【技术实现步骤摘要】
缓解叶菜类蔬菜种植土壤镉胁迫的生物制剂及其应用
本专利技术属于生物制剂
，特别涉及一种缓解叶菜类蔬菜种植土壤镉胁迫的生物制剂及其应用。
技术介绍
近年来，重金属污染已成为全球性的环境问题。2014年《全国土壤污染状况调查公报》显示，镉(Cd)的点位超标率居重金属污染物之首，引起人们的广泛关注。由于采矿冶炼、农业污水灌溉及农药化肥施用，大量的镉被释放到土壤中，加剧了土壤镉污染问题。一方面，镉会破坏植物的叶绿体结构，造成光合作用受阻，降低植物的代谢，严重抑制植物，特别是叶菜类蔬菜的生长。另一方面，镉的水溶性高，蔬菜茎叶可食用部分容易累积人为进入土壤耕作层的镉，进而通过食物链传递到动物及人体内，严重威胁人类健康与生存。因此，如何缓解或抑制植物受镉毒害，减少植物体内吸收传输镉成为目前迫切要解决的课题。叶菜类蔬菜在我国有广泛种植，其在从土壤中汲取大量水分的同时易富集土壤中的镉，且其对土壤中镉造成的生理胁迫十分敏感，因此，如何缓解叶菜类蔬菜的镉胁迫，降低其可食用部分的镉积累具有十分重要的意义。目前微生物修复在Cd污染的治理...
【技术保护点】
1.一种缓解叶菜类蔬菜种植土壤镉胁迫的生物制剂，其特征是：/n所述生物制剂由采用枯草芽孢杆菌168生物法制得的纳米硒与枯草芽孢杆活菌数量≥1×10
【技术特征摘要】
1.一种缓解叶菜类蔬菜种植土壤镉胁迫的生物制剂，其特征是：
所述生物制剂由采用枯草芽孢杆菌168生物法制得的纳米硒与枯草芽孢杆活菌数量≥1×109/g的枯草芽孢杆菌在水中均匀混合制成，其混合比例是：每15L水中混有300mL～700mL的浓度为200～400mgL-1纳米硒水溶液和1kg～4kg枯草芽孢杆菌。
2.按照权利要求1所述缓解叶菜类蔬菜种植土壤镉胁迫的生物制剂，其特征是：所述纳米硒与枯草芽孢杆混合比例是：每15L水中混有500mL的浓度为300mgL-1纳米硒水溶液和4kg枯草芽孢杆菌。
3.按照权利要求1或2所述缓解叶菜类蔬菜种植土壤镉胁迫的生物制剂，其特征是，所述采用枯草芽孢杆菌168生物法制得的纳米硒以如下步骤制备：
(1)在灭菌后的添加了50～600mmolL-1亚硒酸钠的LB培养基中，按体积比的量接种4～10％的枯草芽孢杆菌168活菌体，然后将培养瓶置30±2℃的摇瓶培养箱中在150-300转/分钟的条件下进行好氧培养0.5～7d，之后以4000g～4500g离心10～20分钟，收集沉淀即获得枯草芽孢杆菌与其代谢产物纳米硒的混合物；
(2)用0.9％NaCl溶液洗涤所得的沉淀，然后加入液氮并杵打使沉淀破碎；再以100-300W条件超声处理5～10分钟使沉淀混合物粒径达到200nm以下，用Tris-HCl缓冲液以10000g，5min条件连续离心洗涤破碎产物2-3次；将离心洗涤收集到的产物悬浮于去离子水中，即得到含有纳米硒和菌细胞碎片的悬浮液；
(3)将步骤(2)制得的悬浮液转移到试管中，按体积比1:2～2:1加入正辛醇混合；在4℃静置沉淀14～24h；液体出现分层：上层是正辛醇，两相界面是菌细胞碎片，下层是纳米硒颗粒悬浊液；分离出下层的纳米硒颗粒悬浊液，3500g离心10min，沉淀物用氯仿、乙醇和蒸馏水分别洗涤至完全去除菌细胞碎片后得到纳米硒；将清洁后的纳米硒粒子在去离子水中定量为200-400mg/L的浓度制得纳米硒水溶液...
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