L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用制造技术

本发明专利技术提供了L‑低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用。本发明专利技术所述L‑低聚古罗糖醛酸盐是以褐藻胶为原料，经化学降解法或物理降解法或两种降解法组合得不同分子量低聚古罗糖醛酸；低聚古罗糖醛酸经中和制备得到不同分子量的低聚古罗糖醛酸的锂盐、钠盐、钾盐、钙盐或镁盐，其分子骨架为L‑古罗糖醛酸（G）通过α‑1,4糖苷键连接形成的线性寡糖化合物。本发明专利技术所述低聚古罗糖醛酸盐来源于海藻多糖，具有资源丰富、易于产业化，安全有效等诸多优点，在延缓皮肤衰老、调节免疫的药物和功能食品中方面具有广阔的开发应用前景。

Application of l-oligo-guluronate in the preparation of drugs and functional foods for delaying skin aging and anti-inflammatory immunity

【技术实现步骤摘要】
L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用
本专利技术属于海洋医药
，具体涉及L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用。
技术介绍
人体皮肤衰老可由内在因素和外在因素引起。内老化是由于细胞功能随年龄的增长而下降，外老化是由环境因素引起的，如紫外线(UV)或压力。由紫外线辐射引起的皮肤老化称为光老化。紫外线辐射可分为UVA(315-400nm)、UVB(280-315nm)和UVC(100-280nm)。UVB通常通过穿透皮肤表皮诱导DNA损伤、突变和皮肤癌，而UVA则是导致皮肤过早衰老的主要原因。UVA可以更深入地穿透真皮，主要通过诱导活性氧(ROS)生成介导衰老。过多的活性氧会氧化损伤DNA，最终导致衰老。海藻酸盐因其稳定性、生物降解性和低毒性而广泛应用于食品、制药、化妆品和纺织业，不同来源的海藻酸盐及其衍生物也具有多种生物和药用作用，如神经保护作用、抗炎作用、免疫刺激作用、抗癌作用和抗氧化作用等。其中海藻酸盐低聚物在水溶液中粘度较低，且在钙存在下不具有成胶性，因此认为海藻酸盐低聚物更适用于体内系统。L-低聚古罗糖醛酸钠是从褐藻中分离出的一种海藻酸盐多糖，具有抗氧化活性，是一种新型非甾体抗炎药。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供了L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用，L-低聚古罗糖醛酸钠来源属于纯天然，无副作用，针对抗衰老，可开发为皮肤免疫延衰类药物。本专利技术的技术方案为临床提供了适合光敏性皮肤病、皮肤炎症病人以及亚健康等人群服用的药品或保健品。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：本专利技术提供了L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用。进一步的：所述L-低聚古罗糖醛酸钠通过以下制备方法制得：以褐藻胶为原料，经化学降解法和/或物理降解法制得不同分子量低聚古罗糖醛酸；低聚古罗糖醛酸经中和制备得到低聚古罗糖醛酸盐，其分子骨架为L-古罗糖醛酸(G)通过α-(1，4)-糖苷键连接形成的线性寡糖化合物，重均分子量为0.3kDa～15kDa；所述L-低聚古罗糖醛酸及其盐的分子结构通式如下：式中，R＝H、Li、Na、K、Ca或Mg，n≤60。进一步的：所述L-低聚古罗糖醛酸盐的重均分子量范围为1kD～10kD，n为1～30。进一步的：所述L-低聚古罗糖醛酸盐能显著提高UVA辐射后HaCaT细胞存活率和HaCaT细胞线粒体膜电位，显著降低UVA辐照后HaCaT内活性氧含量。进一步的：所述L-低聚古罗糖醛酸盐能显著提高UVA辐射后HaCaT细胞内线粒体复合物I和II的活性，显著提高HaCaT细胞内SirT1蛋白的表达量。进一步的：所述L-低聚古罗糖醛酸盐能显著降低UVA辐射后成纤维细胞内NO的含量，显著降低致炎蛋白酶COX-2酶活力，通过靶向激活线粒体和抑制COX-2达到延缓皮肤衰老、调节免疫的作用。进一步的：所述L-聚古罗糖醛酸盐的浓度为10μmol/L-600μmol/L。进一步的：所述L-低聚古罗糖醛酸盐用于饮食补充剂或与甘油、丁二醇、香精、丙二醇、乳酸、黄原胶、透明质酸钠、烟酰胺、珍珠粉、维生素C、维生素E、中草药提取物、水制备抗衰老护肤品或化妆品；或者所述L-低聚古罗糖醛酸盐和包含低聚甘露糖醛酸盐的褐藻胶、褐藻胶寡糖、以低聚甘露糖醛酸为母核的硫酸化或磷酸化、乙酰化衍生物形成复配制剂。进一步的：所述褐藻胶为褐藻酸或褐藻酸钠。进一步的：所述化学降解法是酸降解法或Fenton降解法，物理降解法是微波或超声降解法。与现有技术相比，本专利技术的优点及有益效果是：1、本专利技术采用HaCaT细胞UVA损伤模型和HSF细胞UVA炎症模型，实验结果证明所述L-低聚古罗糖醛酸盐能显著提高UVA辐射后HaCaT细胞存活率，显著提高UVA辐射后HaCaT细胞线粒体膜电位，显著降低UVA辐射后HaCaT细胞内活性氧含量，显著提高UVA辐射后HaCaT细胞内线粒体复合物I和II的活性，并显著提高HaCaT细胞内SirT1蛋白的表达量；可显著降低UVA辐射后HSF细胞内NO的含量，显著降低UVA辐射后HSF细胞内COX-2酶活力。因此，L-低聚古罗糖醛酸盐对UVA引起的HaCaT细胞损伤及HSF细胞炎症有明显的调节作用，可细胞产生有效的抗紫外损伤效果，从而起到延缓皮肤衰老和调节免疫的作用。2、本专利技术所述L-低聚古罗糖醛酸盐来源于海洋天然多糖，具有资源丰富、易于产业化，安全有效等诸多优点，可开发成抗皮肤衰老、调节免疫和抗紫外损伤的药品、护肤品及保健品，因此具有较好的市场应用前途。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术的技术方案做进一步详细说明。实施例1：L-低聚古罗糖醛酸钠的提取制备及分析将褐藻胶(本实施例为褐藻酸钠)配成10wt％水溶液，采用1wt％稀盐酸加热到80～90℃后搅拌降解4～5小时，冷却后用10wt％的碳酸钠水溶液中和，再用5wt％稀盐酸调节pH到3.65左右，离心收集沉淀，用2mol/LNaOH溶解，加入3倍体积95wt％乙醇后收集沉淀，经无水乙醇脱水后干燥，得到聚古罗糖醛酸钠盐(Mw＝11.2kD)。将聚古罗糖醛酸钠盐用纯水配置成不同浓度的10wt％水溶液，采用Fenton法降解，所得不同分子量低聚古罗糖醛酸。低聚古罗糖醛酸经氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙或氢氧化镁中和后，双层滤纸过滤，超滤分级浓缩，冷冻干燥，得到不同分子量的低聚古罗糖醛酸的锂盐、钠盐、钾盐、钙盐或镁盐。所制得的L-低聚古罗糖醛酸或其盐的结构式如下：式中R＝H或Li，Na，K，Ca，Mg等药用盐，其重均分子量范围为0.3kD～15kD(优选为1kD～10kD)，n≤60(优选为1～30)。本实施例中，用TosohTSKGel3000PWXL柱色谱(内径7.8mm*柱长300mm)和右旋糖酐标准品(中国药品生物制品检定所)作为标准，测得低聚古罗糖醛酸钠盐的重均分子量分别为1.5kD，3.2kD，4.8kD，6.7kD，8.6kD。实施例2：L-低聚古罗糖醛酸钠对UVA诱导HaCaT细胞存活率的影响(1)细胞培养：将HaCaT细胞接种于MEM完全培养液中(含有100U/mL青霉素、100U/mL链霉素和10％FBS)，置于37℃、5％CO2培养箱中培养。(2)将每孔8000个细胞种植于96孔板中，放入恒温细胞培养箱孵育12h后，加入不同浓度的L-低聚古罗糖醛酸钠放入恒温细胞培养箱继续孵育48h。孵育结束后更换培养基，给予30J/cm2UVA照射。放入恒温细胞培养箱继续孵育12h后，每孔加入20μl(5mg/ml)MTT溶液，培养箱继续孵育4h。结束后，除去液体，每孔加入150μlDMSO溶液，混匀放入37℃培养箱20孵育20min。最后，酶标仪A540nm处测量吸光值本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用。


