【技术实现步骤摘要】
一种用于EBV检测的探针及检测方法
本专利技术涉及基因工程
，更具体涉及一种用于EBV检测的探针及检测方法。
技术介绍
人类疱疹病毒第四型(Epstein-Barrvirus，EBV)，又称为EB病毒，是最常见能引起人类疾病的病毒之一，为双链线性DNA，基因组长度约为172kb，其形态与其他疱疹病毒相似，圆形、直径180nm，基本结构含核样物、衣壳和囊膜三部分。能导致宿主染色体异位、重排，通过LMP1、miRNA影响细胞增殖、迁移、凋亡等重要信号通路，通过LMP2实现免疫逃逸。EBV被认为和许多疾病如侵入型乳腺癌、胃癌、鼻咽癌、结直肠癌、恶性血液肿瘤等有关，在非洲，EBV与伯奇氏淋巴瘤有关联性，全世界有超过90％的人口受到EBV感染。EBV的传染途径主要是经由唾液传染，常发生在未开发国家或发展中国家，家庭拥挤的幼儿身上，在欧美国家中，常发生于青少年，经由接吻而传染。EBV能导致宿主染色体异位、重排，通过LMP1、miRNA影响细胞增殖、迁移、凋亡等重要信号通路，通过LMP2实现免疫逃逸。严重威胁人类健康，因而一直备受关...
【技术保护点】
1.一种用于EBV检测的探针，属一种RNA，其特征在于，制备过程包括以下步骤：进行两轮PCR反应，每次PCR反应后进行磁珠纯化；PCR产物质控；T7体外转录；探针纯化；探针质控、贮藏。/n
【技术特征摘要】
1.一种用于EBV检测的探针，属一种RNA，其特征在于，制备过程包括以下步骤：进行两轮PCR反应，每次PCR反应后进行磁珠纯化；PCR产物质控；T7体外转录；探针纯化；探针质控、贮藏。
2.根据权利要求1所述的探针，其特征在于，是一种寡聚核苷酸。
3.根据权利要求1所述的探针，其特征在于，所述探针被生物素标记。
4.根据权利要求1所述的探针，其特征在于，生物素标记探针中的尿嘧啶。
5.根据权利要求1所述的探针，其特征在于，所述的第一轮PCR正向引物核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。
6.根据权利要求1所述的探针，其特征在于，所述的第一轮PCR反向引物核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。
7.根据权利要求1所述的探针，其特征在于，所述的T7体外转录PCR引物核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。
8.根据权利要求1所述的探针，其特征在于，所述的两次PCR反应过程包括活化步骤、变性步骤、退火步骤、延伸步骤和保持步骤。
9.根据权利要求1所述的探针，其特征在于，所述的两次PCR反应体系及反应条件分别如下：
1)使用PCR引物进行第一轮PCR反应，PCR反应体系如下：
在PCR仪中执行以下反应程序
2)使用PCR引物进行第二轮PCR反应，PCR反应体系如下：
第二次PCR反应程序如下：
。
10.一种用于HPV的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：制备DNA模板，片段化基因组DNA，纯化片段化产物，基因组文库构建，PCR扩增基因组文库，权利要求1所述探针与基因组文库杂交，磁珠捕获杂交...
【专利技术属性】
技术研发人员：潘石玄伟，钱刚，蔡霖霖，李振，郎秋蕾，
申请(专利权)人：杭州联川生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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