一种快速检测甲壳素中蛋白质含量的方法技术

本发明专利技术提供了一种快速检测甲壳素中蛋白质的方法，属于蛋白质检测技术领域。检测方法包括如下步骤：（1）称取样品，加入0.5mol/L NaOH溶液，水浴后抽滤，得到收集液1；（2）收集残渣加入0.3mol/L NaOH溶液，水浴后抽滤，得到收集液2；（3）收集残渣加入0.2mol/L NaOH溶液，水浴后抽滤，得到收集液3；（4）将三次收集液分别吸取1mL于10mL样品比色管中，另分别吸取浓度为100μg/mL的蛋白质标准溶液0 mL、0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.8mL、1.0mL于6支10mL标准比色管中，向6支标准比色管加入1%NaCl溶液1mL、0.9 mL、0.8 mL、0.6 mL、0.2 mL、0 mL，使其体积为1.0mL,于标准比色管和样品比色管中加入考马斯亮蓝G250溶液5.0 mL,混匀，静置10min后于595nm处测定其吸光度。（5）通过计算公式，计算得到总的蛋白质含量。

A method for rapid determination of protein content in chitin

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测甲壳素中蛋白质含量的方法
本专利技术属于蛋白质检测
，尤其涉及一种快速检测甲壳素中蛋白质含量的方法。
技术介绍
甲壳素（C8H13O5N）n，又称甲壳质，英文名Chitin.是主要存在于甲壳类动物外壳中的一种功能性物质，经工艺提取，产品为白色片状物质，甲壳素无臭、无味，不溶于水、稀酸、稀碱及其它有机溶剂。目前，甲壳素主要用于生产壳聚糖的原料，壳聚糖普遍应用于医药、美容、工业等领域。作为一种现代保健食品，壳聚糖具有增加免疫力、护肝解毒等功效。随着甲壳素向高科技产业的发展，甲壳素工艺中蛋白质的残留含量已作为甲壳素质量的一个主要指标。在生产甲壳质的工艺中，需要用稀盐酸溶液脱去碳酸钙，然后用稀氢氧化钠溶液洗脱去蛋白质，在工业生产中，甲壳素产品中蛋白质难以完全脱除，且甲壳素不溶于水，难以直接测定其蛋白质含量及变化。目前测定蛋白质含量的方法主要有福林酚试剂法、紫外分光光度法和考马斯亮蓝G-250法，福林酚试剂法操作要求严格计时耗费时间常，灵敏度不高，且蛋白质之间的变动大、干扰物较多，如硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、各种硫醇对检测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速检测甲壳素中蛋白质含量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：/n（1）样品前处理/nA.称取甲壳素样品，加入0.5mol/L NaOH溶液，80℃水浴1h；/nB.冷却后，使用抽滤瓶过滤残渣，将收集液1转移到100mL容量瓶中，加入一滴甲基红指示剂，用（1+5）Hcl溶液调节PH值至中性，用纯水定容后待测；/nC.将残渣1收集至锥形瓶中，加入0.3mol/L NaOH溶液，80℃水浴1h；/nD.冷却后，使用抽滤瓶过滤残渣，将收集液2转移到100mL容量瓶中，加入一滴甲基红指示剂，用（1+7）Hcl溶液调节PH值至中性，用纯水定容后待测；/nE.将残渣2收集至锥形瓶中，加入0....

【技术特征摘要】
1.一种快速检测甲壳素中蛋白质含量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
（1）样品前处理
A.称取甲壳素样品，加入0.5mol/LNaOH溶液，80℃水浴1h；
B.冷却后，使用抽滤瓶过滤残渣，将收集液1转移到100mL容量瓶中，加入一滴甲基红指示剂，用（1+5）Hcl溶液调节PH值至中性，用纯水定容后待测；
C.将残渣1收集至锥形瓶中，加入0.3mol/LNaOH溶液，80℃水浴1h；
D.冷却后，使用抽滤瓶过滤残渣，将收集液2转移到100mL容量瓶中，加入一滴甲基红指示剂，用（1+7）Hcl溶液调节PH值至中性，用纯水定容后待测；
E.将残渣2收集至锥形瓶中，加入0.2mol/LNaOH溶液，70℃水浴1h；
F.冷却后，使用抽滤瓶过滤残渣，将收集液3转移到100mL容量瓶中，加入一滴甲基红指示剂，用（1+7）Hcl溶液调节PH值至中性，用纯水定容后待测；
（2）样品检测
A.将收集液1，收集液2和收集液3分别吸取1mL于10mL样品比色管中；
B.分别吸取100μg/mL的蛋白质标准溶液0mL、0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.8mL、1.0mL于6支10mL标准比色管中；
C.向6支标准比色管中加入1%Nacl溶液1mL、0.9mL、0.8mL、0.6mL、0.2mL、0mL，使其体积为1mL；
D.于...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑萌萌，郭晓华，张廷翠，张永勤，刘祥燕，成艳，彭桂芝，
申请(专利权)人：日照健安检测技术服务有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37