治疗或预防肥胖症、超重和/或肥胖相关的疾病和病症。本专利技术的另一个目的是根据本专利技术的多肽或蛋白质、膳食补充剂或食品组合物用于减轻对象体重的用途。在一个实施方案中，对象不是肥胖的。本专利技术还涉及试剂盒，其包含根据本专利技术的多肽或蛋白质、组合物、药物组合物、药物、膳食补充剂或食品组合物。定义在本专利技术中，以下术语具有以下含义：-数字前的“约”表示该数字值的加或减10％的范围。-如本文所用，“氨基酸”由如本领域中众所周知的其全名、其三个字母代码或一个字母代码表示。肽中的氨基酸残基缩写如下：苯丙氨酸是Phe或F；亮氨酸为亮或L；异亮氨酸是Ile还是I；蛋氨酸是Met还是M；缬氨酸是Val或V；丝氨酸是Ser或S；脯氨酸是Pro或P；苏氨酸是Thr或T；丙氨酸是Ala本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含ClpB蛋白或其变体的片段的至少15个氨基酸的多肽或蛋白质，其包含带负电荷的残基以及两个连续的Arg和Trp残基，其中所述多肽或蛋白质不是全长ClpB蛋白。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170403 EP 17305400.81.一种包含ClpB蛋白或其变体的片段的至少15个氨基酸的多肽或蛋白质，其包含带负电荷的残基以及两个连续的Arg和Trp残基，其中所述多肽或蛋白质不是全长ClpB蛋白。


2.根据权利要求1所述的多肽或蛋白质，其中所述多肽或蛋白质包含氨基酸序列SEQIDNO：2。


3.根据权利要求1或2所述的多肽或蛋白质，其中所述多肽或蛋白质包含氨基酸序列SEQIDNO：3。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的多肽或蛋白质，其中所述多肽或蛋白质包含氨基酸序列SEQIDNO：4。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的多肽或蛋白质，其还包含与序列GKPV具有至少75％序列同源性的序列。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的多肽或蛋白质，其中所述多肽或蛋白质包含氨基酸序列SEQIDNO：6。


7.一种包含根据权利要求1至6中任一项所述的多肽或蛋白质的组合物。


8.一种包含根据权利要求1至6中任一项所述的多肽或蛋白质和至少一种药学上可接...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢尔盖·费特苏，格雷戈里·兰伯特，罗曼·勒格朗，尼古拉斯·卢卡斯，
申请(专利权)人：塔基迪有限公司，国立卫生研究所，鲁昂大学，
类型：发明
国别省市：法国;FR