一种高纯度绿原酸的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种高纯度绿原酸的制备方法，其包括S1、取金银花药材，粉碎，加入15～25倍重量的纯水中，浸泡2～4h；S2、加盐酸调节pH值为3～4，加热至45～60℃，提取两次，过滤，得到一级提取液；S3、将S2中得到的一级提取液直接上聚酰胺柱，采用含有10vol%～40vol%提取剂的洗脱液进行梯度洗脱，收集流分，得到二级提取液；S4、将S3中得到的二级提取液浓缩到一级提取液原体积的8%～20%，得到三级提取液，按照三级提取液与乙酸乙酯的体积比为1：3.5～4.5加入乙酸乙酯萃取两次，合并滤液，得到四级提取液；S5、将S4中得到的四级提取液减压浓缩至四级提取液原体积的75%～88%，冷藏结晶，即得绿原酸。本发明专利技术具有较大程度的去除杂质，有效提高绿原酸纯度的优势。

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度绿原酸的制备方法
本专利技术涉及绿原酸提取的
，尤其是涉及一种高纯度绿原酸的制备方法。
技术介绍
绿原酸是植物体在有氧呼吸过程中合成的一种苯丙素类物质，主要来源于金银花、杜仲、茵陈等植物中药材。金银花是目前用于提取绿原酸常采用的一种原料，金银花中的主要有效成分为以绿原酸为主的有机酸类和以木犀草苷为主的黄酮类，另外还有部分糖、蛋白质等大分子。绿原酸具有较强的药理活性，研究表明它对消化系统、血液系统和生殖系统均有药理作用，具有较广泛的的抗菌消炎、利胆、止血及增高白血球数量的作用。对金黄葡萄球菌、溶血性链球菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌有显著的抑制作用；对由放疗、化疗所致的白细胞养活症有显著疗效；口服绿原酸可显著刺激胆汁的分泌，具有利胆功效；对急性咽喉炎症及脓皮肤病有显著疗效；对月经过多，子宫功能性出血有良好的止血效果。现有申请公布号为CN103288644A的中国专利公开了一种从金银花中提取绿原酸的制备方法，包括以下步骤：a、准备原药材金银花，清洗，干燥，粉碎至10-30目，得金银花粉末；b、将步骤a中所得的金银花粉末在水中提取2-5次，每次1-3h，合并提取液；c、调整步骤b中所得的提取液的pH值为2-6，然后用大孔树脂吸附，再用70-80%的乙醇、50-60%的乙醇分别洗脱，合并洗脱液，得粗提取液；d、调整步骤c所得粗提取物的pH值为2-6，然后萃取，分离，浓缩，干燥，得成品绿原酸。上述公开专利中的从金银花中提取绿原酸的制备方法，提取温度低，有效成分不会被破坏。上述中的现有技术方案存在以下缺陷：1、提取液中含有的糖、蛋白质等杂质无法完全去除，会降低所得的绿原酸整体的纯度；2、采用大孔树脂吸附法进行纯化，洗脱速度快，但除杂效果不佳。
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的之一是提供一种高纯度绿原酸的制备方法，其具有较大程度的去除杂质，有效提高制得的绿原酸的纯度的优势。本专利技术的上述专利技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种高纯度绿原酸的制备方法，包括以下步骤：S1、预处理：取金银花药材，粉碎，加入15～25倍重量的纯水中，浸泡2～4h；S2、提取：加盐酸调节pH值为3～4，加热至45～60℃，提取两次，过滤，得到一级提取液；S3、纯化：将S2中得到的一级提取液直接上聚酰胺柱，采用含有10vol%～40vol%提取剂的洗脱液进行梯度洗脱，收集流分，得到二级提取液；S4、萃取：将S3中得到的二级提取液浓缩到一级提取液原体积的8%～20%，得到三级提取液，按照三级提取液与乙酸乙酯的体积比为1：3.5～4.5加入乙酸乙酯萃取两次，合并滤液，得到四级提取液；S5、结晶：将S4中得到的四级提取液减压浓缩至四级提取液原体积的75%～88%，冷藏结晶，即得绿原酸。通过采用上述技术方案，利用45-60℃的纯水进行提取绿原酸，使得绿原酸能够充分溶于纯水中；利用盐酸调节pH值以保证绿原酸的稳定性；聚酰胺去色素明显，洗脱液可以直接浓缩后使用，效果显著，利用聚酰胺吸附绿原酸，在用洗脱液进行洗脱时，绿原酸易被洗脱下来。利用不同浓度的洗脱液进行洗脱，可将糖、蛋白质等大分子和绿原酸分别洗脱下来，从而有效去除了糖、蛋白质等大分子，从而确保了制得的绿原酸具有较高的纯度。本专利技术在一较佳示例中可以进一步配置为：所述步骤S3中提取剂为乙醇，所述洗脱液的组分为纯水与乙醇，所述乙醇的含量为洗脱液总体积的10%～40%。通过采用上述技术方案，利用绿原酸易溶于乙醇的特性，采用水与乙醇混合的洗脱液进行洗脱，使得绿原酸能够溶于洗脱液并随洗脱液被洗脱下来，从而达到纯化的目的，一定程度上使得制得的绿原酸具有较高的纯度。本专利技术在一较佳示例中可以进一步配置为：所述步骤S3中采用10vol%、20vol%、30vol%、40vol%乙醇浓度的洗脱液进行梯度洗脱。通过采用上述技术方案，采用不同浓度的洗脱液进行洗脱，使得样品中的所有组分能够在较短时间内实现最佳分离，有效缩短分析周期，同时较大程度的选择具有较高浓度绿原酸的洗脱液，从而一定程度上确保了制得的绿原酸的纯度。