【技术实现步骤摘要】
一种日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的分离鉴定方法
本专利技术属于蛋白质分离鉴定
,具体涉及一种日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的分离鉴定方法。
技术介绍
血吸虫病(Schistosomiasis)是一种危害严重的人畜共患寄生虫病,全球血吸虫病人在2亿以上,受威胁的流行区人口为7亿多。日本血吸虫(Schistosomajaponicum)是导致血吸虫病的三种病原体之一。建国初期,日本血吸虫病曾在我国12个省(江苏、浙江、安徽等)的454个县、市、区广泛流行,给人民健康和畜禽生产带来严重危害和巨大损失,经过多年来的不懈努力,我国血吸虫病的防治工作取得举世瞩目的成就,血吸虫病人数从解放初期的1100多万下降至41.3万,家畜感染率也由3.60%(2005年)下降至1.08%(2010年),据估计血吸虫病家畜约1.5万(其中病牛占80.04%),钉螺面积也降低至37.2亿平方米。然而,S.japonicum易感宿主广泛(涉及40多种哺乳动物),传染源和中间宿主尚不能有效根除,日本血吸虫病仍面临着随环境气候变化而死灰复燃的可能性,其诊 ...
【技术保护点】
1.一种日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的分离鉴定方法,其特征在于:包括以下步骤:/n步骤1,样品制备:将
【技术特征摘要】
1.一种日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的分离鉴定方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤1,样品制备:将S.japonicum虫卵研磨,用灭菌生理盐水配成5%悬液,置4℃浸泡3天,期间于-20℃和室温间反复冻融10次,然后超声裂解,12000rpm离心1小时,取上清液备用;
步骤2,样品分离:将步骤1制备的上清液过葡聚糖凝胶柱,然后收集分离得到的抗原组分,-20℃保存备用;
步骤3,样品鉴定:将收集的抗原组分在PVDF膜上点样,1μg/点,室温放置1小时,然后将膜置于1%BSA(W/V)的PBST中4℃过夜封闭,PBST洗膜3次,每次5min,再与1:100倍稀释的S.japonicum阳性病牛血清室温振荡作用1小时,PBST洗膜3次,每次5min,再与1:20000倍稀释的羊抗牛IgG-hrp室温振荡作用1小时,PBST洗膜3次,每次5min,ECL化学发光显色进行鉴定。<...
【专利技术属性】
技术研发人员:郝力力,郭莉,袁东波,阳爱国,
申请(专利权)人:西南民族大学,四川省动物疫病预防控制中心,
类型:发明
国别省市:四川;51
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