2.根据权利要求1所述的L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用，其特征在于：所述L-低聚古罗糖醛酸钠通过以下制备方法制得：以褐藻胶为原料，经化学降解法和/或物理降解法制得不同分子量低聚古罗糖醛酸；低聚古罗糖醛酸经中和制备得到低聚古罗糖醛酸盐，其分子骨架为L-古罗糖醛酸(G)通过α-(1，4)-糖苷键连接形成的线性寡糖化合物，重均分子量为0.3kDa～15kDa；所述L-低聚古罗糖醛酸及其盐的分子结构通式如下：



式中，R＝H、Li、Na、K、Ca或Mg，n≤60。


3.根据权利要求2所述的L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用，其特征在于，所述L-低聚古罗糖醛酸盐的重均分子量范围为1kD～10kD，n为1～30。


4.按照权利要求1或2所述的L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用，其特征在于，所述L-低聚古罗糖醛酸盐能显著提高UVA辐射后HaCaT细胞存活率和HaCaT细胞线粒体膜电位，显著降低UVA辐照后HaCaT内活性氧含量。


5.按照权利要求1或2所述的L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用，其特征在于，所述L-低聚古罗糖醛酸盐能显著提高UVA辐射后HaCaT细胞内线粒体复合物I和II的活性，显著提高HaCaT细胞内...

【专利技术属性】
技术研发人员：于广利，郝杰杰，李琼，何小溪，白董慧，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：山东;37