本专利技术在一较佳示例中可以进一步配置为：所述步骤S3中收集20vol%乙醇浓度的流分。通过采用上述技术方案，选择含有较高浓度绿原酸的流分，从而有效确保制得的绿原酸具有较高的纯度。本专利技术在一较佳示例中可以进一步配置为：所述步骤S3中先用纯水洗脱2-3次，再用洗脱液进行洗脱。通过采用上述技术方案，先用纯水进行洗脱，可洗去提取液中含有的糖、蛋白质等杂质，从而一定程度上确保制得的绿原酸具有较高的纯度。本专利技术在一较佳示例中可以进一步配置为：所述步骤S3中收集到的流分采用超滤法进行过滤，得到二级提取液。通过采用上述技术方案，采用超滤法可进一步除去一级提取液中的糖、蛋白质等大分子，从而进一步的提高制得的绿原酸的纯度。本专利技术在一较佳示例中可以进一步配置为：所述步骤S1金银花药材先经由液氮冻干后再进行低温粉碎处理。通过采用上述技术方案，金银花药材经液氮冻干后再破碎可有效提高细胞破碎的均匀度，使得细胞能够破碎的更彻底，从而有利于绿原酸溶于纯水中，从而有效确保制得的绿原酸具有较高的纯度。本专利技术在一较佳示例中可以进一步配置为：所述步骤S1中金银花药材粉碎之后置于50℃～80℃室内进行烘干。通过采用上述技术方案，对金银花药材进行烘干，使得金银花药材内部的水分被加热而逸出，从而在后续的浸泡过程中，有利于加快绿原酸溶于纯水中，进而一定程度上可确保制得的绿原酸具有较高的纯度。综上所述，本专利技术包括以下至少一种有益技术效果：1.利用液氮冻干再进行破碎金银花药材，使得细胞能够均匀和完全破碎，从而有利于绿原酸能够较大程度的溶于纯水中，进而确保了制得的绿原酸具有较高的纯度；2.利用纯水先进行洗脱和采用超滤法进行过滤，使得提取液中的糖、蛋白质等杂质能够有效的本去除，从而有效确保了制得的绿原酸具有较高的纯度；3.在提取绿原酸时减少了有机溶剂的消耗，节省了乙醇的溶剂成本，且提取后不用减压浓缩，减少能源消耗，直接上聚酰胺柱，有效减少了实验流程；4.聚酰胺去色素效果明显，洗脱液可以直接浓缩后使用，且效果明显，可有效确保制得的绿原酸具有较高的纯度。具体实施方式实施例一：本专利技术公开了一种高纯度绿原酸的制备方法，包括以下步骤：S1、预处理：取10g金银花药材，粉碎，过100目筛，加入150g的纯水中，搅拌均匀，浸泡4h；S2、提取：加盐酸调节pH值为3，加热至50℃提取，过滤，重新加入150g纯水，加热至50℃提取，过滤，合并过滤液，得到300ml一级提取液；S3、纯化：将S2中得到的一级提取液直接上聚酰胺柱，采用10vol%、20vol%、30vol%、40vol%乙醇浓度的洗脱液进行梯度洗脱，收集20vol%乙醇浓度的洗脱液进行洗脱的流分，得到二级提取液；S4、萃取：将S3中的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高纯度绿原酸的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：/nS1、预处理：取金银花药材，粉碎，加入15～25倍重量的纯水中，浸泡2～4h；/nS2、提取：加盐酸调节pH值为3～4，加热至45～60℃，提取两次，过滤，得到一级提取液；/nS3、纯化：将S2中得到的一级提取液直接上聚酰胺柱，采用含有10vol%～40vol%提取剂的洗脱液进行梯度洗脱，收集流分，得到二级提取液；/nS4、萃取：将S3中得到的二级提取液浓缩到一级提取液原体积的8%～20%，得到三级提取液，按照三级提取液与乙酸乙酯的体积比为1：3.5～4.5加入乙酸乙酯萃取两次，合并滤液，得到四级提取液；/nS5、结晶：将S4中得到的四级提取液减压浓缩至四级提取液原体积的75%～88%，冷藏结晶，即得绿原酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种高纯度绿原酸的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、预处理：取金银花药材，粉碎，加入15～25倍重量的纯水中，浸泡2～4h；
S2、提取：加盐酸调节pH值为3～4，加热至45～60℃，提取两次，过滤，得到一级提取液；
S3、纯化：将S2中得到的一级提取液直接上聚酰胺柱，采用含有10vol%～40vol%提取剂的洗脱液进行梯度洗脱，收集流分，得到二级提取液；
S4、萃取：将S3中得到的二级提取液浓缩到一级提取液原体积的8%～20%，得到三级提取液，按照三级提取液与乙酸乙酯的体积比为1：3.5～4.5加入乙酸乙酯萃取两次，合并滤液，得到四级提取液；
S5、结晶：将S4中得到的四级提取液减压浓缩至四级提取液原体积的75%～88%，冷藏结晶，即得绿原酸。


2.根据权利要求1所述的一种高纯度绿原酸的制备方法，其特征在于：所述步骤S3中提取剂为乙醇，所述洗脱液的组分为纯水与乙醇，所述乙醇的含量为洗脱液总体积的10%～40%。

【专利技术属性】
技术研发人员：张光兰，
申请(专利权)人：成都乐美天医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51