阿魏挥发油的GC-MC指纹图谱的构建方法及其应用技术

本发明专利技术提供阿魏挥发油在制备抗肿瘤血管生成、抗肿瘤细胞增殖或抗肿瘤细胞侵袭迁移的药物中的应用。本发明专利技术还提供阿魏挥发油的GC‑MC指纹图谱的构建方法。本发明专利技术经实验研究发现：阿魏挥发油能有效抑制血管生成，抑制内皮细胞的成管能力；能够抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭；具有良好的抗肿瘤细胞转移能力，在多种阿魏挥发油的实验中，准噶尔阿魏挥发油的效果最佳。

Construction and application of gc-mc fingerprint of Ferula volatile oil

【技术实现步骤摘要】
阿魏挥发油的GC-MC指纹图谱的构建方法及其应用
本专利技术涉及阿魏挥发油的GC-MC指纹图谱的构建方法及其应用，尤其是在制备抗肿瘤血管生成、抗肿瘤细胞增殖或抗肿瘤细胞侵袭迁移的药物中的应用。
技术介绍
准噶尔阿魏(FerulasongorieaPall)为伞形科阿魏属植物，药用部位是根和油胶树脂。在哈萨克斯坦等民间用来治疗头痛、感冒、胃病等疾病，广泛分布于新疆阿勒泰、塔城等地。《中国药典》(2015版)中收录的药用阿魏为伞形科植物新疆阿魏(FerulasinkiangensisK.M.Shen)或阜康阿魏(FerulafukanensisK.M.Shen)的树脂，味苦、辛，温，归脾胃经。具有消食，化癥，散痞，杀虫之功效。目前仅产于新疆。阿魏维吾尔族称为“英”，哈萨克族叫“萨斯克”。新疆地区的少数民族居民(维、蒙、哈萨克)在长期的生产和生活实践中，对阿魏的应用积累了丰富的经验。新疆民间常用于治疗腹部肿块、慢性肠胃炎、虫积、肉积、慢性支气管炎及风湿性关节炎等。阿魏的研究国内外有大量的报道，近年来由于发现其具有植物雌激素和抗癌活性而倍受人们关注。但是药典品种的2种阿魏均已濒临灭绝，资源匮乏。新疆维吾尔和哈萨克民族用臭阿魏(如新疆阿魏和阜康阿魏)类的根或油胶树脂治疗某些癌症，如食道癌、胃癌、子宫癌等，具有十分独特的疗效。在国外的研究中，意大利学者PoliF.，SaleemM.，RYU，伊朗学者MIranshahi，ASahebkar，韩国学者KimKH等均发现阿魏属植物具有植物雌激素和抗癌活性；国内杨俊荣也有类似报道。但是查阅文献发现，关于准噶尔阿魏的化学成分与药理作用研究较少。血管生成是恶性肿瘤发生和发展的关键因素，促进了包括胃癌、结肠癌、肝癌、胰腺癌等诸多肿瘤疾病的进展。肿瘤血管生成被认为是一个多步骤且复杂的过程，其中肿瘤微环境中的肿瘤细胞及其他细胞直接或间接参与发挥作用。血管内皮细胞在肿瘤血管生成中的作用及相关机制多年来一直被广泛研究。抑制血管内皮细胞的生物学功能，其中包括抑制其迁移、成管能力，是抗肿瘤血管生成，抑制肿瘤生长的重要靶标。肿瘤血管生成是肿瘤发生发展的关键，在肿瘤的侵袭和转移中发挥重要作用。肿瘤细胞生长的营养和氧供给是通过有效的血管网来传输的。新血管网由内皮细胞建立，即从已存在的血管形成新血管，过程复杂，其中内皮细胞的迁移及管形成是关键步骤。内皮细胞还可以通过分泌生长因子和细胞外基质蛋白酶促进肿瘤侵袭与远处转移。因此，抑制血管内皮细胞的生物学功能是抗肿瘤血管生成，抑制肿瘤发生发展的关键。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的问题，本专利技术提供了阿魏挥发油的GC-MC指纹图谱的构建方法及其在制备抗肿瘤血管生成、抗肿瘤细胞增殖或抗肿瘤细胞侵袭迁移的药物中的应用。本专利技术对准噶尔阿魏挥发油进行GC-MS指纹图谱与抗肿瘤作用研究，希望通过探索准噶尔阿魏挥发油中化学成分及种类与抗肿瘤实验，为准噶尔阿魏的研究和开发提供一定的科学依据。本申请专利技术人前期研究中发现准噶尔阿魏有一定的抗肿瘤、抗炎活性，对其进行分离得到挥发油、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、水等5个极性部位，结果表明其低极性部位(挥发油、二氯甲烷、乙酸乙酯)具有较强的抗肿瘤活性，具备进一步研究的价值，而高极性部位(正丁醇、水)抗肿瘤活性较低，故进一步对阿魏挥发油进行了研究。本专利技术提供阿魏挥发油在制备抗肿瘤血管生成的药物中的应用。本专利技术提供阿魏挥发油在制备抗胃癌的药物中的应用。本专利技术提供阿魏挥发油在制备抗肿瘤转移和/或抗肿瘤腹水的药物中的应用。作为优选，所述肿瘤转移为胃癌转移；优选为胃癌肝转移。作为优选，所述阿魏挥发油是将阿魏的根粉碎后，加入水，回流提取得到的油状液体。作为优选，所述阿魏为新疆阿魏、阜康阿魏、多伞阿魏或准噶尔阿魏。新疆阿魏和阜康阿魏都是臭阿魏，且化学成分药理作用比较相近。作为优选，所述阿魏为新疆阿魏和准噶尔阿魏。作为优选，所述阿魏为准噶尔阿魏。作为优选，所述阿魏挥发油的给药量为1.5g生药/kg。本专利技术提供阿魏挥发油的GC-MC指纹图谱的构建方法，将阿魏挥发油进行GC-MC分析；其中，气相色谱分析条件为：色谱柱HP-5MS毛细管柱，其规格为30m×0.25mm×0.25μm；进样量0.05μL；分流比60∶1；升温程序起始温度为60℃，保持2min；以4℃/min的速率程序升温至80℃，保持5min，以2℃/min升温至180℃，保持5min；以10℃/min升温至200℃，保持2min；载气为氦气，总流速为1mL/min，柱流速为1mL/min；质谱条件为：电离方式EI；电离能量70eV；离子源发生器温度230℃；接口温度为240℃；溶剂延迟时间为3min；信号采集时间为65min；质量扫描范围33～550amu。本专利技术经实验研究发现：阿魏挥发油能有效抑制血管生成，抑制内皮细胞的成管能力；能够抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭；具有良好的抗肿瘤细胞转移能力，在多种阿魏挥发油的实验中，准噶尔阿魏挥发油的效果最佳。附图说明附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。在附图中：图1为准噶尔阿魏挥发油GC-MS指纹图谱。图2为3种阿魏对斑马鱼节间血管生成的影响。图3为3种阿魏对SGC7901移植瘤斑马鱼肠下静脉血管新生的影响。图4为3种阿魏对人胃癌SGC7901细胞迁移的影响。图5为3种阿魏干预人胃癌SGC7901细胞迁移的抑制作用。图6为3种阿魏干预人胃癌SGC7901细胞侵袭的抑制作用。图7为3种阿魏对SGC7901异位移植瘤裸鼠的作用。图8为3种阿魏对SGC7901胃癌原位种植裸鼠肿瘤的病理结果(HE，×200)。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本专利技术，但并不限定本专利技术。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均购自常规生化试剂公司。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。实施例1一、实验材料1.1细胞株：人胃癌SGC-7901、人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)，购自上海中国科学研究院细胞研究所，实验使用3-5代细胞。1.2药材：由新疆医科大学附属中医医院主任中药师鉴定为新疆阿魏(Ferulasinkiangensis)、多伞阿魏(Ferulaferulaeoides)、准噶尔阿魏(Ferulasongoriea)。1.3试剂：内皮细胞ECM-2培养基(美国ScienCell公司)；胎牛血清(FBS)(美国Hyclone公司，批号F160123)；磷酸盐缓冲溶液(PBS)(美国Hyclone公司，批号AC10257442)；RPMI-1640培养基(美国Gibco公司，批号AD16192263)；二甲基亚砜(D本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.阿魏挥发油在制备抗肿瘤血管生成、抗肿瘤细胞增殖或抗肿瘤细胞侵袭迁移的药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.阿魏挥发油在制备抗肿瘤血管生成、抗肿瘤细胞增殖或抗肿瘤细胞侵袭迁移的药物中的应用。


2.阿魏挥发油在制备抗胃癌的药物中的应用。


3.阿魏挥发油在制备抗肿瘤转移和/或抗肿瘤腹水的药物中的应用。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述肿瘤转移为胃癌转移；优选为胃癌肝转移。


5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于：所述阿魏挥发油是将阿魏的根粉碎后，加入水，回流提取得到的油状液体。


6.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于：所述阿魏为新疆阿魏、阜康阿魏、多伞阿魏或准噶尔阿魏。


7.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于：所述阿魏为新疆阿魏和准噶尔阿魏。


8.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于：所述阿魏为...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵生俊，张海英，卢军，张柏生，范芳芳，陈良，轩辕欢，张彦，
申请(专利权)人：新疆医科大学第四附属医院，
类型：发明
国别省市：新疆;65